微生物的遺傳變異和育種(11)-資料下載頁
2025-01-18 01:31本頁面
【正文】 ）原生質(zhì)體融合 ?1定義 : 通過人為的方法，使遺傳性狀不同的兩個(gè)細(xì)胞的原生質(zhì)體進(jìn)行融合，借以獲得兼有雙親遺傳性狀的穩(wěn)定重組子的過程，稱為原生質(zhì)體融合。由此法獲得的重組子，稱為融合子。 原核生物中的細(xì)菌和放線菌，而且還包括各種真核生物細(xì)胞 ?（ 1）先選擇兩株有特殊價(jià)值置于高滲溶液中 ,用脫壁酶去除細(xì)胞壁， （ 2）再將形成的原生質(zhì)體加入促融合劑 PEG或借電脈沖等因素促進(jìn)融合， （ 3）然后涂在平板上，檢驗(yàn)它們是否為穩(wěn)定的融合子，最后再測定其有關(guān)生物學(xué)性狀或生產(chǎn)性能 原生質(zhì)體融合示意圖 二、真核微生物的基因重組 ?（一）有性雜交 A 雜交 :是指在細(xì)胞水平上進(jìn)行的一種遺傳重組方式。 B 有性雜交 :一般指不同遺傳型的兩性細(xì)胞間發(fā)生的接合和隨之進(jìn)行的染色體重組，進(jìn)而產(chǎn)生新遺傳型后代的一種育種技術(shù)。 產(chǎn)生有性孢子的酵母菌、霉菌和蕈菌， （二）準(zhǔn)性雜交 ?1．定義 準(zhǔn)性生殖是一種在同種而不同菌株的體細(xì)胞間發(fā)生的融合 ,它可不借減數(shù)分裂而導(dǎo)致低頻率基因重組并產(chǎn)生重組子 2．準(zhǔn)性生殖過程 ? (1)菌絲聯(lián)結(jié) (2)形成異核體 (3)核融合或稱核配 (4)體細(xì)胞交換和單 倍體化 (1) 選擇親本 (2)強(qiáng)制異合 (3)移單菌落 (4)驗(yàn)穩(wěn)定性 (5)促進(jìn)變異 主要步驟和原理 第四節(jié)基因工程 ?一、基因工程定義 基因工程又稱遺傳工程，是指人們利用分子生物學(xué)的理論和技術(shù)，自覺設(shè)計(jì)、操縱、改造和重建細(xì)胞的遺傳核心 — 基因組，從而使生物體的遺傳性狀發(fā)生定向變異，以最大限度地滿足人類活動(dòng)的需要。 二、基因工程的基本操作 （一）目的基因的取得 （二）優(yōu)良載體的選擇 （三）目的基因與載體 DNA的體外重組 （四）重組載體導(dǎo)入受體細(xì)胞 （五）重組受體細(xì)胞的篩選和鑒定 （六）“工程菌”或“工程細(xì)胞”的大規(guī)模培養(yǎng) 基因工程的主要原理和操作步驟 三、基因工程的應(yīng)用 ?（一）在生產(chǎn)多肽類藥物、疫苗中的應(yīng)用 基因工程藥物的生產(chǎn)途徑的 4個(gè)階段： ①細(xì)菌基因工程， ②酵母菌等真核微生物細(xì)胞的基因工程； ③哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因工程 ④轉(zhuǎn)基因動(dòng)物或轉(zhuǎn)基因植物基因工程 （二）改造傳統(tǒng)工業(yè)發(fā)酵菌種 （三）動(dòng)、植物特性的基因工程改良 植物基因工程重點(diǎn)主要為： ①轉(zhuǎn)抗病蟲害基因 ②抗逆境植物品種的培育 ③高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)品種的培育 ④生產(chǎn)藥用多肽或可降解塑料等優(yōu)良品種 ⑤培育適應(yīng)商品化的優(yōu)良水果新品種 ⑥轉(zhuǎn)固氮、結(jié)瘤、分解纖維素或木質(zhì)素酶的基因，或是能提高光合作用效率等基因的新品種 （四）基因工程在環(huán)境保護(hù)中的應(yīng)用 第五節(jié)菌種的衰退、復(fù)壯和保藏 衰退 :是指由于自發(fā)突變的結(jié)果，而使某物種原有一系列生物學(xué)性狀發(fā)生量變或質(zhì)變的現(xiàn)象。 具體表現(xiàn)有： ①原有形態(tài)性狀變得不典型了， ②生長速度變慢，產(chǎn)生的孢子變少， ③代謝產(chǎn)物生產(chǎn)能力下降，即出現(xiàn)負(fù)變 ④致病菌對宿主侵染力的下降， ⑤對外界不良條件包括低溫、高溫或噬菌體侵染等抵抗能力的下降；等等。 ?一、菌種的衰退與復(fù)壯 ?廣義的復(fù)壯 :是一項(xiàng)積極的措施，即在菌種的典型特征或生產(chǎn)性狀尚未衰退前，就經(jīng)常有意識地采取純種分離和生產(chǎn)性狀的測定工作，以期從中選擇到自發(fā)的正變個(gè)體。 （一）衰退的防止 1．控制傳代次數(shù) 2. 創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件 3．利用不易衰退的細(xì)胞傳代 4. 采用有效的菌種保藏方法 （二）菌種的復(fù)壯 1．純種分離法 3．淘汰已衰退的個(gè)體 菌種保藏方法
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