【導(dǎo)讀】的研究工作及取得的成果。盡我所知，除文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，工學(xué)院及其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或?qū)W歷而使用過的材料。對(duì)本研究提供過幫助。和做出過貢獻(xiàn)的個(gè)人或集體，均已在文中作了明確的說明并表示了謝意。論文的部分或全部?jī)?nèi)容。

　　

【正文】 形成絡(luò)合物，此絡(luò)合物在 510nm 處有最大吸收峰，是一常用的氧化還原 指示劑，其顏色變化可敏銳地反映溶液氧化還原狀態(tài)的改變。 H2O2/Fe2+體系可通過 Fenton 反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基，鄰二氮菲 Fe2+水溶液被羥自由基氧化為鄰二氮菲 Fe3+后，其 510nm 最大吸收峰消失。如果反應(yīng)體系中同 17 時(shí)存在羥自由基清除劑，則 Fenton 反應(yīng)產(chǎn)生的羥自由基將被此清除劑全部或部分清除，鄰二氮菲 Fe2+絡(luò)合物受到的破壞將會(huì)隨之減少。根據(jù)這一原理，利用這個(gè)減弱的程度就可以用來表示抗氧化物質(zhì)的清除自由基的能力，可建立以 510nm 處吸光度 變化反映自由基清除劑對(duì)羥自由基清除作用的比色測(cè)定法。 松葉粗提 物 清除羥自由基試驗(yàn)，將 50mmol/L 鄰二氮菲無水乙醇溶液稀釋至 5mmol/L，取該液 ， 加入 （ PH=） ， 充分混勻后加入 的硫酸亞鐵溶液 ， 每加 1 管立即混勻 ， 加入 去離子水以補(bǔ)充體積 ， 最后加入1%H2O2 1mL 反應(yīng)液在 37℃ 保溫 1h， 于 510nm 處測(cè)定吸光度 A 損傷 。依照此法，加入 1mL色素的為 A 加樣 ，不加色素和 H2O2的為 A 空白 。 計(jì)算公式： %100???? 損傷空白 損傷加樣清除率 AA AA （ 32） 結(jié)果與討論 松葉粗提物 清除超氧陰離子自由基 （ O2） 能力 按照表 加樣，并在紫外分光光度計(jì)下測(cè)定鄰苯三酚溶液 ，鄰苯三酚 TirsHCl 緩沖溶液 色素溶液以及鄰苯三酚 TirsHCl 緩沖溶液 Vc 溶液的紫外吸收光譜 ， 結(jié)果如圖 所示 。 表 鄰苯三酚法加樣量 吸光度 A 加樣量 A0 TirsHCl+ H2O+ 鄰苯三酚溶 液 AS1 TirsHCl+ H2O+%色素溶液 + 鄰苯三酚溶液 AS2 TirsHCl+ H2O+%色素溶液 + 鄰苯三酚溶液 AS3 TirsHCl+ H2O+%色素溶液 + 鄰苯三酚溶液 AS4 TirsHCl+ H2O+ 20%Vc 溶液 + 鄰苯三酚溶液 18 01300 350 400 450 500波長(zhǎng)/ n m吸光度/A鄰苯三酚自氧化2 0 % 色素4 0 % 色素6 0 % 色素20%VC 圖 不同體系紫外光譜對(duì)照?qǐng)D 由圖 可知幾種溶液 的最大吸收波長(zhǎng)均在 322nm 附近。而鄰苯三酚 TirsHCl 緩沖溶液 色素溶液體 系與其它體系峰高明顯下降，說明松葉色素可以對(duì)鄰苯三酚 緩沖溶液體系產(chǎn)生的超氧自由基產(chǎn)生清除作用并使其吸光度降低。因此可以選擇 322nm 為測(cè)定波長(zhǎng)。 在最大吸收峰 322nm 處連續(xù)測(cè)量其吸光度，研究不同濃度松葉粗提物和 VC隨著時(shí)間的變化對(duì)清除超氧基的作用。結(jié)果見圖 00 100 200 300 400時(shí)間/ s吸光度/A鄰苯三酚20%40%60%vc 圖 不同濃度色素提取物隨時(shí)間變化清除超氧基 作用 由圖 可知，松葉粗提物的濃度在一定的范圍內(nèi)，其對(duì)超氧自由基的清除作用是與樣品的濃度是呈十分明顯的正 相關(guān)，樣品的濃度越高，其自由基的清除率就越高。 19 00 100 200 300 400時(shí)間/s清除率20%色素40%色素60%色素20%vc 圖 3. 3 不同濃度的色素提取物清除超氧自由基的清除率比較 圖 可知， Vc 和 松葉粗提物 對(duì)超氧自由基有較強(qiáng)的清除作用。在同濃度下， VC 對(duì)超氧自由基的清除作用要大于 松葉粗提物 的作用效果。而且， 松葉粗提物 對(duì)其清除作用隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，其清除效果越來越小，趨于平緩。 