高考生物一輪復(fù)習(xí)人教版選修三(1)-資料下載頁
2025-01-09 13:49本頁面
【正文】 ___。 (7)為了從 cDNA文庫(kù)中分離獲取蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因 ， 將重組質(zhì)粒導(dǎo)入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體 ， 然后在 ________的培養(yǎng)基中培養(yǎng) ， 以完成目的基因表達(dá)的初步檢測(cè) 。 高三總復(fù)習(xí) 人教版 生物 解析： (1)切割前質(zhì)粒為環(huán)狀 ， 不含游離的磷酸基團(tuán) 。 切割后質(zhì)粒成了一個(gè)鏈狀的雙鏈 DNA分子 ， 含兩個(gè)游離的磷酸基團(tuán) 。 (2)因?yàn)?SmaⅠ 識(shí)別序列中均為 G—C堿基對(duì) ， G、 C之間含三個(gè)氫鍵 ， 熱穩(wěn)定性高 。 (3)據(jù)圖可知 ， SmaⅠ 既會(huì)破壞標(biāo)記基因 ， 也會(huì)破壞目的基因 。 (4)若用同種限制酶切割質(zhì)粒和外源 DNA中的目的基因 ， 因?yàn)閮啥说酿ば阅┒讼嗤?， 會(huì)出現(xiàn)自身環(huán)化的情況 。 而用兩種限制酶切割 ， 因?yàn)閮啥诵纬傻酿ば阅┒瞬煌?， 不會(huì)出現(xiàn)自身環(huán)化 。 高三總復(fù)習(xí) 人教版 生物 (5)DNA連接酶可以連接具有相同黏性末端的 DNA片段 。 (6)標(biāo)記基因可以鑒別受體細(xì)胞是否含有目的基因 。 (7)把蔗糖作為培養(yǎng)基的唯一碳源 ， 可以把不能完成目的基因表達(dá)的受體細(xì)胞淘汰掉 。 高三總復(fù)習(xí) 人教版 生物 答案： (1)0、 2 (2)高 (3)SmaⅠ 會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因 、 外源 DNA中的目的基因 (4)質(zhì)粒和含目的基因的外源 DNA片段自身環(huán)化 (5)DNA連接 (6)鑒別和篩選含有目的基因的細(xì)胞 (7)蔗糖為唯一含碳營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 高三總復(fù)習(xí) 人教版 生物 7． 右圖為某種質(zhì)粒表達(dá)載體簡(jiǎn)圖 ， 小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶 EcoRI、BamHI的酶切位點(diǎn) ， ampR為青霉素抗性基因 ， tctR為四環(huán)素抗性基因 ， P為啟動(dòng)子 ， T為終止子 ， ori為復(fù)制原點(diǎn) 。 已知目的基因的兩端分別有包括 EcoRI、 BamHI在內(nèi)的多種酶的酶切位點(diǎn) 。 據(jù)圖回答： 高三總復(fù)習(xí) 人教版 生物 (1)將含有目的基因的 DNA與質(zhì)粒表達(dá)載體分別用 EcoRI酶切 ， 酶切產(chǎn)物用 DNA連接酶進(jìn)行連接后 ， 其中由兩個(gè) DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有 ____________、 __________、 ____________三種 。 若要從這些連接產(chǎn)物中分離出重組質(zhì)粒 ， 需要對(duì)這些連接產(chǎn)物進(jìn)行________________。 高三總復(fù)習(xí) 人教版 生物 (2)用上述 3種連接產(chǎn)物與無任何抗藥性的原核宿主細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn) 。 之后將這些宿主細(xì)胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中 ， 能生長(zhǎng)的原核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是 ______________；若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中 ， 能生長(zhǎng)的原核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是________________。 高三總復(fù)習(xí) 人教版 生物 (3) 目的基因表達(dá)時(shí) ， RNA 聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)是 ______________， 其合成的產(chǎn)物是 __________________。 (4)在上述實(shí)驗(yàn)中 ， 為了防止目的基因和質(zhì)粒表達(dá)載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接 ， 酶切時(shí)應(yīng)選用的酶是 _______________。 高三總復(fù)習(xí) 人教版 生物 解析： (1)在基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程中用同種限制酶來切割目的基因和質(zhì)粒 ， 使之產(chǎn)生相同的黏性末端 ， 以利于 DNA片段的連接 。 將切割后的目的基因和質(zhì)粒 ， 用 DNA連接酶進(jìn)行連接 ， 它們之間隨機(jī)連接 ， 可有三種產(chǎn)物：目的基因 —載體連接物 、 載體 —載體連接物和目的基因 —目的基因連接物 。 獲得 DNA連接產(chǎn)物以后 ， 必須通過篩選才能獲得所需的基因表達(dá)載體 ， 導(dǎo)入宿主細(xì)胞后才能表達(dá)獲得基因產(chǎn)物 。 高三總復(fù)習(xí) 人教版 生物 (2)從圖中可以看出 ， 目的基因的插入位點(diǎn)在抗四環(huán)素基因上 ， 可推知：目的基因 —載體連接物的抗四環(huán)素基因被破壞 ， 喪失了抗四環(huán)素的能力 ， 但保留了抗青霉素的能力；載體 —載體連接物既保留了抗四環(huán)素的能力也保留了抗青霉素的能力；目的基因 —目的基因連接物既無抗青霉素基因也無抗四環(huán)素基因 ， 不具備抗性 。 (3)目的基因表達(dá)過程中 ，RNA聚合酶首先與啟動(dòng)子結(jié)合 ， 指導(dǎo)目的基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生 mRNA，mRNA再指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成 。 高三總復(fù)習(xí) 人教版 生物 (4)若只用 EcoRⅠ (或只用 BamHⅠ )切割質(zhì)粒及目的基因 ， 連接時(shí)有三種產(chǎn)物 ， 所以在實(shí)際操作過程中 ， 為避免切割后的末端任意連接 ，可用 EcoRⅠ 和 BamHⅠ 同時(shí)對(duì)目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割 ， 目的基因兩端的黏性末端不同 ， 就不存在目的基因 —目的基因連接物；質(zhì)粒切口處兩端的黏性末端不同 ， 就不存在載體 —載體連接物 ， 只能得到目的基因 —載體一種連接物了 。 高三總復(fù)習(xí) 人教版 生物 答案： (1)目的基因 —載體連接物 、 載體 —載體連接物 39。目的基因 —目的基因連接物 39。分離純化 39。(2)載體 —載體連接物 39。目的基因 —載體連接物 、載體 —載體連接物 39。(3)啟動(dòng)子 39。mRNA39。(4)EcoRⅠ 和 BamHⅠ 高三總復(fù)習(xí) 人教版 生物
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