【正文】 度法 常用的波長范圍為 :(1)200～ 400nm 的紫外光區(qū)； (2)400～ 760nm的可見光區(qū)； (3)760～ 2500nm 的近紅外光區(qū)； (4)～ 25μ m（按波數(shù)計為4000～ 400cm1）的 中 紅外光區(qū) 。 注 :增加 “ 中 ” 和 “ 近 ” 紅外光區(qū)定義。 135 附錄 ⅣA 紫外 可見分光光度法 增加儀器校正手段 (1)2022版收載 :汞燈和鈥玻璃 (2)新增 :近年來，常使用高氯酸鈥溶液校正雙光束儀器，以 10％的高氯酸為溶劑，配制含氧化鈥（ Ho2O3）4％的溶液，該溶液的吸收峰波長為 ， ， ， ， ， ， ， 和 。 儀器波長的允許誤差為：紫外區(qū) 177。 1nm， 500nm 附近 177。 2nm。 (3)一般供試品溶液的吸光度讀數(shù)，以在 ～ 【 (刪除 )的 誤差較小 】 為宜。 136 (1)明確校正物質： 用 聚苯乙烯薄膜校正時 ,… (2) 原料藥多晶型處理方法： 采用固體制樣技術時 ，最常碰到的問題是多晶現(xiàn)象，固體樣品的晶型不同， 其紅外光譜往往也會產生差異。當供試品的實測光譜與《藥品紅外光譜集》所收載的標準光譜不一致時， 在排除各種可能影響光譜的外在或人為因素后， 應按該藥品 光譜圖中備注的方法或各品種正文中規(guī)定的方法進行預處理 ，再繪制光譜，比對。如未規(guī)定該品供藥用的晶型或預處理方法，則可使用對照品，并采用適當?shù)娜軇?供試品與對照品在相同的條件下同時進行重結晶 ，然后依法繪制光譜，比對。如已規(guī)定特定的藥用晶型，則應采用相應晶型的對照品依法比對 。 (從”注意事項”中提上來 ) 當采用固體制樣技術不能滿足鑒別需要時，可改用溶液法測定光譜后比對。 附錄 Ⅳ C 紅外分光光度法 137 (3)制劑鑒別 品種鑒別項下應明確規(guī)定制劑的前處理方法，通常采用溶劑提取法。提取時應選擇適宜的溶劑，以盡可能減少輔料的干擾，并力求避免導致可能的晶型轉變。提取的樣品再經適當干燥后依法進行紅外光譜鑒別。 【 （刪除） 品種項下應明確規(guī)定供試品的處理方法 ，如處理后輔料無干擾，則可直接與原料藥的標準光譜進行對比；如輔料仍存在不同程度的干擾，則可參照原料藥的標準光譜在指紋區(qū)內選擇 3～ 5 個輔料無干擾的待測成分的特征吸收峰，列出它們的 2波數(shù)位置作為鑒別的依據(jù)，實測譜帶的波數(shù)誤差應小于規(guī)定波數(shù)的 %。 】 附錄 Ⅳ C 紅外分光光度法 138 (4)多組分原料藥鑒別 不能采用全光譜比對，可借鑒注意事項（ 3）的方法，選擇主要成分的若干個特征譜帶，用于組成相對穩(wěn)定的多組分原料藥的鑒別。 附錄 Ⅳ C 紅外分光光度法 139 藥物制劑經提取處理并依法錄制光譜，比對時存在如下四種可能： (1)輔料無干擾， 待測成分的晶型不變化，此時可 直接 與原料藥的標準光譜進行比對； (2)輔料無干擾，但待測成分的晶型有變化，此種情況可用對照品經同法處理后 的光譜比對； (3)待測成分的晶型不變化，而 輔料存在不同程度的干擾，此時可參照原料藥的標準光譜，在 指紋區(qū)內選擇 3～ 5 個不受輔料干擾待測成分的特征譜帶 ，以這些譜帶的位置（波數(shù)值）作為鑒別的依據(jù)。