【正文】 使反應(yīng)物充分混合，PG能充分捕獲羥基自由基。 鄰苯三酚自氧化法測 PG、PGGe 配合物、Vc 對 02的清除率 測定原理鄰苯三酚在堿性環(huán)境中發(fā)生自氧化反應(yīng)，生成穩(wěn)定濃度的 02，并生成一種帶有顏色的中間產(chǎn)物，有如下反應(yīng)式:河北工程大學(xué)畢業(yè)論文26OHOHHO O2中 間 產(chǎn) 物鄰苯三酚的自氧化方式這種中間產(chǎn)物在紫外有吸收，引起某一波長處吸光值的現(xiàn)性積累，而抗氧化劑可以清除 02，從而阻止中間產(chǎn)物的積累，因此可以用比色法來測定抗氧化劑清除 02的能力大小。 [2528] 實(shí)驗(yàn)方案理論上 319nm 為 pH= 時(shí)的最佳監(jiān)測峰，為避開樣品 PG 在 300nm 的強(qiáng)吸收峰，實(shí)驗(yàn)選擇在 350nm 處檢測反應(yīng)體系吸光度，所用 pH=，接近人體內(nèi)環(huán)境，這樣能保證本次研究的意義。隨著反應(yīng)的進(jìn)行，因 02不斷產(chǎn)生，當(dāng)加入 02清除劑時(shí)，0 2的生成受到抑制，鄰苯三酚自氧化過程受阻，溶液在 350nm 處的吸光度減弱，因此于 350nm 處測量反應(yīng)液的吸光度，測量 5min,選擇線性較好的幾個(gè)點(diǎn)求斜率。表 37 清除 02能力實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)表試劑 參比管 自氧化管 樣品管TrisHCl 緩沖液（mL） 去離子水（mL ） 10mmol/LHCl（mL） 樣品（mL ） 鄰苯三酚（mL ） 按照表 37 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)表進(jìn)行加樣，混合后立即測定個(gè)反應(yīng)體系在 350nm 處的吸光度，求出線性較好的幾個(gè)點(diǎn)的斜率△A，帶入以下公式求清除率。清除率(P)= （△A 0一△A i） / △A 0100%△ A0為鄰苯三酚自氧化的斜率，△A i為樣品的斜率。利用上述方法測定 PG、PG—Ge 配合物、Vc 對 02的清除率結(jié)果見表 38。表 38 樣品對 02的清除作用濃度 mg/mL PG 的清除率（% ） PGGe 的清除率（%） 河北工程大學(xué)畢業(yè)論文27Vc 的清除率（%） 0. 40608010清除率(%)濃 度 (mg/l) PG Vc Pe圖 35 Vc、PGGe 和 PG 對過氧自由基的清除率圖 35 顯示，PG 和 PGGe 配合物對 02有很強(qiáng)的清除作用，PGGe 配合物與 PG比較，在低濃度時(shí)，PG 的清除率優(yōu)于 PGGe 配合物，而在濃度大于 ，PGGe 配合物優(yōu)于 PG。當(dāng) PGGe 的濃度為 的清除率達(dá)到 50%，而PG 在濃度達(dá)到 ，說明 PGGe 具有更高的的抗氧化活性。這一結(jié)論符合中藥配位學(xué)說中配合物的生物活性大于配體的推斷。當(dāng) Vc 的濃度達(dá)到 ，對 02的清除率達(dá)到了 50%。雖然對配體和配合物對 02的清除率不及 Vc，但仍可以把其廣泛用在一些抗氧化的場合。 對 DPPH 自由基清除率的測定 測定原理DPPH是一種比較穩(wěn)定的脂性自由基, 其N上有一個(gè)游離電子, 其乙醇溶液呈典型紫色,在532nm處有最大的吸收峰。加入抗氧化劑以后 , DPPH捕捉一個(gè)電子與游離電子配對,紫色褪去, 變?yōu)辄S色物質(zhì) , 在532nm處的吸收消失, 其褪色程度與其接受的電子數(shù)成定量關(guān)系。依此原理可用532nm處的吸光值的大小表示抗氧化劑對自由基的清除能力。[28]河北工程大學(xué)畢業(yè)論文28 實(shí)驗(yàn)方案分別將一系列不同濃度的樣品（無水乙醇配制）溶液2mL依次加入25mL比色管中,在分別加入摩爾濃度為210 4mol/L的DPPH溶液(無水乙醇超聲波溶解配制),混勻, 黑暗中靜置30min后, 以無水乙醇溶液為空白對照，于532nm處測定吸光值, 此值為A i；同時(shí)測定2mLDPPH溶液和2mL 無水乙醇溶液混合后的吸光值A(chǔ) c, 以及2mL樣品溶液與2mL無水乙醇溶液混合后的吸光值A(chǔ) j。平行實(shí)驗(yàn)三次，求平均值，利用公式計(jì)算樣品對自由基的清除率。清除率（%）P=[1(A iAj)/ Ac]100%其中：A i樣品溶液與DPPH溶液混合的吸光度；Ac無水乙醇與DPPH溶液混合的吸光度；Ac 樣品溶液與無水乙醇混合的吸光度。