【文章內(nèi)容簡介】 類藥物體外的抗菌作用甚弱一樣。 ? 為了解決這個問題 ， 血清藥理學(xué)的實(shí)驗(yàn)方法是首先給動物服藥 ， 然后取其血清作為藥物源進(jìn)行藥理學(xué)觀察 。 粗制劑和復(fù)雜的成分經(jīng)過消化已及吸收分布 ， 代謝排除等體內(nèi)過程 ， 再取含藥的血清進(jìn)行藥理實(shí)驗(yàn) ， 比較接近藥物體內(nèi)環(huán)境中產(chǎn)生藥理作用的真實(shí)過程 ， 故適用于中藥 ， 特別是復(fù)方進(jìn)行藥效評價(jià)及其作用機(jī)制的研究 ， 還可進(jìn)行血清藥化學(xué)及藥氣力學(xué)的研究 。 受試動物多用大鼠 ， 豚鼠 、 家兔等 。 每日服藥 1次或 2次 （ 間隔 2~4h） ， 連用 3日 ， 亦可每日 1次 ， 連續(xù) 7日 。 給藥劑量可參考公式：劑量 =在體實(shí)驗(yàn)的給藥量 反應(yīng)系統(tǒng)中被稀釋的倍數(shù) 。 但可能因血藥濃度不完全隨給藥劑量相應(yīng)增加 ， 以及受灌骨濃度和容量的限制等 ， 不可能達(dá)到公制成的血清凍干粉 ， 加入反應(yīng)系統(tǒng) ， 使之達(dá)到需要的濃度 。 給藥后采血的參考時(shí)間 ， 如每日給藥 2次 ， 連續(xù) 3日 ， 為末次給藥后的 30mim至1h。 血清藥理實(shí)驗(yàn) ， 雖然可以克服離體實(shí)驗(yàn)中存在的某些缺點(diǎn) ， 但尚未完全成熟 ， 還存在著一定的問題 。 例如 ， 血清的來源和含藥濃度 、 加藥劑量 （ 不能添加 100%濃度的血清 ） ， 以及動物給藥的劑量 、 給藥方式 、采血時(shí)間 、 血清處理等諸多因素 ， 需要進(jìn)一步完善和確定 ， 故影響其推廣應(yīng)用 。 另外 ， 對不通血液而起的作用 ， 尤其是中藥對整體的調(diào)節(jié)功能 ，便不能反映和觀察 。 因此 ， 不能完全取代體內(nèi)實(shí)驗(yàn) 。 ? 又稱在體實(shí)驗(yàn)，是用整體動物進(jìn)行藥理實(shí)驗(yàn)的方法。根據(jù)試驗(yàn)需要可以選用正常動物或病理模型動物，按照試驗(yàn)的周期可以分為急性實(shí)驗(yàn)和慢性實(shí)驗(yàn)。前者一般指觀察一次給藥后機(jī)體在短時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)的反應(yīng)，如麻醉動物血壓實(shí)驗(yàn)、急性毒性試驗(yàn)等。但中藥往往起效較慢，作用較溫和，即使急性實(shí)驗(yàn)，有時(shí)也需持續(xù)多次給藥，如 3~7日甚至更長時(shí)間后才能出現(xiàn)效應(yīng)。慢性實(shí)驗(yàn)指觀察機(jī)體在較長時(shí)間內(nèi)多次給藥出現(xiàn)的反應(yīng)，如壽命試驗(yàn)、慢性造瘺（胃腸瘺、子宮瘺等）、長期毒性試驗(yàn)等。在體實(shí)驗(yàn)比較接近臨床狀態(tài)，尤其符合中藥多成分、多靶點(diǎn)、多系統(tǒng)的調(diào)節(jié)整體作用，并可彌補(bǔ)離體實(shí)驗(yàn)的不足和局限性，故中藥的藥效學(xué)試驗(yàn)以體內(nèi)實(shí)驗(yàn)為主，體外實(shí)驗(yàn)為輔。結(jié)合中醫(yī)臨床用藥的實(shí)踐，以消化道給藥為主，其他給藥途徑為輔。尚若為中藥有效成分或有效部位（群）、制劑較純者，或臨床為注射給藥者，可用體外實(shí)驗(yàn)或注射給藥進(jìn)行主要藥學(xué)試驗(yàn)。 （二）藥效學(xué)試驗(yàn)的動物模型 ? 研究和評價(jià)新藥的防治作用需要建立動物模型 ， 20世紀(jì)以來 ， 新藥研究發(fā)展較快的原因之一是成功建立了很多病理模型 ， 從而開辟了實(shí)驗(yàn)治療的廣闊領(lǐng)域 。 ? ：理想的動物模型應(yīng)與人類疾病的臨床相似 ， 特別是中醫(yī) “ 病 ” 或 “ 證 ” 的動物模型應(yīng)具有中醫(yī)特點(diǎn) ， 與臨床辨證相似 。 但要求一個動物模具型完全與人類疾病及臨床表現(xiàn)相似 ， 這幾乎是不可能的 。 因?yàn)樵S多人類疾病的病因和病理變化尚未闡明 ， 除傳染病以外 ， 大多來類推于基因的異常和缺陷 。 中醫(yī)的 “ 病 ” 、 “ 證 ” 尤為復(fù)雜 ， 例如 ， 脾虛證可見消化道吸收 、 分泌 、 自主神經(jīng)功能紊亂 ， 體溫調(diào)節(jié)中樞和血管運(yùn)運(yùn)中樞失常 ， 內(nèi)分泌和免疫功能變化等系統(tǒng)的異常 。 某些動物模型往往側(cè)重于體現(xiàn)有關(guān) “ 病 ” 、 “ 證 ” 的一定階段 ， 某一證型 ， 某些主要癥狀或病理變化 。 ? 動物模型有自發(fā)性動物模型及誘發(fā)性或?qū)嶒?yàn)兩大類 。 前者包括突變系的遺傳疾病和近交系的腫瘤模型 ， 如高血壓大鼠 、 高血糖小鼠 、 肥胖癥小鼠 、 無胸腺裸鼠 、 青光眼兔等 。 其最大優(yōu)點(diǎn)是疾病的發(fā)生發(fā)展類似于人類 ， 但這些模型來源困難 ， 不可能大量使用 。近代醫(yī)學(xué)常用的是實(shí)驗(yàn)性動物模型 ， 即通過物理 、 化學(xué)和生物等致病因素 ， 人工誘發(fā)動物某些組織器官或全身的損傷 ， 在功能 、代謝和 （ 或 ） 形態(tài)學(xué)上出現(xiàn)與人類相應(yīng)疾病類似的病變 。 這類模型可以在短期內(nèi)大量復(fù)制及適應(yīng)研究目的等特點(diǎn) ， 但其與自然發(fā)生的疾病模型畢竟存在一定差異性 。 為此 ， 在設(shè)計(jì)制造該類模型時(shí) ， 應(yīng)盡可能克服其不足之處 ， 發(fā)揮特點(diǎn) 。 ? 評價(jià)模型的好壞、成功與否，關(guān)鍵是看能否反映防治對象的本質(zhì)。只要能反映事物的本質(zhì)，模型的設(shè)計(jì)越簡單好。例如，抗毒藥的模型，只要給動物攻毒就行；藥物的抗菌、抗病毒作用常用體內(nèi)保護(hù)試驗(yàn)可做常規(guī)的抗菌譜，觀察指標(biāo)合理，效率也高。至于技術(shù)的先進(jìn)性，方法的難易固然能反映研究的水平，但不是主要的。如果模型選擇不當(dāng)，再高的水平只是花架子，不可能得到正確的結(jié)果。 ? 動物模型選擇標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)盡可能符合中醫(yī)臨床證或病的要求，以整體模型為主。例如，根據(jù)“虛則補(bǔ)之”的辨證施治原則，研究補(bǔ)益藥最好采用虛證模型，因?yàn)檎游飳訇庩柶胶?，正氣不虛的機(jī)體，故對許多臨床患者有效的補(bǔ)益藥用正常動物往往看不到補(bǔ)益的效果。研究證明，在“氣虛證”動物模型上，免疫指標(biāo)比正常動物普遍低下，給予參芪注射液后，多項(xiàng)免疫指標(biāo)明顯回升，而對正常動物則不如虛證模型升高明顯。正如解熱藥只降低發(fā)熱者的體溫，對正常體溫卻無降溫作用，解痙藥則對痙攣情況下的器官作用強(qiáng)而顯著一樣。 ? 