高效液相色譜法：特指一種用液體為流動相的色譜分離分析方-資料下載頁
2024-09-28 06:16本頁面
【導讀】特指一種用液體為流動相的色譜分離分析方法。驗技術建立的一種液相色譜分析法。第三章高效液相色譜分析法HPLC. §2-1高效液相色譜法的特點。力，只與固定相有相互作用。且流動相種類較多，選擇余地廣，改。也可以增大分離選擇性。體系中的痕量組分。反相色譜分離水溶液中的物質----生化物質。色譜法分析離子型體的含量。離高分子化合物。相忽略大低，流動相柱溫BT????選擇兼顧柱效和分析時間，）（忽略固定相傳質阻抗smmssmmCCCCCC?????溫影響?。┵|和固定相性質（受柱：調整流動相種類、性?選粘度小、低流速的流動相——甲醇，
【正文】 2） 影響 k的因素 a． 與 m的極性有關 （ 同反相色譜 ） b． 與 R的鏈長有關： R↑ 長 ， 極性 ↓ 小 ， tR↑ ， k↑ 3） 適用：較強的有機酸 、 堿 ? 三、離子色譜法（ IC） 2．反相離子抑制色譜 在反相色譜中 ， 通過加入緩沖溶液調節(jié)流動相 pH值 ， 抑制 組分解離 ， 增加其 k和 tR， 以達到改善分離的目的 1） 離子抑制劑：弱酸 、 弱堿性物質 pH一定的緩沖溶液 2） k的影響因素： 與流動相極性有關 ， 還與 pH值有關 ? 選擇流動相：應同時考慮極性及 pH值 酸性物質 —— 加入酸 HAc tR↑ ， k↑ 堿性物質 —— 加入堿 NH3H2O tR↑ ， k↑ ? 調節(jié) pH范圍： ~ pH 破壞鍵合相與載體的結合 pH 腐蝕柱子 3） 適用：極弱酸堿物質 pH=3~7弱酸； pH=7~8弱堿；兩性化合物 2． 對流動相的要求： 1） 與固定液不反應 2） 對樣品有良好溶解度 k=1~10 k=2~5 最理想的 3） 與檢測器匹配： UV（ 常用 ， 測定波長應大于溶劑的截止波長 ） 熒光 ， 電化學 4） 使用粘度小 、 純度高的流動相 （ 甲醇 ， 乙腈 ） 使用前過濾 、 脫氣 3．洗脫方式 1） 等度洗脫 （ 恒組成溶劑洗脫 ） 以固定配比的溶劑系統(tǒng)洗脫組分 （ 一個泵 ） 類似 GC的等溫度洗脫 2） 梯度洗脫： 在一定分析周期內不斷變換流動相的種類 和比例 即不斷改變其極性 （ 兩個泵 ） 適于分析極性差別較大的復雜組分 類似 GC的程序升溫 （ 沸程較長樣品 ） 167。 24 高效液相色譜儀 1． 泵： 恒壓泵：流量精度不穩(wěn) 恒流泵：常用 2． 進樣裝置 1） 隔膜進樣 （ 高分子有機硅膠墊 → 進樣室 ） GC系統(tǒng)壓力較小 ， 可以 HPLC系統(tǒng)壓力太大 ， 必須停泵進樣 （ 早期 ） 2） 閥進樣：不必停泵 ， 六通閥 液相色譜 3． 色譜柱：直徑 4~6mm,柱長 10~30cm 柱效評價：色譜系統(tǒng)適應性試驗 R， n， fs（ 拖尾因子 ） 柱再生：維護 、 保養(yǎng) 、 柱子的沖洗 4． 檢測器 1） 紫外檢測器：適于吸收紫外光的物質 2） 熒光檢測器：只能分析自身發(fā)光的物質 靈敏度高 3） 示差折光檢測器：利用折光率的差別 靈敏度低 ， 溫度要求嚴格 4） 電化學檢測器 5） 化學發(fā)光
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