鑒別時，實測譜帶的波數(shù)誤差應小于規(guī)定值的 %； (原藥典制劑中移入 ) (4)待測成分的晶型有變化，輔料也存在干擾，此種情況使問題變得復雜，故一般不宜采用紅外鑒別。 附錄 Ⅳ C 紅外分光光度法 140 (1)氫化物發(fā)生原子化器 由氫化物發(fā)生器和原子吸收池組成，可用于砷、 鍺、鉛、鎘 、 硒、錫、銻等元素的測定。 (2)背景校正系統(tǒng)： 背景干擾是原子吸收測定中的常見現(xiàn)象 。背景吸收通常來源于樣品中的共存組分及其在原子化過程中形成的次生分子或原子的熱發(fā)射、光吸收和光散射等。這些干擾在儀器設計時應設法予以克服 。 【 (刪除 )其作用是校正供試品原子化時蒸氣相對吸收測定的干擾 】 ，常用的背景校正法有連續(xù)光源（在紫外區(qū)通常用氘燈）、塞曼效應、自吸效應、非吸收線等。 附錄 ⅣD 原子吸收分光光度法 141 附錄的增修訂情況 附錄 Ⅴ 色譜法 附錄 ⅤA 紙色譜法 附錄 ⅤB 薄層色譜法 附錄 ⅤC 柱色譜法 附錄 ⅤD 高效液相色譜法 附錄 ⅤE 氣相色譜法 附錄 V F 電泳法 附錄 V G 毛細管電泳法 附錄 V H 分子排阻色譜法 附錄 V J 離子色譜法（新增） 142 增加高效薄層板的規(guī)定 : (1)粒徑一般為 5～ 7μ m (2)樣點直徑為 2～ 4mm(高效薄層板為 1～ 2mm) (3)點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜，一般為 ～ （高效薄層板可不小于5mm） (4)展開至適宜的展距（如： 20cm 的薄層板，展距一般為 10～ 15cm， 高效薄層板展距一般為 5 cm左右 ）， 取出薄層板，晾干，按各品種項下的規(guī)定檢測。 附錄 ⅤB 薄層色譜法 143 對 系統(tǒng)適用性試驗 進行完善 : (1)檢測靈敏度系指雜質檢查時， 供試品溶液中被測物質能被檢出的最低量。一般 采用對照溶液稀釋若干倍 … (2)比移值（ Rf） … 除另有規(guī)定外，比移值（ Rf）應在 ～ 。 (3)分離效能 … 將雜質對照品用供試品自身稀釋對照溶液溶解制成混合對照溶液， 也可將雜質對照品用待測組分的對照品溶液溶解制成混合對照溶液，還可采用供試品以適當?shù)慕到夥椒ǐ@得的溶液， … 附錄 ⅤB 薄層色譜法 144 (1) 色譜柱 規(guī)定色譜柱粒徑： 除另有規(guī)定外， 普通 分析柱的填充劑粒徑一般在 3μ m～ 10μ m之間。粒徑更?。s2μ m）的填充劑常用于填裝微徑柱（約 2mm） 。 快速液相： 使用微徑柱時，輸液泵的性能、進樣體積、檢測池體積和系統(tǒng)的死體積等必須與之匹配；如有必要，色譜條件也需作適當?shù)恼{整。當對其測定結果產生爭議時，應按品種正文規(guī)定的色譜條件的測定結果為準。 以硅膠為載體的鍵合固定相的使用溫度通常不超過 40℃ ，為改善分離效果可適當提高色譜柱的使用溫度，但也不宜超過 60℃ 。 附錄 ⅤD 高效液相色譜法 145 (2)檢測器 最常用的檢測器為紫外檢測器，包括二極管陣列檢測器。 