【導讀】的研究工作及取得的成果。盡我所知，除文中特別加以標注和致謝的地方外，工學院及其它教育機構的學位或學歷而使用過的材料。對本研究提供過幫助。和做出過貢獻的個人或集體，均已在文中作了明確的說明并表示了謝意。論文的部分或全部內(nèi)容。

　　

【正文】 形成絡合物，此絡合物在 510nm 處有最大吸收峰，是一常用的氧化還原 指示劑，其顏色變化可敏銳地反映溶液氧化還原狀態(tài)的改變。 H2O2/Fe2+體系可通過 Fenton 反應產(chǎn)生羥自由基，鄰二氮菲 Fe2+水溶液被羥自由基氧化為鄰二氮菲 Fe3+后，其 510nm 最大吸收峰消失。如果反應體系中同 17 時存在羥自由基清除劑，則 Fenton 反應產(chǎn)生的羥自由基將被此清除劑全部或部分清除，鄰二氮菲 Fe2+絡合物受到的破壞將會隨之減少。根據(jù)這一原理，利用這個減弱的程度就可以用來表示抗氧化物質的清除自由基的能力，可建立以 510nm 處吸光度 變化反映自由基清除劑對羥自由基清除作用的比色測定法。 松葉粗提 物 清除羥自由基試驗，將 50mmol/L 鄰二氮菲無水乙醇溶液稀釋至 5mmol/L，取該液 ， 加入 （ PH=） ， 充分混勻后加入 的硫酸亞鐵溶液 ， 每加 1 管立即混勻 ， 加入 去離子水以補充體積 ， 最后加入1%H2O2 1mL 反應液在 37℃ 保溫 1h， 于 510nm 處測定吸光度 A 損傷 。依照此法，加入 1mL色素的為 A 加樣 ，不加色素和 H2O2的為 A 空白 。 計算公式： %100???? 損傷空白 損傷加樣清除率 AA AA （ 32） 結果與討論 松葉粗提物 清除超氧陰離子自由基 （ O2） 能力 按照表 加樣，并在紫外分光光度計下測定鄰苯三酚溶液 ，鄰苯三酚 TirsHCl 緩沖溶液 色素溶液以及鄰苯三酚 TirsHCl 緩沖溶液 Vc 溶液的紫外吸收光譜 ， 結果如圖 所示 。 表 鄰苯三酚法加樣量 吸光度 A 加樣量 A0 TirsHCl+ H2O+ 鄰苯三酚溶 液 AS1 TirsHCl+ H2O+%色素溶液 + 鄰苯三酚溶液 AS2 TirsHCl+ H2O+%色素溶液 + 鄰苯三酚溶液 AS3 TirsHCl+ H2O+%色素溶液 + 鄰苯三酚溶液 AS4 TirsHCl+ H2O+ 20%Vc 溶液 + 鄰苯三酚溶液 18 01300 350 400 450 500波長/ n m吸光度/A鄰苯三酚自氧化2 0 % 色素4 0 % 色素6 0 % 色素20%VC 圖 不同體系紫外光譜對照圖 由圖 可知幾種溶液 的最大吸收波長均在 322nm 附近。而鄰苯三酚 TirsHCl 緩沖溶液 色素溶液體 系與其它體系峰高明顯下降，說明松葉色素可以對鄰苯三酚 緩沖溶液體系產(chǎn)生的超氧自由基產(chǎn)生清除作用并使其吸光度降低。因此可以選擇 322nm 為測定波長。 在最大吸收峰 322nm 處連續(xù)測量其吸光度，研究不同濃度松葉粗提物和 VC隨著時間的變化對清除超氧基的作用。結果見圖 00 100 200 300 400時間/ s吸光度/A鄰苯三酚20%40%60%vc 圖 不同濃度色素提取物隨時間變化清除超氧基 作用 由圖 可知，松葉粗提物的濃度在一定的范圍內(nèi)，其對超氧自由基的清除作用是與樣品的濃度是呈十分明顯的正 相關，樣品的濃度越高，其自由基的清除率就越高。 19 00 100 200 300 400時間/s清除率20%色素40%色素60%色素20%vc 圖 3. 3 不同濃度的色素提取物清除超氧自由基的清除率比較 圖 可知， Vc 和 松葉粗提物 對超氧自由基有較強的清除作用。在同濃度下， VC 對超氧自由基的清除作用要大于 松葉粗提物 的作用效果。而且， 松葉粗提物 對其清除作用隨著時間的延長，其清除效果越來越小，趨于平緩。 