松葉粗提物 清除羥基自由基（ OH）能力 按照表 加樣，分別測(cè)出吸光度，結(jié)果如表 表 FentonFe2+分光光度法加樣量 吸光度 加樣量 A 損傷 鄰 二 氮 菲 + PH= 磷 酸 鹽 緩 沖 溶 液+4 溶液 mmol/L+ 1% H2O2+ H2O A 空白 鄰二氮菲 + PH= 磷酸鹽緩沖溶液 + FeSO4 溶液 mmol/L + H2O A 加樣 1 鄰二氮菲 mmol/L+= 磷酸鹽緩沖溶 + mmol/L +%色素溶液 + 1% H2O2+ A 加樣 2 鄰二氮菲 += 磷酸鹽緩沖溶 + mmol/L +1mL40%色素溶液 + 1% H2O2+ A 加樣 3 鄰二氮菲 mmol/L+= 磷酸鹽緩沖溶 + mmol/L +1mL60%色素溶液 + 1% H2O2+ 20 表 松葉粗 色素 提物 提取物清除羥基自由基 實(shí)驗(yàn) 結(jié)果 樣品 吸光度 清除率 損 傷 空白 20%提取物 % 40%提取物 % 60%提取物 % 由表 可知， 松葉粗提物 對(duì)羥基自由基的清除能力是隨著色素的濃度增加而增加。當(dāng)色素的濃度是 20 %時(shí)，清除率達(dá)到 %，當(dāng)色素的濃度是 40 %時(shí)，清除率達(dá)到 %，當(dāng)色素的濃度是 60 %時(shí)，清除率達(dá)到 %。說明 松葉粗提物 對(duì)羥基自由基有著較強(qiáng)的清除作用能力。 21 結(jié) 論 一、結(jié)論 1. 通過單因素實(shí) 驗(yàn)和正交試驗(yàn)得出松葉色素的最佳提取條件為：乙醇濃度 95%、提取時(shí)間為 20min、溫度為 40℃、料液比為 1:提取級(jí)數(shù)為三級(jí)。 2. 利用最佳提取條件下提取色素粗提物的產(chǎn)率為 %。 3. 松葉中色素對(duì)超氧自由基（ O2）有一定的清除作用，在一定的范圍內(nèi)，是隨著色素濃度的增加而增加，隨著時(shí)間的增加清除率下降。對(duì)羥基自由基（ OH）也有一定的清除作用，且清除率隨著粗提物濃度增加而增加。 二、問題與展望 1. 松葉色素的精制分離還待進(jìn)一步探究。 2. 松葉色素的穩(wěn)定性需要探究。 3. 松葉色素在食品中的應(yīng)用還需進(jìn)一步探究。 22 致 謝 光陰荏苒，大學(xué)生涯即將結(jié)束，四年的學(xué)習(xí)生活讓我受益匪淺。經(jīng)歷幾個(gè)月的磨礪，論文終于定稿，在收集及整理資料和論文撰寫、修改直至最終完成的過程這段時(shí)間里，我得到了許多的關(guān)懷和幫助，現(xiàn)在要向他們表達(dá)我最誠(chéng)摯的謝意。 首先，我要深深地感謝指導(dǎo)我的茹宗玲老師。無論是在資料搜集整理、實(shí)驗(yàn)過程還是論文撰寫修改，她都給了我莫大的幫助和關(guān)懷。在實(shí)驗(yàn)過程中無論再小的問題都耐心的指導(dǎo)著我，在撰寫論文過程中她又在百忙之中抽出時(shí)間認(rèn)真的批改對(duì)我的論文并提 出許多中肯的指導(dǎo)意見，使我在寫作過程中不致迷失方向。她嚴(yán)謹(jǐn)?shù)闹螌W(xué)之風(fēng)和對(duì)事業(yè)的孜孜追求的精神將影響和激勵(lì)我的一生。我將永遠(yuǎn)銘記她對(duì)我的關(guān)心和教誨。借此機(jī)會(huì)，我謹(jǐn)向茹老師致以深深地謝意。 其次， 我要感謝對(duì)我論文有所幫助的所有人，特別是我引用文獻(xiàn)中的作者們，因?yàn)橛辛怂麄兊难芯砍晒攀刮以谘芯窟^程中有了方向。 同時(shí)，我要感謝和我一起做實(shí)驗(yàn)的同學(xué)，在一起實(shí)驗(yàn)的過程中我們一起討論一起分析實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的各種問題，使我深深的感覺到團(tuán)隊(duì)合作精神的重要性。我相信這種團(tuán)隊(duì)的合作精神將在我以后的工作生活中起到至關(guān)重要的作用。 最后 ， 我要 感謝這四年來所有教育我的老師，是他們淵博的文化知識(shí)，深厚的學(xué)術(shù)造詣，把我領(lǐng)進(jìn)了科學(xué)的殿堂。他們敏捷的思維，博大的胸懷，嚴(yán)謹(jǐn)?shù)闹螌W(xué)態(tài)度，忘我的工作熱情，銳意的創(chuàng)新精神，讓我深深的折服并給我莫大的激勵(lì)，讓我受益終身。 我將在我今后的工作和學(xué)習(xí)中更加努力，不辜負(fù)他們對(duì)我的期望。 23 參考文獻(xiàn) [1] 鄧祥元 , 王淑軍 , 等 . 天然色素的資源和應(yīng)用 [J]. 中國(guó)調(diào)味品 , 2021, 10(10): 4953. 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