利用上述方法測定了不同濃度的樣品 PG、PGGe 配合物和 Vc 對 DPPH 自由基的清除率結(jié)果如下( 圖 36)。表 38 樣品對 DPPH 自由基的清除率濃度(mg/ml) PG 的清除率(%) PGGe 的清除率 (%) Vc 的清除率 (%) 0. 40506070809010清除率(%)濃 度 （ mg/l）PGe Vc圖 36 PGGe、PG 、Vc 對 DPPH 自由基的清除率河北工程大學(xué)畢業(yè)論文29圖 36 顯示，由圖可以明確，在低濃度時(shí)（小于 ）PG 和 PGGe 配合物對 DPPH 自由基有較強(qiáng)的清除能力，其清除能力是 Vc 的 6 倍以上。PGGe 配合物與PG 比較，在低濃度時(shí)，PG 的清除率優(yōu)于 PGGe 配合物，而在高濃度時(shí)，PGGe 配合物優(yōu)于 PG。這又與中藥配位學(xué)中的觀點(diǎn)相吻合。因而，對 PGGe 配合物的研究和發(fā)展是很有價(jià)值和意義的。當(dāng)樣品濃度大于 ，Vc 的清除能力高于 PG 和PGGe 配合物，但這也不影響 PG 和 PGGe 作為良好的抗氧化劑的選擇。對于配體和配合物，濃度不到 ，其清除率已經(jīng)達(dá)到 50%，這充分體現(xiàn)了兩者有較好的抗氧化生物活性。河北工程大學(xué)畢業(yè)論文30第 4 章 結(jié) 論 PGGe 的合成研究及表征(l) 通過紫外分光光度法測確定了 PG 與金屬離子 Ge 配位反應(yīng)形成配合物的最佳實(shí)驗(yàn)條件:配位反應(yīng)適宜的 pH 為 ；PG 與 Ge 以物質(zhì)的量比 2:1；反應(yīng)溫度 20℃；反應(yīng)時(shí)間 1112h。其中反應(yīng)體系的 pH 值對形成配合物的影響最大，是決定配合物能否形成的關(guān)鍵因素。(2) 通過紫外分光光度法測得到最佳實(shí)驗(yàn)條件合成出了 PGGe 配合物，并對其進(jìn)行了純化。(3) 通過紫外一可見吸收光譜、紅外吸收光譜、配位比分析對 PGGe 配合物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征。 (4) PGGe 配合物的配位比為 2:1，穩(wěn)定常數(shù)為:K 穩(wěn) =1011。 PGGe 配合物的活性研究（1）通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn) PGGe 配合物對羥基自由基、過氧自由基和 DPPH 自由基，都有較強(qiáng)的清除作用。（2）PGGe 配合物在低濃度時(shí)對 DPPH 自由基和過氧自由基的清除作用低于PG，在高濃度是高于 PG；但在測試范圍內(nèi) PGGe 對羥基自由基的清除作用始終低于PG。 建議（1）在合成、提純產(chǎn)品及抗氧化活性的基礎(chǔ)上，做差熱熱重分析、核磁共振分析，對配合物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行進(jìn)一步的分析，并與目前市場上的其他抗氧化劑（BHT、BHA）對比。（2）尋找合適的方案，培養(yǎng)單晶。以便獲得該配合物全面而精細(xì)的結(jié)構(gòu)信息。（3）摸索合適的條件對配合物進(jìn)行抑菌試驗(yàn)，測試其抗菌效果以及其他方面用途。（4）多參看文獻(xiàn)，對比各個(gè)方案，分析其優(yōu)劣，選擇合理的方案進(jìn)行仔細(xì)研究，并設(shè)計(jì)對本課題有針對性的實(shí)驗(yàn)方案，借此開拓更多此類研究的重現(xiàn)性較好的實(shí)驗(yàn)方案。（5）研究配合物及配體的抗氧化機(jī)理以及各種檢測手段的機(jī)理。河北工程大學(xué)畢業(yè)論文33參考文獻(xiàn)[1] 龍暉,（Ⅳ）沒食子酸 釩（Ⅳ）體系極譜吸附催化波的研究[J].分析化學(xué).[2] 程寶箴，張銘讓，蔣文強(qiáng)等．利用低碳醇制備鉻鞣劑的研究[J] ．精細(xì)石油化工，2022，19(3)：4244．[3] 戚向陽，謝筆鈞，(EGCG)鍺(IV)配合物的研究[J]，天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，1994，6（3）：35－44.[4] 強(qiáng)西懷，周天國，許永軍等．清潔鉻鞣方法[J] ．西北輕工業(yè)學(xué)院學(xué)報(bào)， 1999，17(4):89—95．[5] 朱敏，邢建偉．羊毛染色新型 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