20xx年唾液淀粉酶活性的觀察實驗報告范文-資料下載頁
2025-01-26 00:43本頁面
【正文】 。③向測定管中加入NaOH時應(yīng)迅速，否則酶與底物繼續(xù)反應(yīng)使結(jié)果偏大。
淀粉酶活性測定時70℃水浴為何要嚴(yán)格保溫15分鐘？保溫后為何要立即于冰浴中驟冷？
答：由于淀粉酶不耐熱，在70℃下處理一定時間可以鈍化，嚴(yán)格保溫15分鐘可以達(dá)到理想的鈍化效果，時間過長，淀粉酶活性也會受到影響；時間不足，淀粉酶鈍化不完全。保溫后立即驟冷是為了通過劇烈的溫變改變淀粉酶的結(jié)構(gòu)以防止在隨后的反應(yīng)中復(fù)性，這樣就保證了在隨后的40℃溫浴的酶促反應(yīng)中淀粉酶不會再參與催化反應(yīng)。此外我認(rèn)為冰浴使酶迅速降溫，便于嚴(yán)格控制高溫處理時間的長短。
?。扛鞴苡?0℃水浴準(zhǔn)確保溫15分鐘的作用？
答：酶實驗體系的pH值變化或變化過大，會使酶活性下降甚至完全失活。，同時穩(wěn)定溶液的pH不至于在反應(yīng)過程中大幅波動。 40℃水浴準(zhǔn)確保溫15分鐘為調(diào)整酶促反應(yīng)的最適溫度
眾多測定淀粉酶活力的實驗設(shè)計中一般均采取鈍化淀粉酶的活力而測淀粉酶和測總酶活力的策略，為何不采取鈍化淀粉酶活力去測淀粉酶活力呢？這種設(shè)計思路說明什么？
答：β淀粉酶與α淀粉酶的催化特性是有差異的。β淀粉酶主要作用于直鏈淀粉的α1，4糖苷鍵，而且僅從淀粉分子外圍的非還原性末端開始，切斷至α1,6鍵的前面反應(yīng)就停止了；而α淀粉酶則無差別地作用于直鏈淀粉與支鏈淀粉的α1，4糖苷鍵，所以β淀粉酶需要α淀粉酶淀粉支鏈的α1，4糖苷鍵后才能完全體現(xiàn)其催化能力。 此外我認(rèn)為在實驗中溫度比酸度更易控制，鈍化α淀粉酶難度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于β淀粉酶，而且若提高酸度鈍化α淀粉酶，則回調(diào)最適pH時α淀粉酶也有可能由于復(fù)性恢復(fù)活力。
這種設(shè)計思路說明在測定酶的比活力時要綜合考慮各種可能出現(xiàn)的酶的性質(zhì)以及它們之間的聯(lián)系，也要考慮到實驗操作的可行性。
本實驗中所設(shè)置的對照管的作用？它與比色法測定物質(zhì)含量實驗中設(shè)置的空白管有何異同？本實驗可否用對照管調(diào)分光光度計的100%T？為什么？
答：消除非酶促反應(yīng)（如淀粉酸性環(huán)境下加熱水解）和非測定時間內(nèi)的酶促反應(yīng)引起的麥芽糖的生成帶來的誤差。
兩種都是為了消除非測定部分對光的吸收，空白組是為了消除溶液中溶劑等其它組分對光的吸收，而對照管是為了消除非測量所需反應(yīng)所得的多余溶質(zhì)對光的吸收。
不可，因為標(biāo)準(zhǔn)曲線的確定是在空白的基礎(chǔ)上的，得到的是OD值與麥芽糖含量的關(guān)系
我們所測定得到的總酶活力減去所測定得到的淀粉酶活力是否就等于淀粉酶活力？為什么？你的結(jié)論說明什么？ 答：不等于。因為β淀粉酶和α淀粉酶作用于α1,4糖苷鍵，但二者都不能水解支鏈的α1，6糖苷鍵，而我們所測定得到的總酶活力是二者在與R酶的共同作用下測得的酶活力，R酶能夠降解支鏈淀粉，斷裂α1,6糖苷鍵，從而增大了β淀粉酶和α淀粉酶可水解的底物濃度，使測得的總活力大于β淀粉酶和α淀粉酶單獨作用的酶活力之和。 我的結(jié)論說明實驗時要考慮各種酶協(xié)同作用的綜合因素
八、參考文獻(xiàn)
[1]生物化學(xué)實驗指導(dǎo)中國農(nóng)業(yè)大學(xué)生物化學(xué)實驗室中國農(nóng)業(yè)大學(xué)自編教材 [2]基礎(chǔ)生物化學(xué) 趙武玲 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社
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