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微生物的遺傳變異和育種-資料下載頁

2025-01-14 00:12本頁面
  

【正文】 接合 通過供體菌和受體菌完整細(xì)胞間的直接接觸而傳遞大段 DNA的過程 , 稱為接合 (有時(shí)也稱 雜交 )。 一、原核微生物的基因重組 接合: 是細(xì)菌通過性菌毛相互連接溝通,將遺傳物質(zhì)(主要是質(zhì)粒 DNA)從供體菌轉(zhuǎn)移給受體菌。能通過結(jié)合方式轉(zhuǎn)移的質(zhì)粒稱為接合性質(zhì)粒,不能通過性菌毛在細(xì)菌間轉(zhuǎn)移的質(zhì)粒為非接合性質(zhì)粒。 受體菌直接吸收了來自供體菌的 DNA片段 , 通過交換 , 把它組合到自己的基因組中 , 從而獲得了供體菌的部分遺傳性狀的現(xiàn)象 , 稱轉(zhuǎn)化 。 (二 )轉(zhuǎn)化 (三 ) 轉(zhuǎn)導(dǎo) 通過缺陷噬菌體的媒介 , 把供體細(xì)胞的 DNA片段攜帶到受體細(xì)胞中 , 從而使后者獲得了前者部分遺傳性狀的現(xiàn)象 , 稱為轉(zhuǎn)導(dǎo) 。 根據(jù)轉(zhuǎn)導(dǎo)基因片段的范圍,可將轉(zhuǎn)導(dǎo)分為兩類: 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo) (轉(zhuǎn)導(dǎo)的 DNA可是供菌染色體上的任何部分)、 局限性轉(zhuǎn)導(dǎo) (轉(zhuǎn)導(dǎo)的 DNA只限供菌染色體上的特定基因)。 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo) ( generalized transduction) (四 )原生質(zhì)體融合 通過人為方法 , 使遺傳性狀不同的兩細(xì)胞的原生質(zhì)體發(fā)生融合 , 并產(chǎn)生重組子的過程 , 稱為原生質(zhì)體融合或細(xì)胞融合 。 原生質(zhì)體融合的一般原理和主要過程 ? 先準(zhǔn)備兩個(gè)有選擇性遺傳標(biāo)記的突變株,在高滲溶液中,用適當(dāng)?shù)拿摫诿?(如細(xì)菌可用溶菌酶或青霉素處理,入線菌可用溶菌酶或相應(yīng)的脫壁權(quán)衡利弊,真菌可用蝸牛酶或相應(yīng)的脫壁酶等 )去除細(xì)胞壁,再將形成的原生質(zhì)體離心聚集,并加入促融合劑 PEG(聚乙二醇 )促進(jìn)融合,然后在高滲溶液中稀釋,涂在能使其再生細(xì)胞壁 或進(jìn)行分裂的培養(yǎng)基上,待形成菌落后,通過影印接種法,將其接種到各種選擇性培養(yǎng)基上,最后鑒定它們是否是重組子 ? (一)有性雜交 ? (二)準(zhǔn)性雜交 菌絲聯(lián)結(jié) 異核體的形成 形成雙倍體 分離子的產(chǎn)生 二、真核微生物的雜交育種 ?目的基因(即外源基因或供體基因)的取得 ?載體系統(tǒng)的選擇, ?目的基因與載體重組體的構(gòu)建, ?重組載體導(dǎo)入受體細(xì)胞, ?工程菌或工程細(xì)胞株的表達(dá)、檢測以及實(shí)驗(yàn)室和一系列生產(chǎn)性試驗(yàn)等。 第五節(jié) 基因工程 基本操作包括: 基因工程的應(yīng)用 ?在生產(chǎn)多肽類藥物、疫苗中的應(yīng)用 ?改造傳統(tǒng)工業(yè)發(fā)酵菌種 ?動(dòng)、植物特性的基因工程改良 ?基因工程在環(huán)境保護(hù)中的應(yīng)用 復(fù)習(xí)思考題 ? 名詞解釋:遺傳性型、表型、變異、飾變、營養(yǎng)缺陷型、野生型、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基、補(bǔ)充培養(yǎng)基、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合、光復(fù)活作用、誘變劑。 ? 歷史上證明核酸是遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)的試驗(yàn)有哪幾個(gè)? ? 如何能證明基因突變的自發(fā)性和不對應(yīng)性? ? 誘變育種的基本環(huán)節(jié)有哪些?應(yīng)注意哪些問題? ? 簡述基因工程的基本操作過程
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