即將 DAD并入 UV,上版作為其他檢測器 附錄 ⅤD 高效液相色譜法 146 (3)流動相 新增流動相選擇原則 反相色譜系統(tǒng)的流動相首選甲醇－水系統(tǒng)（采用紫外末端波長檢測時，首選乙腈 水系統(tǒng)），如經試用不適合時，再選用其他溶劑系統(tǒng)。應盡可能少用含有緩沖液的流動相，必須使用時，應盡可能選用含較低濃度緩沖液的流動相。 新增流動相調整原則 調整流動相組分比例時，以組分比例較低者（小于或等于 50%）相對改變量不超過177。 30%且絕對改變量不超過 177。 10%為限，如 30%相對改變量的數(shù)值超過 10%時，則改變量以 177。 10%為限。 附錄 ⅤD 高效液相色譜法 147 (4)系統(tǒng)適用性試驗 理論板數(shù)：用于評價色譜柱的效能。由于不同物質在同一色譜柱上的色譜行為不同，采用理論板數(shù)作為衡量柱效能的指標時，應指明測定物質，一般為待測組分或內標物質的理論板數(shù)。 … 峰寬 (W)或半高峰寬 (Wh/2)， 按 n=16(tR/W)2 或n=(tR/Wh/2)2 計 附錄 ⅤD 高效液相色譜法 148 (4)系統(tǒng)適用性試驗 分離度（ R） 用于評價待測組分與相鄰共存物或難分離物質之間的分離程度，是衡量色譜系統(tǒng)效能的關鍵指標。雜質檢查的方法選擇時，可以通過測定待測物質與已知雜質的分離度，也可以通過測定待測組分與某一添加的指標性成分（內標物質或其它難分離物質）的分離度，還可以將供試品用適當?shù)姆椒ń到?，通過測定待測組分與某一降解產物的分離度，對建立的色譜系統(tǒng)進行評價與控制。 附錄 ⅤD 高效液相色譜法 149 (4)系統(tǒng)適用性試驗 除另有規(guī)定外，待測組分與相鄰共存物之間的分離度應大于 ；或經過驗證，待測組分與指標性成分之間的分離度應大于某一規(guī)定值。 分離度的計算公式為： R=2(tR2tR1)/(W1+W2) 或 R=2(tR2tR1)/(W1h/2+W2h/2) 當對測定結果有歧義時，色譜柱的理論塔板數(shù)（ n）和分離度（ R）均以峰寬（ W）的計算結果為準。 附錄 ⅤD 高效液相色譜法 150 系統(tǒng)適用性試驗 重復性： 用于評價連續(xù)進樣后，色譜系統(tǒng)響應值的重復性能。采用外標法時，通常 取各品種項下的對照品溶液，連續(xù)進樣 5 次，除另有規(guī)定外，其峰面積測量值的相對標準偏差應不大于 %； 采用內標法時，通常 配制相當于 80%、 100%和 120%的對照品溶液，加入規(guī)定量的內標溶液，配成 3 種不同濃度的溶液，分別至少進樣 2 次，計算平均校正因子。其相對標準偏差應不大于 %。 附錄 ⅤD 高效液相色譜法 151 系統(tǒng)適用性試驗 拖尾因子：用于評價色譜峰的對稱性。 … 若拖尾嚴重，將影響峰面積的準確測量。必要時，可根據(jù)情況對拖尾因子作出規(guī)定 。 【 (刪除 )峰面積法測定時， T值偏離過大，也會影響小峰的檢測和定量的準確度 】 (5)有關物質 靈敏度：可根據(jù)各品種的情況，配制靈敏度測試用溶液（通常為最低檢出濃度） ,并規(guī)定低于此濃度的峰面積響應值可忽略不計 。 