【文章內容簡介】 )考慮大鼠，此外為小鼠或家兔。第三十六 頁 ，共八十九 頁 。n 大鼠受孕率高，易于得到足夠標本數，且大鼠對大多數外源化學物代謝過程、基本與人類 (r233。nl232。i)近似。但不足之處是大鼠對一般外源化學物代謝速度很高，對致畸物耐受性強、易感性低，有時出現假陰性結果。n 小鼠自然畸形發(fā)生率較大鼠高。對形成腭裂的致畸物更較為敏感。n 家兔為草食動物，與人類代謝功能差異較大，妊娠期不夠恒定，自然發(fā)生率也較高。n 雞胚也可進行致畸試驗，可同時得到大量雞胚，胚胎發(fā)育條件也較易控制。但雞胚不是哺乳動物，缺乏受試物與母體的相互作用。第三十七 頁 ，共八十九 頁 。劑量 (j236。li224。ng)分組n 致畸試驗一般應先進行預試驗，找出引起母體中毒的劑量。一般用孕鼠 8～ 10只，在妊娠 5～ 16天內給予受試物。如出現較嚴重的母體中毒、流產或胚胎大量死亡，將劑量略為 (l252。232。 w233。i)降低，直到找出引起母體輕度中毒一般癥狀的劑量。根據預試結果進一步確定正式試驗劑量。第三十八 頁 ，共八十九 頁 。n 正式試驗最少應設 3個劑量組，另設對照組。 高劑量組 —— 該劑量一般不超過 LD50的 1/51/3，應引起母體輕度中毒，即進食量減少、體重減輕、死亡 (sǐw225。ng)不超過 10% ； 低劑量組 —— 可以為 LD50的 1/100l/30，不應觀察到任何中毒癥狀； 中劑量組 —— 可以允許母體出現某些極輕微中毒癥狀，其劑量與高劑量和低劑量成等比級數關系。第三十九 頁 ，共八十九 頁 。n 如果已掌握或能估計人體 (r233。ntǐ)實際接觸量，也可將實際接觸量作為低劑量，并以其 10倍左右為最高劑量。n 急性毒性較強的受試物，所采用劑量應稍低，反之可較高。第四十 頁 ，共八十九 頁 。n 接觸受試物的方式與途徑應與人體實際接觸情況一致。大鼠和小鼠一般可自受孕 (sh242。u y249。n)后第 5天開始接觸受試物，每日一次，持續(xù)到第 15天。如研究器官易感性，則應在上述期間增加動物組數，將受試物每日分別給予不同組的動物，根據畸形出現的情況，確定受試物的敏感時間和靶器官。第四十一 頁 ，共八十九 頁 。n 試驗期間每天稱取母鼠體重。根據體重增長，隨時調整劑量，觀察受孕動物的妊娠情況和胚胎發(fā)育 (fāy249。)情況。受孕動物的體重持續(xù)增長，表示妊娠過程及胚胎發(fā)育 (fāy249。)正常。 第四十二 頁 ，共八十九 頁 。 實驗 (sh237。y224。n)終點檢查n 自然分娩前 1～ 2日將受孕動物 (d242。ngw249。)處死剖腹，取出子宮及活產胎仔，記錄死胎及吸收胎。一般大鼠在受孕后第 19～ 20天，小鼠第 18～ 19天，家免在第29天。胎仔在臨近出生期間，發(fā)育進展極為迅速。相差半日，發(fā)育情況即有顯著差異，骨骼發(fā)育尤為顯著。第四十三 頁 ，共八十九 頁 。n 孕鼠處死后，從子宮頂端依次取出其中活產幼仔、死胎以及吸收胎，并記錄編號。n 大鼠和家免還應取出卵巢，記錄黃體數用來代表排卵數。n 活產胎仔取出后，先檢查性別 (x236。ngbi233。)，逐只稱重，并按窩計算平均體重，然后進行畸形檢查。n 為保證哺乳機會，一般主張每窩保留 8只幼仔，并盡量雌雄數量相等。 第四十四 頁 ，共八十九 頁 。動物試驗 (sh236。y224。n)的缺點：動物 (d242。ngw249。)