動物病理模型是具有人類疾病模擬性表現(xiàn)的實(shí)驗(yàn)對象和材料 ， 它是探索人類疾病本質(zhì)及新藥有效性評價(jià)的一個重要方法和手段 。 人類各種疾病的發(fā)生發(fā)展極為復(fù)雜 ， 要深入研究其發(fā)病機(jī) 機(jī)和病理變化 ， 以及觀察和評價(jià)藥物的療效 ， 不能也不應(yīng)該在病人身上進(jìn)行 。 例如 ， 放射病 、 毒氣中毒 、 烈性傳染病等平時(shí)很難見到 ， 急性白血病 、 血友病及自身免疫性疾病等收集亦較困難 。 有的疾病潛伏期及病程較長 ，如腫瘤 、 慢性氣管炎 、 肺心病等 ， 要幾年 、 幾十年 ， 有些致病因素需要隔代乃至幾代才能顯示 。 即使病種病情相同 ， 因病人的性別 、 年齡 、 體質(zhì) 、 遺傳及社會因素等不同 ， 也會影響疾病的病理過程 。 利用動物 ， 可以在控制實(shí)驗(yàn)條件下 ， 用單一或特定的病因 ， 短期或較短時(shí)間內(nèi)復(fù)制出典型的病理模型 ， 不但在群體上容易得到滿足 ， 并且可以避免在人身上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的危險(xiǎn)性 。 ? 正確制作或選擇一個合理的動物模型，可以增加藥效學(xué)研究的真實(shí)性、可信性、成功率，提高研究的設(shè)計(jì)水平和科學(xué)性。相反，使用一個不合理的模型，則會使實(shí)驗(yàn)結(jié)果失去準(zhǔn)確性，甚至與原設(shè)計(jì)完全相反。即使得出實(shí)驗(yàn)者滿意的結(jié)果，也會因動物模型選擇不當(dāng)而得不到認(rèn)可。 ? “ 證 ” 是中醫(yī)在長期臨床實(shí)踐中對某些癥候群的概括 ， 對診斷和治療等十分重要 ， 辨證才能施治 。 可見 ， 建立證的動物模型 ， 一方面可提供該證的研究對象 ， 探索其病因 、 病機(jī) 、 證候及病理變化等 ， 以便了解疾病的本質(zhì)；另一方面則用于觀察和評價(jià)新藥的療效 。在中藥藥理研究中 ， 目前應(yīng)用較多的動物模型主要有兩類：一類是擬“ 病 ” 的模型 ， 另一類是擬 “ 證 ” 的模型 。 后者如 “ 血瘀 ” 、 “ 陰虛 ” 、“ 陽虛 ” 、 “ 氣虛 ” 、 “ 血虛 ” 、 “ 脾虛 ” 、 “ 腎虛 ” 、 “ 厥脫證 ” 等動物模型 。 但由于目前對各種 “ 證 ” 的病因病機(jī)和生理生化變化等本質(zhì)遠(yuǎn)未徹底闡明 ， 故很難復(fù)制與臨床有關(guān) “ 證 ” 相符的動物模型 。 為檢驗(yàn)所制 “ 證 ” 模型的可靠性 ， 目前常從兩個方面加以衡量 ， 一是用比較法 ，將動物模型的癥狀與中醫(yī)臨床癥狀加以比較 。 由于中醫(yī)辨證是從人體出發(fā) ， 采用望 、 聞 、 問 、 切的診斷方法很難在動物身上進(jìn)行 ， 所以要用要模型動物上所測得的生理生化指標(biāo) 、 組織形態(tài)變化與臨床患難與共者情況進(jìn)行比較 。 另一是用藥物反證法 ， 即用中藥代表方 （ 藥 ） 對所建立病理模型進(jìn)行治療 ， 根據(jù)有無療效來判斷模型的可靠與否 ， 同時(shí)也可以觀察中藥的作用 。 例如 ， 模擬血瘀證的病理模型能被活血瘀方 （ 藥 ） 所逆轉(zhuǎn)；血虛證動物模型 ， 用養(yǎng)血藥治療 ， 應(yīng)產(chǎn)生預(yù)期的治療作用 。 為使動物模型盡量接近中醫(yī)的 “ 證 ” ， 應(yīng)采用多種病因 ， 不同動物 ， 以及多方法 ， 多指標(biāo)地進(jìn)行研究 。 ? 