常用貯液、溶液、抗生素、電泳緩沖液、染料和凝膠加樣液-經(jīng)營(yíng)管理-資料下載頁(yè)
2025-08-06 10:38本頁(yè)面
【導(dǎo)讀】分裝成小份貯存于-20℃。劑級(jí)，無(wú)DNA酶）于（為減少變性，蛋白完全溶解為止。或轉(zhuǎn)移100mg的二硫蘇糖醇。至微量離心管，加1mol/L二硫蘇糖醇溶液。3mol/L乙酸鈉：溶解90ml水中，用冰乙酸調(diào)溶液的pH至，再加水定容到100ml?；蚍Q(chēng)取Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH，并溶于。1mol/LMgCl2:溶解MgCl2·6H2O于足量的水中，定容到100ml。100mmol/LPMSF：溶解174mg的PMSF于足量的異丙醇中，分成小份并用鋁箔將裝液管包裹。20mg/ml蛋白酶K：將200mg的蛋白酶L加入到，輕輕搖動(dòng)，直至蛋白酶K完全溶解。10mg/mlRnase：溶解10mg的胰蛋白R(shí)NA. 酶于1ml的10mmol/L的乙酸鈉水溶液中。溶解后于水浴中煮沸15min，攪拌器攪拌），氫氧化鈉完全溶解后用水定容至1L?？梢再?gòu)買(mǎi)到100mmol/L純dNTPs貯液，-80℃可貯存至少6個(gè)月。加100ulDEPC于100ml水中，使DEPC的體積分?jǐn)?shù)為％。少12h，然后在15psi條件下高壓滅菌20min，以使殘余的DEPC失活。會(huì)與胺起反應(yīng)，不可用DEPC處理Tris緩沖液。經(jīng)Whatman1號(hào)濾紙過(guò)濾除去樹(shù)脂后分。成小份，充氮?dú)庥?80℃貯存。二鈉（雙堿）貯液，獲得所需pH的磷酸緩沖液。氫二鈉貯液:溶解142g于足量水中使終體積為1L。
【正文】 每 100ml的小份中加 1ml滅過(guò)菌的 1mol/L氯化鎂外，再加 2ml滅菌的 1mol/L葡萄糖（ 18g葡萄糖溶于足夠水中，再用水補(bǔ)足到 100ml，用 ）。 TB培養(yǎng)基 將下列組分溶解在 ： 蛋白胨 12g 酵母提取物 24g 甘油 4ml 各組分溶解后高壓滅菌。冷卻到 60℃ ，再加 100ml 滅菌的 170mmol/L KH2PO4/ mol/L K2HPO4 的溶液（ KH2PO4和 足量的水中，使終體積為 100ml。高壓滅菌或用 ）。 2 YT培養(yǎng)基 將下列組分溶解在 ： 蛋白胨 16g 酵母提取物 10g 氯化鈉 4ml 如果需要用 1N NaOH（～ 1ml）調(diào)整 pH 至 ，再補(bǔ)足水至 1L。注：瓊脂平板需添加瓊脂粉 12g/L,上層瓊脂平板添加瓊脂粉 7g/L。 YPD培養(yǎng)基 將下列組分溶解在 ： 蛋白胨 20g 酵母提取物 10g 葡萄糖 20g 用水補(bǔ)足體積為 1L后，高壓滅菌。建議在高壓滅菌 之前，對(duì)色氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型每升培養(yǎng)基添加 ，因?yàn)?YPD培養(yǎng)基是色氨酸限制型培養(yǎng)基。為了配制平板，需要在高壓滅菌前加入 20g瓊脂粉。 四 .常用抗生素 氨芐青霉素（ ampicillin）（ 100mg/ml） 溶解 1g氨芐青霉素鈉鹽于足量的水中，最后定容至 10ml。分裝成小份于 20℃貯存。常以 25ug/ml～ 50ug/ml的終濃度添加于生長(zhǎng)培養(yǎng)基。 羧芐青霉素（ carbenicillin）（ 50mg/ml） 溶解 ，最后定容至 10ml。分裝成小份于20℃ 貯存。常以 25ug/ml～ 50ug/ml 的終濃度添加于生長(zhǎng)培養(yǎng)基。 甲氧西林（ methicillin）（ 100mg/ml） 溶解 1g甲氧西林鈉于足量的水中，最后定容至 10ml。分裝成小份于 20℃ 貯存。常以 。 卡那霉素（ kanamycin）（ 10mg/ml） 溶解 100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至 10ml。分裝成小份于 20℃ 貯存。常以 10ug/ml～ 50ug/ml 的終濃度添加于生長(zhǎng)培養(yǎng)基。 氯霉素（ chloramphenicol）（ 25mg/ml） 溶解 250mg氯霉素足量的無(wú)水乙醇中，最后定容至 10ml。分裝成小份于 20℃貯存。常以 ～ 25ug/ml 的終濃度添加于生長(zhǎng)培養(yǎng)基。 鏈霉素（ streptomycin）（ 50mg/ml） 溶解 ，最后定容至 10ml。分裝成小份于20℃ 貯存。常以 10ug/ml～ 50ug/ml 的終濃度添加于生長(zhǎng)培養(yǎng)基。 萘啶酮酸（ nalidixic acid）（ 5mg/ml） 溶解 50mg萘啶酮酸鈉鹽于足量的水中，最后定容至 10ml。分裝成小份于 20℃貯存。常 以 15ug/ml 的終濃度添加于生長(zhǎng)培養(yǎng)基。 四環(huán)素（ tetracyyline）（ 10mg/ml） 溶解 100mg四環(huán)素鹽酸鹽于足量的水中，或者將無(wú)堿的四環(huán)素溶于無(wú)水乙醇，定容至 10ml。分裝成小份用鋁箔包裹裝液管以免溶液見(jiàn)光，于 20℃ 貯存。常以10ug/ml～ 50ug/ml 的終濃度添加于生長(zhǎng)培養(yǎng)基。
畢業(yè)設(shè)計(jì)相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1