實驗結果外推到人的不肯定性：n 由于致畸作用存在種屬差異和品系差異，故對一種受試物須多次重復同一實驗，均出現一定畸胎發(fā)生率，才能認為畸胎發(fā)生與該受試物有關。n 至少應能在兩種以上實驗動物的實驗中都顯示肯定能夠的致畸作用才能可靠的推導于人。n 但只要受試物在一種動物具有致畸作用，就應警惕它對人類具有的潛在危險性。 第四十五 頁 ，共八十九 頁 。動物高劑量接觸與人類實際低劑量接觸的區(qū)別n 阿司匹林和磺胺類藥物 (y224。ow249。)對大鼠有致畸作用，但這些藥物人類已長期使用，并未發(fā)現肯定的致畸作用，可能是人所利用的劑量未達到可引發(fā)致畸的程度。n 維生素 A常用作致畸的陽性對照物，給大鼠 1000mg/kg劑量可引發(fā)畸胎，按此劑量推算，50kg體重的人每天應服用 50ml的魚肝油，才會產生致畸作用，而人類很難攝取如此大量的魚肝油，故到目前為止，維生素 A并未被列為人類的致畸物。n 一定要考慮人類的實際接觸劑量。此外更要重視流行病學的調查，設法收集接觸者的流行病學及臨床資料，只有將動物實驗結果與流行病學調查資料結合起來，進行綜合分析，才能得出正確的結論。第四十六 頁 ，共八十九 頁 。n 對大多數化學物質來說， 三段生殖毒性試驗 設計通常是最適當的，關鍵因素是 各個生殖階段之間不得有間隔 ，即在三個有關聯的階段接觸受試物的時期至少有一天的重疊，并能直接或間接地評價生殖過程 (gu242。ch233。ng)的所有階段。第四十七 頁 ，共八十九 頁 。生殖發(fā)育過程可分為 (fēn w233。i)6個階段n A. 從交配前到受孕 ：檢查成年雄性和雌性生殖功能、配子的發(fā)育與成熟、交配行為、受精。n ：檢查成年雌性生殖功能、胚胎著床前發(fā)育、著床。n (y236。ng 232。)閉合 ：檢查成年雌性生殖功能、胚體發(fā)育、主要器官形成。第四十八 頁 ，共八十九 頁 。n ：檢查成年雌性生殖功能、胚體的發(fā)育與生長、器官的發(fā)育與生長。n ：檢查成年雌性生殖功能、新生仔對宮外生活的適應性、斷乳前的發(fā)育與生長。n ：檢查斷乳后的發(fā)育與生長，對獨立生活的適應 (sh236。y236。ng)、達到完全的性功能。第四十九 頁 ，共八十九 頁 。三段生殖毒性 (d x236。nɡ)試驗n 生育力和早期胚胎發(fā)育 (fāy249。)毒性試驗（一般生殖毒性試驗）n 胚體 胎體毒性試驗 (致畸試驗 )n 出生前后發(fā)育毒性試驗 (圍生期毒性試驗 )第五十 頁 ，共八十九 頁 。三段生殖試驗圖解 Ⅰ . 生育力和早期胚胎發(fā)育 (fāy249。)毒性試驗（一般生殖毒性試驗） Ⅱ . 胚體 胎體毒性試驗（致畸試驗） Ⅲ . 出生前后發(fā)育毒性試驗（圍產期毒性試驗）第五十一 頁 ，共八十九 頁 。生育力和早期胚胎發(fā)育毒性 (d x236。nɡ)試驗 （一般生殖毒性 (d x236。nɡ)試驗）n 研究目的 ：評價化學毒物對配子發(fā)生和成熟、交配行為、生育力、胚體著床前和著床的影響。n 實驗動物 ：至少一種，首選大鼠。每組雌雄各 16～ 20只（窩）。n 給藥時間 (sh237。jiān)：交配前雄性 4周，雌性 2周，交配期（ 2～ 3周），雌性著床前（大鼠孕 6天）。n 終末處理 ：雄性證實交配并使雌性受孕成功后處死，雌性在受孕 13～15天終止妊娠。第五十二 頁 ，共八十九 頁 。n 觀察指標168。 雄性 ：飲水量、攝食量、體重變化、睪丸、附睪