動物模型雖然在人類疾病及藥物的研究中，發(fā)揮了不可抹抹滅的作用，但由于種屬差異，造模方法，機(jī)體反應(yīng)性的不同，特別社會因素和環(huán)境因素等，很難與人類疾病及證候的臨床表現(xiàn)完全相同。盡管人們建立了一些?。ㄗC）的動物模型，但尚處于探索階段，有的僅用于病因病機(jī)證候的研究，不適宜藥理學(xué)試。比較成熟、科學(xué)合理的中醫(yī)?。ㄗC）動物模型甚少，無論是數(shù)量或是質(zhì)量均與目前要求相差甚遠(yuǎn)。在不同模型上，藥物療效的差異給新藥的研制工作帶來較大的困難。為此，研究中應(yīng)盡量選擇與人體反應(yīng)比較接近的動物模型，發(fā)現(xiàn)矛盾時(shí)應(yīng)深入分析原因，從中找出比較合理的模型。一個藥物往往需要用幾個模型（一般為 2個或以上），從不同側(cè)面證實(shí)其藥效。有的要在研制工作中反復(fù)進(jìn)行，切忌單憑個別動物指標(biāo)就作絕對的肯定或否定。 ? 在實(shí)際評價(jià)具體的模型時(shí) ， 仍然存在很多分岐 ， 即使像病因已明的病毒性乙型肝炎 ， 至今仍無大家能接受的模型 ， 有的認(rèn)為鴨肝炎可以作為模型 ， 但有人認(rèn)為鴨肝炎與人的乙型肝炎相差較大 。對中醫(yī) “ 證 ” 的動物模型爭議更大 ， 如 20紀(jì)紀(jì) 60年代的糖皮激素“ 陽虛 ” 模型 ， 至今仍持有不同見解 。 有些疾病的模型本身就不大好建立 ， 如高血壓 、 冠心病 、 風(fēng)濕病等 ， 雖相應(yīng)地建了許多模型 ， 亦成功的評選過一些新藥 ， 但與人體比較 ， 在病因和病理上還有相當(dāng)?shù)木嚯x 。 有的疾病現(xiàn)在還缺乏模型 ， 如神經(jīng)性皮炎 、 鱗屑病 、 酒查鼻等 。 有些藥物劑型也難以在動物上實(shí)施 ， 如臍敷 、坐敷及肛門栓劑等 。 ? 由上可見 ， 很多動物模型尚有待改進(jìn) 、 完善和積累經(jīng)驗(yàn) ， 更多的則有待于創(chuàng)新建立 。 應(yīng)該支持和鼓勵人員努力探索 ， 在充分實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上 ， 創(chuàng)建新的動物模型 。 由于中藥與化學(xué)藥品藥效學(xué)研究的基本原則 、 主要內(nèi)容和技術(shù)要求 ， 有很多相同之處 ， 故亦可借鑒現(xiàn)代藥理學(xué)的理論 、 方法和手段 ， 以補(bǔ)充中藥藥理學(xué)研究工作方法的不足 。 例如 ， 結(jié)扎冠狀動脈造成 “ 心肌缺血 ” 的動物模型 ，用醋酸刺激制造 “ 潰瘍病 ” 動物模型等 。 只有這樣 ， 才能促進(jìn)藥效學(xué)評價(jià)的發(fā)展 。 另外 ， 每一種動物模型 ， 常常對某些藥效反液壓較敏感和準(zhǔn)確 ， 而對其他方面則較差 ， 在選用動物模型時(shí) ， 應(yīng)充分權(quán)衡其優(yōu)缺點(diǎn) ， 用其所長 ， 以取得理想的結(jié)果 。 （四）藥效學(xué)試驗(yàn)指標(biāo)的選擇 ? 藥效學(xué)試驗(yàn)選用的指標(biāo)應(yīng)能準(zhǔn)確無誤地反映藥物對機(jī)體的影響 ，所以要注意以下幾項(xiàng)要求 。 ? 所選指標(biāo)應(yīng)該針對性強(qiáng) 、 專屬性好 ， 能夠反映變化本質(zhì) 。例如 ， 要觀察藥物的降壓或升壓作用 ， 檢測血壓是特異性的關(guān)鍵指標(biāo)；如要說明藥物對急性腎炎的治療作用 ， 盡管血壓升高也是急性腎炎常見癥狀 ， 但并非特異的關(guān)鍵指標(biāo) 。 