酶的生物合成法生產(chǎn)-資料下載頁
2025-01-06 15:53本頁面
【正文】 ☆ 分解代謝物阻遏現(xiàn)象： 實驗： 細(xì)菌在含有葡萄糖和乳糖的培養(yǎng)基上生長，優(yōu)先利用葡萄糖。待葡萄糖耗盡后才開始利用乳糖，產(chǎn)生了兩個對數(shù)生長期中間隔開一個生長延滯期的“二次生長現(xiàn)象” (diauxie或biphasic growth） 。 0 2 4 6 8020406080 細(xì)胞濃度(OD)時 間(h) 這一現(xiàn)象又稱 葡萄糖效應(yīng)，產(chǎn)生的原因是由于葡萄糖降解物阻遏了分解乳糖酶系的合成。 此調(diào)節(jié)基因的產(chǎn)物是環(huán)腺苷酸受體蛋白（ CRP） ,亦稱降解物基因活化蛋白（ CAP）。 ☆ 分解代謝物阻遏 R LacZ LacY Laca mRNA mRNAZ mRNAY mRNAa 基 因 表達(dá) CAP基因 結(jié)構(gòu)基因 T CAP O CAP結(jié)合部位 RNA聚合酶 T cAMP CAP P 葡萄糖 分解代謝產(chǎn)物 腺苷酸環(huán)化酶 磷酸二 酯酶 ATP cAMP 539。AMP 抑制 激活 葡萄糖降解物與 cAMP的關(guān)系 cAMP CAP：降解物基因活化蛋白（ catabolic gene activation protein） 降低 cAMP濃度 使 CAP呈失活狀態(tài) 三、提高酶產(chǎn)量的策略 （一）菌種選育（一勞永逸） (1) 使誘導(dǎo)型變?yōu)榻M成型 —— 選育組成型突變株 (2) 使阻遏型變?yōu)槿プ瓒粜? 選育營養(yǎng)缺陷型突變株 解除反饋阻遏 選育結(jié)構(gòu)類似物抗性突變株 解除分解代謝物阻遏 — 選育抗分解代謝阻遏突變株 2. 基因工程育種 ☆ （二）條件控制 1. 添加誘導(dǎo)物 酶的底物類似物最有效。 2. 降低阻遏物濃度 除去終產(chǎn)物 產(chǎn)物阻遏 添加阻止產(chǎn)物形成的抑制劑 避免使用葡萄糖 分解代謝物阻遏 避免培養(yǎng)基過于豐富 添加一定量的 cAMP ☆ 離子型 對細(xì)胞有毒害作 表面活性劑 Tween－ 80 非離子型 增加細(xì)胞通透性 TritonX－ 100 4. 添加產(chǎn)酶促進(jìn)劑 ☆ 思考題 : 1 名詞 : 誘導(dǎo)物 終產(chǎn)物阻遏 分解代謝產(chǎn)物阻遏 葡萄糖效應(yīng) 2舉例說明酶生物合成調(diào)節(jié)機(jī)制在酶發(fā)酵過程優(yōu)化中的指導(dǎo)意義 . 3舉例說明酶生物合成調(diào)節(jié)機(jī)制在產(chǎn)酶微生物菌種改造中的指導(dǎo)意義 . 4在酶的發(fā)酵過程中 ,提高酶產(chǎn)量的措施有哪些 ? 5說說微生物產(chǎn)酶菌種的要求 6如果篩選酸性蛋白酶高產(chǎn)菌株 ,如何進(jìn)行篩選 ? 7結(jié)合酶生物合成模式 ,談?wù)勅绾翁岣呙傅暮铣闪?? ☆
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