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微生物教程yyd第八章微生物的遺傳變異和育種-文庫(kù)吧

2024-12-29 23:43 本頁(yè)面


【正文】 的突變株。若產(chǎn)量顯著高于原始菌株者稱正突變,反之則稱負(fù)突變。 突變率:某一細(xì)胞(或病毒粒子)在某一世代中發(fā)生某一性狀突變的幾率。 如突變率為 108表示細(xì)胞在 1億次分裂過(guò)程中,會(huì)發(fā)生 1次突變。 突變是獨(dú)立發(fā)生的,互相不影響,同一細(xì)胞中同時(shí)發(fā)生兩個(gè)或兩個(gè)以上突變的幾率極低。 雙重或多重突變的幾率是各個(gè)基因突變幾率的乘積。 (二)突變率 ① 自發(fā)性:是在沒(méi)有人為干涉的條件下產(chǎn)生的突。 ② 不對(duì)應(yīng)性:指突變性狀與引起突變的原因之間無(wú)直接的對(duì)應(yīng)關(guān)系。 ③ 稀有性:一般突變尤其是自發(fā)突變,幾率極小(幾率為106109)。 ④ 獨(dú)立性:某基因的突變率不受它種基因突變率的影響。 ⑤ 可誘變性:使用誘變劑,可顯著提高突變幾率,在遺傳育種上較常用。 ⑥ 穩(wěn)定性:突變后的新性狀可以穩(wěn)定地遺傳給下一代。 ⑦ 可逆性:由野生型基因變異為突變型基因,稱正向變異。由突變型基因返回到原始的野生型基因,稱回復(fù)突變。 (三) 突變的特點(diǎn) 7個(gè)共同點(diǎn) : (四)基因突變自發(fā)性和不對(duì)應(yīng)性的實(shí)驗(yàn)證明 變量實(shí)驗(yàn) 又稱彷徨試驗(yàn)或波動(dòng)實(shí)驗(yàn) 材料:噬菌體 T1—— 涂布在平板上作為所抗的環(huán)境因素; 對(duì)噬菌體 T1敏感的 —— 待實(shí)驗(yàn)菌株 結(jié)論: T1突變型是自發(fā)產(chǎn)生的,且產(chǎn)生的越早,抗性菌落出現(xiàn)的就越多。 T1僅起到淘汰原始未突變菌株和甄別抗噬菌體突變型的作用,并不是誘導(dǎo)因 素。 變量試驗(yàn) 大腸桿菌稀釋培養(yǎng)物 10 ml 10 ml (在同一個(gè)大管中作整體培養(yǎng) ) (培養(yǎng)前先分成 50小管 ) 2 3 7 1 4 4 3 5 抗噬菌體菌落數(shù) 抗噬菌體菌落數(shù) 涂布試驗(yàn) 涂布敏感菌 5 104個(gè) 共 12個(gè)平板 5 104個(gè)菌落 5000個(gè)細(xì)菌 /菌落 6個(gè)平板共 353個(gè)菌落 6個(gè)平板共 28個(gè)菌落 噴入 T1保溫 重新涂布后 噴入 T1保溫 結(jié)論: 該抗性突變發(fā)生在與 噬菌體 T1接觸之前,噬 菌體的加入只起到甄別該類自發(fā)突變是否發(fā)生、存 在,決不是誘發(fā)該類突變的原因。 影印培養(yǎng)試驗(yàn) 原始敏 感菌種 影印培養(yǎng) 無(wú)藥 培養(yǎng)基 含藥 培養(yǎng)基 結(jié)論: 對(duì)鏈霉素敏感的 K12細(xì)胞在未接觸過(guò)任何一點(diǎn)鏈霉素的條件下,由 1—— 2—— 4—— 5—— 6—— 8—— 9——10—— 12…… 的移種可篩選出大量抗鏈霉素的突變株。 (五)基因突變的機(jī)制 突變機(jī)制是多樣性的,可以是自發(fā)的或誘發(fā)的,具體見(jiàn)下圖。 誘發(fā)突變:簡(jiǎn)稱誘變,指通過(guò)人為的方法,利用物理、化學(xué)或生物因素顯著提高基因自發(fā)突變幾率的手段。 誘變劑:能夠提高突變幾率的任何因素。 ?堿基的置換 ?