【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 g、 g的姜粉 ，加入到總量為 20 mL，無(wú)機(jī)鹽為 4 g，醇水比為 1∶ 1 的雙水相體系中， 40℃水浴 1 h， 150 w 超聲提取 30 min， 20xx r/min 離心 5 min， 計(jì)算姜黃素的收率 Yt 及上相提取率，根據(jù)收率和姜黃素得率確定最佳固液比。 (2)無(wú)機(jī)鹽 的質(zhì)量 對(duì)姜黃素提取的影響： 在上述試驗(yàn)確定的固液比下 ，分別選取加入 無(wú)機(jī)鹽 的質(zhì)量 為 4 g、 6 g、 8 g、 10 g、 12 g，醇水比為 1∶ 1 的體系， 40℃ 水浴 1 h， 150 w 超聲提取 30min， 20xx r/min 離心 5 min， 根據(jù)收率和姜黃素得率確定無(wú)機(jī)鹽的加入量。 (3)有機(jī)溶劑體積對(duì)姜黃素提取的影響：雙水相體系總量為 20 mL，在上述試驗(yàn)材料與方法 第 7 頁(yè)（共 21 頁(yè)） 確定的固液比和無(wú)機(jī)鹽 質(zhì) 量下，分別選用有機(jī)溶劑體積為 6 mL、 7 mL、 8 mL、 9 mL、10 mL、 11 mL、 12 mL 的萃取體系， 40℃ 水浴 1 h， 150 w 超聲提取 30 min， 20xx r/min離心 5 min，計(jì)算收率 Yt 及上相提取率，根據(jù)收率和姜黃素得率確定最佳醇水比。 (4)超聲波功率對(duì)姜黃素提取的影響： 雙水相體系總量為 20 mL， 在上述試驗(yàn)確定的工藝條件下 ， 40℃ 水浴 1 h，控制超聲波功率為 30 w、 90 w、 150 w、 210 w、 270 w，超聲提取 30 min， 20xx r/min 離心 5 min，根據(jù)收率和姜黃素得率確定最佳功率。 (5)超聲波時(shí)間對(duì)姜黃素提取的影響： 雙水相體系總量為 20 mL， 在上述試驗(yàn)確定的最佳工藝下 ， 40℃ 水浴 1 h，控制超聲波提取時(shí)間為 15 min、 30 min、 45 min、60 min、 75 min 進(jìn)行萃取， 20xx r/min 離心 5 min，根據(jù)收率和得率確定 最佳 超聲時(shí)間。 (6)提 取溫度對(duì)姜黃素提取的影響： 雙水相體系總量為 20 mL， 在上述試驗(yàn)確定工藝下 ，控制水浴溫度 20℃ 、 30℃ 、 40℃ 、 50℃ 、 60℃ ，水浴 1 h， 20xx r/min 離心5 min，計(jì)算姜黃素收率 Yt 及上相提取率，根據(jù)收率和姜黃素得率確定最佳 提 取溫度。 生姜中姜黃素提取率測(cè)定 姜黃素的 提取 ：超聲波協(xié)同雙水相法 原理： 姜黃素 為二酮類(lèi)化合物 ， 溶于甲醇、乙醇、異丙醇、堿、醋酸、丙酮和氯仿等有機(jī)溶劑 ,不溶于水。雙水相萃取技術(shù)是利用被提取物質(zhì)在不同的兩相系統(tǒng)間分配行為的差異進(jìn)行分離，具有較高的選擇性和專(zhuān)一性，是一種高效而溫和的分離新技術(shù)，能提取醛、酮、醇等弱極性至無(wú)極性香味成分。 超聲場(chǎng)的介入顯著縮短了浸提時(shí)間，明顯加快傳質(zhì)速率，提高了姜黃素的浸出率，同時(shí)保證了姜黃素的穩(wěn)定性。利用超聲場(chǎng)實(shí)現(xiàn)過(guò)程強(qiáng)化是開(kāi)拓高效、節(jié)能、降耗工藝過(guò)程的主要途徑之一。 試劑配制 ①雙水相體系的配置：控制蒸餾水與有機(jī)溶劑總量為 20 mL，稱(chēng)取一定量的無(wú)機(jī)鹽，加蒸餾水溶解，再加入有機(jī)溶劑，搖勻，靜置 5 min，得雙水相體系。 ② 姜黃素標(biāo)準(zhǔn)溶液：用電子天平精確稱(chēng)取 取 姜黃素 標(biāo)準(zhǔn)品 g，用甲醇定容于100 mL 容量瓶中 ，得濃度為 500 μg/ mL 的姜黃素標(biāo)準(zhǔn)液。 姜黃素標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制 用電子天平精確稱(chēng)取 取 姜黃素 標(biāo)準(zhǔn)品 g，用甲醇定容于 100 mL 容量瓶中 ，生姜中姜黃素的提取工藝研究 第 8 頁(yè)（共 21 頁(yè)） 得濃度為 500 μg/mL 的姜黃素標(biāo)準(zhǔn)液。 精密量取此標(biāo)準(zhǔn)液 mL、 mL、 mL、 mL、 mL、 mL、 mL、 mL、 mL、 mL,于 50 mL 容量瓶中用甲醇稀釋至刻度 ， 搖勻， 以甲醇作為空白對(duì)照， 于 425nm 處測(cè)定吸光度 （ A） ,以姜黃素濃度 C（ μg/ mL） 為縱坐標(biāo) ，吸光度 A 為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。 姜黃素得率的計(jì)算 讀取過(guò)濾后上下相的姜黃素提取液體積，并按測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的方法測(cè)其吸光度值。