食品衛(wèi)生微生物ppt課件-資料下載頁(yè)
2025-01-05 20:57本頁(yè)面
【正文】 腹痛 ， 約持續(xù) 1～ 2d， 拉水樣便 ， 便中有粘液和膿血 。 少數(shù)病人可出現(xiàn)意識(shí)不清 、痙攣 、 臉色蒼白 、 血壓下降及休克等癥狀 。 第五節(jié) 副溶血性弧菌 ? 一 、 生物學(xué)特性 ? （ 一 ） 形態(tài)和染色特性 ? 本菌為多形態(tài) ， 表現(xiàn)為桿狀 、 稍彎曲的弧狀 ， 有時(shí)呈棒狀 、 球狀或球桿狀等 。 本菌無(wú)芽孢 ， 有單鞭毛 ， 能活潑運(yùn)動(dòng) ， 革蘭氏染色陰性 。 ? （ 二 ） 培養(yǎng)特性 ? 本菌為需氧或兼性厭氧菌 ， 但在厭氧時(shí)生長(zhǎng)非常緩慢 。 生長(zhǎng)的溫度范圍在 8～ 44℃ ， 最適生長(zhǎng)溫度為 37℃ ， 生長(zhǎng)的 pH范圍 ～ ，最適 pH為 ～ 。 ? （ 三 ） （ 四 ） 抵抗力 ? 本菌的抵抗力不強(qiáng) ， 不耐熱 ， 經(jīng) 56℃ 30min、 75℃ 5min、 90℃ 1min加熱即可殺死 。 對(duì)醋酸更為敏感 ， 在食醋中經(jīng) 5min即死亡 ， 1％ 醋酸 1min可致死 。 在淡水中生存不超過(guò) 2d， 在鹽漬醬菜中存活30d以上 ， 在海水中能存活 47d以上 。 本菌對(duì)四環(huán)素 、 氯霉素 、 金霉素敏感 。 ?（ 五 ） 抗原結(jié)構(gòu) ?本菌具有耐熱的 O抗原 ， 不耐熱的 K抗原和 H抗原三種 。 經(jīng)過(guò)凝集試驗(yàn)分為 12個(gè) O群和 70個(gè) K型 。 多數(shù)均具有相同的 H抗原 。 H抗原又稱(chēng)不耐熱抗原 ， 其穩(wěn)定性和特異性均不理想 。 經(jīng)加熱 100℃ 30min就被破壞 ， 因此不用 H抗原進(jìn)行分類(lèi) 。 ?在 O3群中 ， O3:K6血清型副溶血性弧菌被報(bào)道可能比其它血清型更能導(dǎo)致腹瀉和感染 。 Calcultta通過(guò)實(shí)驗(yàn)證實(shí) O3： K6菌株能產(chǎn)生較高水平的耐熱溶血素 （ TDH） 。 ?（ 六 ） 致病因子 ? 耐熱型直接溶血素 (TDH)相對(duì)分子量為 42022， 由 2條相同的氨基酸鏈組成 ， 每條氨基酸鏈由 567個(gè)氨基編碼成 189個(gè)氨基酸 ， 其中前 24個(gè)氨基酸為信號(hào)肽 ， 后 165個(gè)氨基酸為功能區(qū) 。 TDH是一種致毒心臟的細(xì)胞毒蛋白 ， 可以致死老鼠 ， 在兔回腸循環(huán)試驗(yàn)中誘導(dǎo)一種陽(yáng)性反應(yīng) 。 ?在用 PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí) ， 根據(jù) tdh基因序列設(shè)計(jì)引物 ， 在其 5，端加上合適的限制性酶切位點(diǎn)和保護(hù)性序列 ， 序列如下： ?P1： 5， CGGAATTCATGAAACACCAATATTTTGC3， ； ?P2： 5， CGCGGATCCTTATTTTTATTGTTGATGT3， 。 ?采用 ELISA方法分析時(shí)，所有的基因陽(yáng)性菌株都能產(chǎn)生耐熱型直接溶血素。 第六節(jié) 單核增生李斯特氏菌及其食物中毒 ? 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌，是一種能在冷藏溫度下存活的致病菌。因?yàn)槠浼?xì)胞的苯酚 水浸出物可以誘導(dǎo)單核細(xì)胞的生成 ,而獲得了“ 單核增生細(xì)菌 ” 這個(gè)種名。 ? 一 、 生物學(xué)特性 ? （ 一 ） 、 形態(tài)與結(jié)構(gòu) ? 該菌為小的革蘭氏陽(yáng)性類(lèi)球形桿菌 ， 大小約為 ～ ～ m,圓端 ,直或稍彎 ， 單個(gè) 、 呈 V字型排列或成對(duì)排列 ， 兼性厭氧 、 無(wú)芽孢 ， 一般不形成莢膜 。 ? （ 二 ） 、 培養(yǎng)特性 ? 該菌生長(zhǎng)需要 B族維生素 —生長(zhǎng)素 、 核黃素 、 硫胺素和硫辛酸和氨基酸 —半胱氨酸 、 谷氨酰胺 、 異亮氨酸 、 亮氨酸和纈氨酸 。 