松葉粗提物 清除羥基自由基（ OH）能力 按照表 加樣，分別測出吸光度，結果如表 表 FentonFe2+分光光度法加樣量 吸光度 加樣量 A 損傷 鄰 二 氮 菲 + PH= 磷 酸 鹽 緩 沖 溶 液+4 溶液 mmol/L+ 1% H2O2+ H2O A 空白 鄰二氮菲 + PH= 磷酸鹽緩沖溶液 + FeSO4 溶液 mmol/L + H2O A 加樣 1 鄰二氮菲 mmol/L+= 磷酸鹽緩沖溶 + mmol/L +%色素溶液 + 1% H2O2+ A 加樣 2 鄰二氮菲 += 磷酸鹽緩沖溶 + mmol/L +1mL40%色素溶液 + 1% H2O2+ A 加樣 3 鄰二氮菲 mmol/L+= 磷酸鹽緩沖溶 + mmol/L +1mL60%色素溶液 + 1% H2O2+ 20 表 松葉粗 色素 提物 提取物清除羥基自由基 實驗 結果 樣品 吸光度 清除率 損 傷 空白 20%提取物 % 40%提取物 % 60%提取物 % 由表 可知， 松葉粗提物 對羥基自由基的清除能力是隨著色素的濃度增加而增加。當色素的濃度是 20 %時，清除率達到 %，當色素的濃度是 40 %時，清除率達到 %，當色素的濃度是 60 %時，清除率達到 %。說明 松葉粗提物 對羥基自由基有著較強的清除作用能力。 21 結 論 一、結論 1. 通過單因素實 驗和正交試驗得出松葉色素的最佳提取條件為：乙醇濃度 95%、提取時間為 20min、溫度為 40℃、料液比為 1:提取級數(shù)為三級。 2. 利用最佳提取條件下提取色素粗提物的產(chǎn)率為 %。 3. 松葉中色素對超氧自由基（ O2）有一定的清除作用，在一定的范圍內(nèi)，是隨著色素濃度的增加而增加，隨著時間的增加清除率下降。對羥基自由基（ OH）也有一定的清除作用，且清除率隨著粗提物濃度增加而增加。 二、問題與展望 1. 松葉色素的精制分離還待進一步探究。 2. 松葉色素的穩(wěn)定性需要探究。 3. 松葉色素在食品中的應用還需進一步探究。 22 致 謝 光陰荏苒，大學生涯即將結束，四年的學習生活讓我受益匪淺。經(jīng)歷幾個月的磨礪，論文終于定稿，在收集及整理資料和論文撰寫、修改直至最終完成的過程這段時間里，我得到了許多的關懷和幫助，現(xiàn)在要向他們表達我最誠摯的謝意。 首先，我要深深地感謝指導我的茹宗玲老師。無論是在資料搜集整理、實驗過程還是論文撰寫修改，她都給了我莫大的幫助和關懷。在實驗過程中無論再小的問題都耐心的指導著我，在撰寫論文過程中她又在百忙之中抽出時間認真的批改對我的論文并提 出許多中肯的指導意見，使我在寫作過程中不致迷失方向。她嚴謹?shù)闹螌W之風和對事業(yè)的孜孜追求的精神將影響和激勵我的一生。我將永遠銘記她對我的關心和教誨。借此機會，我謹向茹老師致以深深地謝意。 其次， 我要感謝對我論文有所幫助的所有人，特別是我引用文獻中的作者們，因為有了他們的研究成果才使我在研究過程中有了方向。 同時，我要感謝和我一起做實驗的同學，在一起實驗的過程中我們一起討論一起分析實驗中出現(xiàn)的各種問題，使我深深的感覺到團隊合作精神的重要性。我相信這種團隊的合作精神將在我以后的工作生活中起到至關重要的作用。 最后 ， 我要 感謝這四年來所有教育我的老師，是他們淵博的文化知識，深厚的學術造詣，把我領進了科學的殿堂。他們敏捷的思維，博大的胸懷，嚴謹?shù)闹螌W態(tài)度，忘我的工作熱情，銳意的創(chuàng)新精神，讓我深深的折服并給我莫大的激勵，讓我受益終身。 我將在我今后的工作和學習中更加努力，不辜負他們對我的期望。 23 參考文獻 [1] 鄧祥元 , 王淑軍 , 等 . 天然色素的資源和應用 [J]. 