因?yàn)榧毙阅I炎并不一定會有血壓升高 ， 血壓變化也不能代表藥物對急性腎炎的療效；而應(yīng)選擇腎功能檢查 、 尿液檢查或腎形態(tài)學(xué)檢查等作為關(guān)鍵指標(biāo) 。在中藥藥理研究中 ， 有時(shí)確定特異性指標(biāo)還存在困難 。 例如 ， 要說明中藥的解表 、 開竅 、 助陽 、 滋陰等 ， 難以找到單一的特異性指標(biāo) 。 對此 ， 在一個指標(biāo)不夠時(shí) ， 可以用一組指標(biāo)來彌補(bǔ) 。 如解表藥可選用發(fā)汗解熱 、 鎮(zhèn)靜 、 鎮(zhèn)咳 、 祛痰 、 平喘 、 抗炎 、 抗敏及免疫功能等藥效學(xué)試驗(yàn)指標(biāo) 。 ? 指標(biāo)要敏感 ， 能準(zhǔn)確反映病情 、 證候的變化及藥物的防治作用 。 敏感性差或遲鈍的指標(biāo) ， 會遺漏某些陽性變化 ， 造成假陰性 。 有的指標(biāo) ， 由于彌散度大 ， 標(biāo)準(zhǔn)差大 ， 而導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)學(xué)無顯著性意義 。 ? 指標(biāo)要穩(wěn)定 ， 重現(xiàn)性好 ， 結(jié)果才可靠 。 如發(fā)現(xiàn)重復(fù)性差 ，應(yīng)及時(shí)排除種種干擾因素 ， 糾正對檢測指標(biāo)的影響 ， 重新實(shí)驗(yàn) 。否則重復(fù)性差的結(jié)果不可信 ， 不能作為新藥療效評價(jià)的依據(jù) 。 ? 主觀檢測的指標(biāo) ， 不夠準(zhǔn)確 。 例如 ， 肉眼觀察動物自發(fā)活動的影響 ， 可帶有很大的主觀性 。 如果用光電計(jì)數(shù)儀 ， 計(jì)算動物活動的次數(shù) ， 或用記錄儀記錄小鼠在一定時(shí)間內(nèi)活動或行走的軌跡 ， 那就是客觀的量化指標(biāo) 。 肉眼測量血壓計(jì)水銀柱 ， 亦有很大誤差 ， 而用描記儀直接描記血壓曲線 ， 動態(tài)的記錄血壓的變化 ，則更為客觀 。 ? 為了判斷和比較藥物的作用 ， 便于統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 ， 檢測指標(biāo)應(yīng)有量的概念 。 但是指標(biāo)本身并不都是有數(shù)量的 。 量反應(yīng)指標(biāo)有數(shù)量可表示 ， 而質(zhì)反應(yīng)指標(biāo)則沒有 。 后者只反映現(xiàn)象的出現(xiàn)與否 ， 如死與不死 、 掠厥與不驚厥等 。 這類指標(biāo)只能通過累計(jì)現(xiàn)象出現(xiàn)的頻率來達(dá)到數(shù)量化 （ 如陽性反應(yīng)的百分率 ） 。 也可采用計(jì)分法 ， 接陽性反應(yīng)的程度人為地區(qū)分為若干級 。 例如 ， ， 把小鼠的行為分解為 40多個指標(biāo) ，每個指標(biāo)都區(qū)分為 8級 ， 以反映給藥后行為變化的程度 。 形態(tài)學(xué)（ 如組織 、 病理 ） 指標(biāo)亦難于定量 、 常需采用定量組織學(xué)方法 ，如根據(jù)病理改變的范圍程度等 ， 人為地進(jìn)行定量或半定量 。 ? 各種指標(biāo)均有其優(yōu)缺點(diǎn) ， 例如生理 、 生化指標(biāo)可以定性定量及動態(tài)觀察 ， 但有時(shí)定位欠佳 ， 可受多種因素干擾 ， 穩(wěn)定性較差；而形態(tài)學(xué)指標(biāo)可定性 、