葡萄糖能促進(jìn)所有李斯特菌的生長(zhǎng) ， 并產(chǎn)生 L(+)乳酸 。 ? （ 三 ） 、 血清型 ? 根據(jù)菌體 （ O） 抗原和鞭毛 (H)抗原 ， 將單增李斯特氏菌分成13個(gè)血清型 ， 分別是 1/2a、 1/2b、 1/2c、 3a、 3b、 3c、 4a、 4b、4ab、 4c、 4d、 4e 和 “ 7”13 個(gè)血清型 。 致病菌株的血清型一般為1/2b、 1/2c、 3a、 3b、 3c、 4a、 1/2a和 4b,尤其是后兩種 。 第六節(jié) 單核增生李斯特氏菌及其食物中毒 ? 1． prfA基因簇 單增李斯特氏菌的染色體上存在一個(gè)特征性的 prfA基因簇，起到控制李斯特氏菌在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制和細(xì)胞間傳播的作用。 ? 這個(gè)基因簇由六個(gè)基因組成： prfA、 plcA、hly、 mpl、 actA和 plcB，分為三個(gè)轉(zhuǎn)錄單元。hly單順?lè)醋诱紦?jù)了中心位置，編碼一種帶有膽固醇的成孔毒素 —— “李斯特菌溶血素O”(LLO),它與鏈球菌溶血素 O(SLO)和肺炎鏈球菌溶血 O(PLO)是高度同源性的物質(zhì)。 2．內(nèi)化素 李斯特氏菌中存在兩大內(nèi)化素家族，一個(gè)由70～ 80Kda的大分子量蛋白組成，通過(guò)碳末端與細(xì)菌細(xì)胞壁相連。這一組以 inlA和 inlB為代表，包括至少六個(gè)其它成員（ inlC inlD、 inlE、 inlF、 inlG和 inlH），這些成員都是在單核增生李斯特氏菌中發(fā)現(xiàn)。另外一組包括一些分子量較小的蛋白，大約為 25～ 30Kda，它們?nèi)狈εc細(xì)胞壁相連的碳末端錨定區(qū)域，從而被釋放到胞外。其代表就是從單核增生李斯特氏菌中分離的 inlC,還包括 iinlC、 iinlD、iinlE、 iinlF和 iinlG。它們都是從綿羊李斯特氏菌中發(fā)現(xiàn)的。這些已知的內(nèi)化素通常兩個(gè)或幾個(gè)組合在一起形成侵襲單元，唯一特別的是 inlC和 inlF，它們?cè)趩魏嗽錾钏固厥暇娜旧w上單獨(dú)存在。由于存在高度保守的重復(fù)序列（ LRR對(duì)所有的內(nèi)化素都一樣， B或 C重復(fù)序列存在于與細(xì)胞壁相連的大分子量的內(nèi)化素的碳末端區(qū)域）， inl基因表現(xiàn)高的序列相似性。 第七節(jié) 肉毒梭狀芽孢桿菌 （ Clostridium bobulinm） ? (1) 形態(tài)與染色特性。本菌是兩端鈍圓的粗大桿菌，大小為 ～ 4～ 6μ m，多單生，偶見(jiàn)成雙或短鏈，有周身鞭毛，無(wú)莢膜，能形成橢圓形芽孢，革蘭氏染色陽(yáng)性。 (2) 培養(yǎng)特性。本菌為嚴(yán)格厭氧菌，對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求不高，在普通瓊脂培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，生長(zhǎng)最適溫度為 28～ 37oC，生長(zhǎng)最適 pH值 ～，產(chǎn)毒最適 pH值 ～ 。本菌在血清瓊脂上培養(yǎng) 48～ 72h，形成中央隆起、邊緣不整齊、灰白色、表面粗糙的絨球狀菌落。 本菌的繁殖體抵抗力一般，經(jīng)加熱 80oC 30min或 100oC 10min即可殺死，但其芽孢的抵抗力很大，可耐煮沸 1～ 6h之久，于 180oC干熱 5～15min、 120oC高壓蒸氣滅菌 10～ 20min才能殺死。肉毒毒素抵抗力也較強(qiáng)， 80oC 30min或 100oC 10min才能完全破壞，正常胃液和消化酶于 24h不能將其破壞，因此可在胃腸吸收而引起中毒。 (3) 中毒機(jī)理及癥狀 肉毒桿菌食物中毒由肉毒素所引起，所以它屬于毒素型食物中毒。主要作用于神經(jīng)和肌肉的連接處及植物神經(jīng)末稍，阻礙神經(jīng)末稍乙酰膽堿的釋放，導(dǎo)致肌肉收縮和神經(jīng)功能不全。
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