按下式計(jì)算姜黃素得率和收率： R= Vt/Vb； K= Ct/Cb； 收率 Yt= 1/ ( 1+ 1/RK) 姜黃素得率 =Ct Vt 106 /W 式中 R: 雙水相體系上下相的體 積比， Vt : 雙水相體系上相體積 ( mL)， Vb : 雙水相體系下相體積 ( mL) ， K： 姜黃素雙水相體系分配系數(shù)， Ct： 雙水相系統(tǒng)上相姜黃素的質(zhì)量濃度 （ μg/ mL)， Cb： 雙水相系統(tǒng)下相姜黃素的質(zhì)量濃度 （ μg/ mL)， Yt： 姜黃素的收率， W：為稱(chēng)取姜粉粉末重量（ g） 。 3 結(jié)果與分析 姜黃素標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制 配置不同濃度的姜黃素溶液，于 425 nm 測(cè)定吸光度，以姜黃素濃度 C（ μg/ mL）為縱坐標(biāo)，吸光度 A 為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。得回歸方程： C=，相關(guān)系數(shù) r2=。結(jié)果與分析 第 9 頁(yè)（共 21 頁(yè)） 圖 1 姜黃素溶液 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn) 由圖 1 可知， 吸光度與 姜黃素濃度在 1～ ug/ mL 范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好。 雙水相體系的確定 分別選用 乙醇 ∕ K2HPO4（ 鉀 乙） 、 異丙醇 ∕ K2HPO4（ 鉀 異） 、 乙醇 /(NH4)2SO4（ 銨 乙） 、 乙醇 /NaH2PO4（ 鈉 乙） 、 異丙醇 ∕ NaH2PO4（ 鈉 異） 作為 雙水相 萃取體系， 稱(chēng)取 姜粉 ，加入 無(wú)機(jī)鹽的質(zhì)量 為 4 g，醇水比為 1∶ 1，加入總量為 20 mL，40℃ 水浴 1h， 150 w 超聲提取 30 min， 20xx r/min 離心 5 min， 讀取 上下 兩相溶液體積，并于 425 nm 處測(cè)吸光度， 根據(jù)分相能力、姜黃素的收率 Yt 及上相提取率 ，確定最佳萃取體系。結(jié)果見(jiàn)表 1： 表 1 雙水相體系的確定 銨 乙 銨 異 鈉 乙 鈉 異 鉀 乙 鉀 異 R K Yt 上相 提取率 K 鹽 150 60 125 K 有機(jī) 以 K 鹽 、 K 有機(jī) 為分相能力的判斷依據(jù)， 其值 愈大，分相能力愈大。由表 1 知， 用生姜中姜黃素的提取工藝研究 第 10 頁(yè)（共 21 頁(yè)） 同種有機(jī)溶劑時(shí) ,在 鉀 乙、銨 乙、鈉 乙 體系和 鉀 異、銨 異、鈉 異 體系中， K 鉀＞ K 銨 ＞ K 鈉 ， 表明 分相能力 K2HPO4＞ (NH4)2SO4＞ NaH2PO4；對(duì)比 K2HPO(NH4)2SO NaH2PO4 的兩種醇雙水相體系， K 乙 ＞ K 異 ， 表明 分相能力乙醇 ＞ 異丙醇；且在六種 體系中， 乙醇∕ K2HPO4 體系分配系數(shù) K、萃取姜黃素的收率和 提取 率最高，故選擇 乙醇∕ K2HPO4 作為萃取體系。 姜黃素提取的單因素試驗(yàn) 固液比對(duì)姜黃素提取的影響 分別稱(chēng)取 g、 g、 g、 g、 g的姜粉，加入到總量為 20 mL，無(wú)機(jī)鹽為 4 g，醇水比為 1∶ 1 的雙水相體系中， 40℃ 水浴 1 h， 150 w 超聲提取 30 min，20xx r/min 離心 5 min，將提取液分液過(guò)濾，讀取兩相溶液體積，并于 425 nm處測(cè)吸光度， 計(jì)算姜黃素的收率 Yt 及上相提 取率。 結(jié)果見(jiàn)圖 2： 圖 2 固液比對(duì)姜黃素提取的影響 固 液比指樣品質(zhì)量與雙水相體系總體積之比 ，本實(shí)驗(yàn)固定雙水相的體積，通過(guò)姜粉質(zhì)量改變固液比，固液比越大 表示相同 體積雙水相體系萃取的姜粉越多。 根據(jù)液固萃取理論 ， 增加溶劑量將有利于溶質(zhì)的溶出。圖 2 為 固 液比對(duì) 姜黃素提取 的影響 ， 由其 可知 ，姜粉質(zhì)量 大于 0. 1 g 時(shí) ，姜黃素 得率 與收率 隨 質(zhì)量 的增加而減小 ，固 液比增加可導(dǎo)致原料用量的增加 ， 導(dǎo)致 姜黃素 不能完全溶出 ， 得率減小 ， 而且 姜粉 增加不利結(jié)果與分析 第 11 頁(yè)（共 21 頁(yè)） 于后續(xù)過(guò)濾處理。綜合考慮 ， 試驗(yàn)選擇的 姜粉質(zhì)量 為 g，固液比為 ︰ 20（ g/mL） 。 K2HPO4 質(zhì)量對(duì)姜黃素提取的影響 選取加入 K2HPO4 的質(zhì)量 為 4 g、 6 g、 8 g、 10 g、 12 g 的 雙水相體系 ， 按上述 最佳條件 提取姜黃素， 計(jì)算姜黃素的收率 Yt 及上相提取率。 結(jié)果見(jiàn)圖 3： 80. 00%82. 00%84. 00%86. 00%88. 00%90. 00%92. 00%94. 00%96. 00%98. 0