中國調(diào)味品 , 2021, 10(10): 4953. [2] . Historians Development of Food , In: Developments in Food Colores, . P p. 125. London, Uk: Aoolied Science Publishers. [3] 鄭華 , 張弘 . 天然動植物色素的特性及其提取技術概況 [J]. 林業(yè)科學研究 , 2021, 16(5): 628, 635. [4] 陳業(yè)高 . 天然植物食用色素的研究概況 [J]. 生物學雜志 , 1995, 2(1): 3234. [5] 趙興連 . 試論中藥性能多樣性 [J]. 山東 中醫(yī)藥大學學報 , 2021, 24(4): 253254 [6] 馬育林 , 謝平 . 中草藥提取工藝研究概況 [J]. 中醫(yī)藥學刊 , 2021, 20(5): 647649. [7] 安建忠 , 許志惠 . 新技術新方法在中草藥提取方面的應用 [J]. 時珍國醫(yī)國藥 , 2021, 12(1): 465467. [8] 中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會編 , 中華人民共和國藥典一部 [s]. 北京 : 化學工業(yè)出版社 , 2021. [9] 周淑芳 , 韓麗副主編 . 謝秀瓊主編 . 現(xiàn)代中藥制劑新技術 [M]. 第一 版 , 北京 : 化學工業(yè)出版社 , 2021: 3031. [10] 李云雁 , 宋光森 . 超聲波協(xié)助提取板栗殼色素的研究 [J]. 食品科技 , 2021 (8): 5758. [11] 蔡美強 , 計建炳 , 陸向紅等 . 超聲場對梔子甙提取過程的強化 [J]. 化工時刊 , 2021, 18(3): 3436. [12] 徐飛 . 超聲提取中藥復方的技術研究 [D]. 成都中醫(yī)藥大學 , 2021. [13] 張莉 . 板栗淀粉理化性質及加工特性研究 . [D]西北農(nóng)林科技大學 , 2021 [14] 葉興乾 , 張貴平 . 栗粉的理化性質與 功能特性研究 [J]. 中國糧油學報 , 2021, 16(4): 4346 [15] 江美都 . 板栗淀粉加工特性的研究 [J]. 中國糧油學報 , 2021, 16(4): 55, 58. [16] 陳和生 , 孫振亞等 . 羅田板栗多糖的分離純化及成分分析 [J]. 中國藥學雜志 2021, 37(1): 63, 64. [17] 國家中醫(yī)藥管理局中華本草編委會 : 中華本草 [M]. 上?？萍汲霭嫔?, 294 [18] 物志編委會 : 中國植物志第 7 卷 [M]. 科學出版社 , 1978, 251253. [19] 李萍 . 藥用松葉的品種、品質研究 [D]. 成都中醫(yī)藥大學 , 2021 [20] 耿敬章 , 秦公偉 , 張志健等 . 超聲波輔助提取櫻桃中原花青素 [Z]. 中國食品添加劑 [21] 李瑞麗 , 喬五忠 , 王艷輝等 . 葡萄籽原花青素的超聲提取工藝研究 [J]. 食品研究與開發(fā) , 2021, 27( 2): 6466. [22] 范婷婷 , 菜籽皮中原花色素的提取、純化及其抗氧化性質研 [D]. 合肥工業(yè)大學 ,2021 [23] Ruch R J. Prevention of Oytotoxi city and inhibition of intercellular munication by antioxidant catech in isolated from Chinese green tea [J]. Carcinogenesis, 1989, 10: 1003. [24] 金鳴 , 蔡亞欣 , 李金榮等 . 鄰二氮菲 Fe2＋ 氧化法檢測 H2O2／ Fe2＋ 產(chǎn)生的羥自由基 [J]. 生物化學與生物物理進展 , 1996, 23(6): 553555