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酶切回收連接ppt課件-資料下載頁

2025-01-05 19:51本頁面
  

【正文】 20 μl NaAc, 400 μl無水乙醇沉淀 DNA,冰凍約 30 min甚至過夜。 ,000 rpm離心 10 min,棄上清。 DNA溶于約 30μl TE中。 DNA片段的連接反應(yīng) DNA 連接酶 ligase 催化 DNA 539。 磷酸基與 339。 羥基之間形成磷酸二酯鍵 (ATP) 539。 539。 339。 339。 OH P OH P DNA連接酶 DNA連接酶 總體積 20 μl 載體 ~ 目的基因:載體 mol數(shù) = 1~ 5: 1 H2O 10 buffer 載體 目的基因 ligase 總體積 20μl μl μl μl μl μl 連接應(yīng)注意的事項: mol數(shù)之比 buffer:溶解充分,分裝,防止ATP降解 : 4~8℃ 最好。
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