移碼突變 ?染色體畸變 ( 1) 堿基置換 它只涉及一對(duì)堿基被另一對(duì)堿基所置換,屬 于典型的點(diǎn)突變。 嘌呤置換嘌呤(嘧啶置換嘧啶) —— 轉(zhuǎn)換 嘌呤置換嘧啶或者嘧啶置換嘌呤 —— 顛換 A .. T A .. T A .. T G .. C A .. BU 酮式 G .. BU 烯醇式 置換 G .. C A .. BU G .. BU A .. BU G .. C A .. T 烯醇式 酮式 ( 2)移碼突變 指誘變劑使 DNA序列中的一個(gè)或少數(shù)幾個(gè)核苷酸增加或減少,從而使該部位后面的全部遺傳密碼的閱讀框架改變,引起轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)譯錯(cuò)誤的一類突變。 移碼突變屬于 DNA的輕微損傷,也是一種點(diǎn)突變,由移碼突變所產(chǎn)生的突變株稱為移碼突變株。 移碼突變的幾種情況如下圖示 移碼突變的結(jié)果:正常鏈上增加或是缺失 2或 5個(gè) 堿基時(shí),均可引起移碼突變,而增加或缺失 3或 6個(gè)不影 響讀碼,只引起較短的增加或缺失。 ( 3)染色體畸變 包括染色體結(jié)構(gòu)的缺失、重復(fù)、插入、易位、倒位 幾種情況,也包括染色體數(shù)目的變化。 1〉 染色體內(nèi)畸變:只涉及一條染色體上的變化,上 述幾種均可發(fā)生。 倒位: 斷裂下來(lái)的一段染色體逆轉(zhuǎn),然后,重新插入到 原位置。 易位: 斷裂下來(lái)的一小段染色體再順向或逆向地插入同 一染色體的其他部位上。 2〉 染色體間畸變:非同源染色體間的易位。一小段 DNA斷下后,可跳到另一條染色體上插入;質(zhì)粒上的 DNA 跳到另一個(gè)質(zhì)粒上,此種情況亦屬于染色體間畸變。 (原核微生物僅一條染色體,不存在“另一條”。 ) 嚴(yán)格地說(shuō), DNA從一個(gè)細(xì)胞跳到另一個(gè)細(xì)胞的易位, 亦屬于染色體間畸變。 總之,原核、真核微生物都存在染色體間畸變。 自發(fā)突變: 生物體在無(wú)人工干預(yù)下自然發(fā)生 的低頻突變。 自發(fā)突變的原因一般有: ? 背景輻射和環(huán)境因素的誘變 例如:宇宙輻射、南北極磁場(chǎng)等。 ? 微生物自身有害代謝產(chǎn)物的誘變效應(yīng) 例如:過(guò)氧化氫、過(guò)氧化物等。 ? DNA復(fù)制過(guò)程中堿基配對(duì)錯(cuò)誤引起 據(jù)統(tǒng)計(jì), DNA鏈在每次復(fù)制中每個(gè)堿基對(duì)錯(cuò)配頻率是1071011, 這樣一個(gè)基因的自發(fā)突變幾率約為 106。 紫外線對(duì) DNA的損傷是引起相鄰嘧啶形成嘧啶二聚 體( TT, TC, CC)。造成局部 DNA分子無(wú)法配對(duì)。 微生物有多種修復(fù)受損 DNA的作用,現(xiàn)舉兩例: ? 光復(fù)活作用 經(jīng)紫外線照射誘變的微生物立即暴露在可見(jiàn)光下,則微生物的死亡率和突變率將明顯降低的現(xiàn)象,稱 光復(fù)活作用 。 機(jī)理: 誘變形成的嘧啶二聚體在暗處結(jié)合光激活酶, 在有可見(jiàn)光的情況下,此酶吸收光能,解離嘧啶二聚體。 ? 暗修復(fù)作用 又稱 切除修復(fù) ,經(jīng)紫外線誘變損傷的 DNA在不見(jiàn)光的條件下,依靠微生物體內(nèi)的四種酶來(lái)修復(fù)受損的 DNA。 即:內(nèi)切核酸酶、外切核酸酶、 DNA聚合酶、連
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