附錄 ⅤD 高效液相色譜法 152 附錄 ⅤF 電泳法 增訂第六法 —— 等電聚焦水平板電泳法 用于檢測蛋白類和肽類供試品的等電點。 原理：兩性電解質在電泳場中形成一個 pH梯度，由于蛋白質為兩性化合物，所帶電荷與介質的 pH值有關，帶電的蛋白質在電泳中向極性相反的方向遷移，到達等電點（此處的 pH值使相應的蛋白質不再帶電荷）時，電流達到最小，不再移動 。 153 附錄 ⅤJ 離子色譜法 應用：無機陰離子、無機陽離子、有機酸、糖醇類、 氨基糖類、氨基酸、蛋白質、糖蛋白等物質的定性和定量分析。 分離機理：離子交換（主要依賴于色譜柱的填充劑） 洗脫液：分離陰離子常采用稀堿溶液、碳酸鹽緩沖液等；分離陽離子常采用稀甲烷磺酸溶液等。通過增加或減少洗脫液中酸堿溶液濃度可提高或降低洗脫液洗脫能力 。在洗脫液內加入適當甲醇、乙腈等改善峰形。 檢測器：電導檢測器，其他紫外、安培、蒸發(fā)光散射 應用：氯膦酸二鈉原料藥有關物質與制劑含量測定 154 附錄 ⅤJ 離子色譜法 具體應用品種 ? 肝素鈉 肝素鈉及注射液中多硫酸軟骨素的鑒別以及含量確定 ? 帕米磷酸二鈉 注射用帕米膦酸二鈉及注射液中含量測定 ? 氯膦酸二鈉及其制劑 氯膦酸二鈉及其膠囊與注射液的含量測定 ? 鹽酸頭孢吡肟中的 N甲基吡咯烷 電導檢測法 155 附錄的增修訂情況 附錄 Ⅵ( 物理常數(shù)測定 ) 附錄 ⅥA 相對密度測定法 附錄 ⅥB 餾程測定法 附錄 ⅥC 熔點測定法 附錄 ⅥD 凝點測定法 附錄 ⅥE 旋光度測定法 附錄 ⅥF 折光率測定法 附錄 ⅥG 黏度測定法 附錄 ⅥH pH 值測定法 156 附錄 ⅥH pH 值測定法 增加內容： pH的含義 pH=log aH+ pH值的測定原理 pH=pHs+（ EEs） /R R=+（ t25℃ ） 影響 pH值測定因素電離常數(shù)、介電常數(shù)和液接界電位 表觀 pH值：待測溶液與標準緩沖液的組成足夠接近校正 氫氧化鈣標準緩沖液 :… 因本緩沖液是 25℃ 時的氫氧化鈣飽和溶液，所以臨用前需 核對溶液的溫度 是否在 25℃ ，否則需調溫至 25℃ 后再經溶解平衡后，方可取上清液使用。 … 157 附錄的增修訂情況 附錄 Ⅶ 附錄 ⅦA 電位滴定法與永停滴定法 附錄 ⅦB 非水溶液滴定法 附錄 ⅦC 氧瓶燃燒法 附錄 ⅦD 氮測定法 附錄 ⅦE 乙醇量測定法 附錄 ⅦF 甲氧基、乙氧基與羥丙氧基測定法 附錄 ⅦH 脂肪和脂肪油測定法 附錄 ⅦJ 維生素 A測定法 附錄 ⅦK 維生素 D測定法 附錄 ⅦL 2 乙基己酸測定法（新增） 附錄 ⅦM 蛋白質含量測定法（新增） 附錄 ⅦN 合成多肽中的醋酸測定法（新增） 158 附錄 Ⅶ E 乙醇量測定法 (1)增加 第一法 (毛細管柱法 ) 色譜條件： 聚乙二醇為固定液毛細管柱；柱溫：程序升溫， 50℃(7 分鐘 )， 10℃/ 分鐘升溫至 110℃ ；進樣口 190℃ ；檢測器 (FID)溫度 220℃ ；分流進樣；載氣：N2。按正丙醇峰計算應不低于 8000，乙醇和正丙醇兩峰的分離度應大于 。 校正因子：同第二法（填充柱），濃度可進一步稀釋。 測定法：同第二