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正文內(nèi)容

常用貯液、溶液、抗生素、電泳緩沖液、染料和凝膠加樣液-經(jīng)營管理(更新版)

2024-10-06 10:38上一頁面

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【正文】 ,最后定容至 10ml。常以10ug/ml~ 50ug/ml 的終濃度添加于生長培養(yǎng)基。常以 10ug/ml~ 50ug/ml 的終濃度添加于生長培養(yǎng)基。 卡那霉素( kanamycin)( 10mg/ml) 溶解 100mg卡那霉素于足量的水中,最后定容至 10ml。分裝成小份于 20℃貯存。冷卻到 60℃ ,再加 100ml 滅菌的 170mmol/L KH2PO4/ mol/L K2HPO4 的溶液( KH2PO4和 足量的水中,使終體積為 100ml。用鋁箔包裹裝液管,于 4℃ 貯存。 磷酸緩沖液( phosphate buffer) 按照下表所給定的體積,混合 1 mol/L 的磷酸二氫鈉(單堿)和 1mol/L 磷酸氫二鈉(雙堿)貯液,獲得所需 pH 的磷酸緩沖液。 100 mmol/L dNTP 溶液( dNTP solutions) 可以購買到 100mmol/L純 dNTPs貯液, 80℃ 可貯存至少 6個(gè)月。用水定容至 1L。不要渦旋混合。 1mol/L HEPES:將 90ml的水中,用 NaOH調(diào) pH( ),然后用水定容至 100ml。 1mol/L二硫蘇糖醇( DTT):在二硫蘇糖醇 5g的原裝瓶中加 水,分成小份貯存于 20℃ 。一 .常用貯液與溶液 1mol/L亞精胺( Spermidine) : 溶解 ,使終體積為10ml。加水定容到 10ml,然后分裝成小份貯存于20℃ 。2H2O和 20g的 NaOH,并溶于水中,定容至 1L。 20mg/ml 蛋白 酶 K( proteinase K):將 200mg的蛋白酶 L加入到 ,輕輕搖動,直至蛋白酶 K完全溶解。 10% SDS(十二烷基硫酸鈉):稱取 100gSDS慢慢轉(zhuǎn)移到約含 中,用磁力攪拌器攪拌直至完全溶解。 10標(biāo)準(zhǔn) DNA連接酶緩沖液( standard DNA ligase buffer)(粘端、平端連接) 成分及終濃度 配制 10ml溶液各成分的用量 100mmol/L MgCl2 100mmol/L DTT 2mmol/L ATP 5mmol/L 鹽酸亞精胺(可選) (組分 V)(可選) 水 5ml 1mol/L 貯液 1ml 1mol/L 貯液 1ml 1mol/L 貯液 200ul 100 mmol/L 貯液 50ul 1 mmol/L 貯液 10 mg/mL 貯液 將配制好的緩沖液分裝成小份,貯存于 20℃ 。經(jīng) Whatman 1號濾紙過濾除去樹脂后分成小份,充氮?dú)庥?80℃ 貯存(防止氧化)。 10mg/ml 的溴化乙錠( ethidium bromide) 小心稱取 1g溴化乙錠,轉(zhuǎn)移到廣口瓶中,加 100ml水,用磁力攪拌器攪拌直到完全溶解。 TB培養(yǎng)基 將下列組分溶解在 : 蛋白胨 12g 酵母提取物 24g 甘油 4ml 各組分溶解后高壓滅菌。 四 .常用抗生素 氨芐青霉素( ampicillin)( 100mg/ml) 溶解 1g氨芐青霉素鈉鹽于足量的水中,最后定容至 10ml。常以 。分裝成小份于20℃ 貯存。
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