超聲輔助提取川木通總黃酮的工藝研究畢業(yè)論文(編輯修改稿)
2024-07-22 08:55 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 的黃酮類(lèi)化合物的提取方法與原理。 溶劑萃取法 僅限于提取黃酮苷類(lèi)物質(zhì)時(shí)，可用熱水進(jìn)行提取，如：自槐花米中提取蘆丁。極性比較大的多糖黃酮苷，可以直接用沸水提取，但是沸水提取易產(chǎn)生較多易溶于水的雜質(zhì)，需較復(fù)雜的后處理，且提取率也不理想，不常使用。極性較小的游離黃酮苷元?jiǎng)t可用甲醇：水（1:1）連續(xù)萃取[11]。 堿提取酸沉淀法 由于黃酮類(lèi)化合物大多具有酚羥基，易溶于堿水中。可先用堿性的水或稀醇提取，提取液經(jīng)酸化后可析出黃酮類(lèi)化合物沉淀[11]。 酶解法 當(dāng)一些原料的細(xì)胞壁包圍著黃酮類(lèi)物質(zhì)，使其不易被提取時(shí)，可以采用酶法提取 。如山楂中，黃酮被細(xì)胞壁所包圍, 且細(xì)胞壁間有果膠粘結(jié) , 采用酶提比一般方法提取率高 [12]。破壞果膠、纖維素等連接細(xì)胞壁的物質(zhì)，使黃酮類(lèi)物質(zhì)得到充分釋放是酶法提取原理。 超聲波提取法 用超聲波法提取黃酮類(lèi)物質(zhì)，是目前比較新的方法 。它的原理是超聲波產(chǎn)生的振動(dòng)強(qiáng)烈、加速度高、空化作用強(qiáng)、以及攪拌作用有助于破壞細(xì)胞膜，利于釋放與溶出黃酮類(lèi)化合物。提取液在超聲波作用下不斷震蕩，有利于溶質(zhì)擴(kuò)散。超聲的熱效應(yīng)使水溫基本在 57℃，對(duì)原料有水溶作用 [12]，超聲提取不對(duì)提取物的結(jié)構(gòu)、活性產(chǎn)生影響[13]。因此，超聲波提取法作為一種快速、高效、節(jié)能的新型提取工藝，使原料的利用率和有效成分的提取率得到了很大提高，提取時(shí)間大大縮短，并且避免了高溫對(duì)提取成分的影響。 立題依據(jù)和研究意義 目前 ,利用超聲輔助提取川木通總黃酮的研究報(bào)道很少，本文采用正交法優(yōu)化其條件，為以后川木通總黃酮的工業(yè)化生產(chǎn)提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ) 。 2 材料與方法 實(shí)驗(yàn)材料 實(shí)驗(yàn)原料 川木通購(gòu)自湖北省金貴中藥飲片公司，粉碎過(guò)60目篩，存于陰涼干燥處備用。 實(shí)驗(yàn)試劑試劑名產(chǎn)地或供應(yīng)商蘆丁國(guó)藥集團(tuán)氫氧化鈉天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司硝酸鋁天津市福晨化學(xué)試劑有限公司亞硝酸鈉天津市福晨化學(xué)試劑有限公司 溶液配置1 mol/L氫氧化鈉稱(chēng)取4 g氫氧化鈉于燒杯中，沸騰后冷卻的蒸餾水溶解（除二氧化碳），移至100 mL容量瓶中，定容至刻度線，搖勻貼上標(biāo)簽，備用，10%硝酸鋁溶液稱(chēng)取10 g硝酸鋁置于燒杯中，溶解，移至100 mL容量瓶中，定容至刻度線，搖勻，貼上標(biāo)簽，備用5%亞硝酸鈉溶液稱(chēng)取5 g亞硝酸鈉，放置于洗凈烘干的燒杯中溶解，移至100 mL容量瓶中，定容至刻度線，搖勻，貼上標(biāo)簽，備用30%乙醇溶液量取16 mL的95%乙醇，放置于50 mL容量瓶中定容至刻度線，搖勻，貼上標(biāo)簽，備用其它濃度乙醇溶液按30%乙醇溶液步驟配置，現(xiàn)配現(xiàn)用 實(shí)驗(yàn)儀器TU1810 DSPC型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)北京普析通用儀器有限責(zé)任公司FA1004B電子天平上海精密科學(xué)儀器公司TDL802B型離心機(jī)上海安亭科學(xué)儀器制造廠JY96II超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)寧波新芝生物科技股份有限公司 實(shí)驗(yàn)方法 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 ，用30%乙醇溶解定容至250 mL（ mg/mL，為初始濃度）制成蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液；往洗凈烘干的25 mL容量瓶編號(hào)為的5，、 mL的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液分別放入相應(yīng)容量瓶中，另外取蒸餾水做對(duì)照，編號(hào)為0號(hào)，各加入一定量的30% mL；加入5% mL，搖勻，靜置6分鐘；加入10% mL，搖勻，靜置6分鐘；加入5 mL濃度為1 mol/L的氫氧化鈉，用30%乙醇定容至25 mL，靜置1520分鐘，0號(hào)瓶調(diào)零，在510 nm下測(cè)各瓶的吸光值；以吸光度為縱坐標(biāo)（Y），濃度（mg/mL）為橫坐標(biāo)（X），作蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線。 提取率的計(jì)算 將測(cè)出的吸光度帶入標(biāo)曲，求得提取液中黃酮的濃度，按如下公式計(jì)算黃酮提取率： 式中：C是蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出來(lái)的黃酮濃度 (mg/mL)； N為稀釋倍數(shù)； V是提取液體積(mL)； M為川木通粉末質(zhì)量(g)。 單因素實(shí)驗(yàn)（1）不同乙醇濃度對(duì)總黃酮提取率的影響 g，共7份，用分別用30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%的乙醇作為提取液，按1:30 （g/mL）的料液比進(jìn)行超聲提取，超聲功率為200 W，超聲波提取4 min，提取液在3000 r/min條件下離心30 min。取上清液。,用來(lái)考察乙醇濃度對(duì)川木通總黃酮提取率的影響。（2）不同料液比對(duì)總黃酮提取率的影響 g，共6份，用70%乙醇溶液作為提取液，分別按料液比為1:1:1:1:1:50、1:60 （g/mL）加入乙醇溶液，寫(xiě)好編號(hào)，在超聲波200w的條件下提取4 min，提取液在3000r/min條件下離心30 min，取上清液，（不同乙醇濃度對(duì)總黃酮提取率的影響），計(jì)算出提取率，以考察料液比對(duì)川木通總黃酮提取率的影響。（3）不同超聲波功率對(duì)總黃酮提取率的影響 g，共7份，用70%乙醇溶液作為提取液，按照1:30 （g/mL）的料液比添加乙醇溶液，超聲波功率分別設(shè)定為50、100、150、200、250、300、350 mL，超聲處理4 min，寫(xiě)好編號(hào)，提取液在3000 r/min條件下離心30分鐘，取上清液，（不同乙醇濃度對(duì)總黃酮提取率的影響），計(jì)算出提取率，以考察超聲功率對(duì)川木通總黃酮提取率的影響
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