【文章內容簡介】 黃酮類化合物多為晶性固體，少數（如黃酮苷）為無定形粉末。 游離的苷元中，除二氫黃酮、二氫黃酮醇、黃烷及黃烷醇有旋光性外，其余則無。苷類由于在結構中引入糖的分子，故均有旋光性，且多為左旋。（ 2）溶解度 u 黃酮類化合物的溶解度因結構及存在狀態(tài)（苷或苷元，單糖苷、雙糖苷或三糖苷）不同而有很大差異。u 游離苷元難溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等有機溶劑及稀堿液中。u 黃酮苷一般易溶于水、甲醇、乙醇等強極性溶劑中，但難溶或不溶于苯、氯仿等。 （ 3）酸堿性 酸性： 黃酮類化合物因分子中多有酚羥基，故顯酸性，可溶于堿性水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺中。 堿性 氧原子的性質u 黃酮類化合物分子中 γ 吡喃酮環(huán)上的 1位氧原子，因有未共用的電子對，故表現出微弱的堿性，可與強無機酸，如濃硫酸、鹽酸等生成鹽，常表現出特殊的顏色，可用于鑒別。u 生成的鹽極不穩(wěn)定，加水后即可分解。 （ 4）顯色反應u 還原反應：與鹽酸 — 鎂粉（或鋅粉）反應，u 金屬鹽類試劑的絡合反應：黃酮類化合物分子中多有下列結構，故?？膳c鋁鹽、鉛鹽、鋯鹽、鎂鹽等試劑反應，生成有色絡合物。 鋁鹽： 常用試劑為 1%三氯化鋁或硝酸鋁溶液。生成的絡合物多為黃色（ λmax=415nm ） ,并有熒光，可用于定性及定量分析。 鉛鹽： 常用 1%醋酸鉛及堿式醋酸鉛水溶液，可生成黃至紅色沉淀。據此不僅可用于鑒定，也可用于提取及分離工作。 鋯鹽： 多用 2%二氯氧化鋯甲醇溶液。黃酮類化合物分子中有游離的 3或 5OH存在時，均可反應生成黃色的鋯絡合物。但兩種鋯絡合物對酸的穩(wěn)定性不同，當反應液中接著加入枸櫞酸后， 5羥基黃酮的黃色溶液顯著褪色，而 3羥基黃酮溶液的呈鮮黃色（鋯 — 枸櫞酸反應）。 （ 5）紫外光譜特征 黃酮類由于具有 2苯基色原酮的基本結構，具有特定的紫外吸收峰，常有兩個較強的吸收帶， I帶在 300—400nm 范圍內，它是由于 B環(huán)桂皮?；鸬?， Ⅱ 帶為 240—285nm 范圍內，它是由于 A環(huán)上的苯甲酰基引起的。 黃酮類化合物當加入一些位移試劑如甲醇鈉、醋酸鈉、氯化鋁等，可使最大吸收波長發(fā)生位移，選擇性提高，還可消除雜質的干擾，有利于含量測定。 三、定性鑒別顯色反應 黃酮類化合物的顏色反應多與分子中的酚羥基及 γ 吡喃酮環(huán)有關。 u 常用鹽酸 鎂粉（或鋅粉）反應 u 與金屬鹽類試劑的配合反應 黃酮類化合物分子中有游離的 3OH、 5OH或鄰二酚羥基時可與 Al3+、 Zr4+、 Pb2+、 Sr2+等形成絡合物，這些絡合物有的產生熒光或顏色加深（如 Al3+、 Zr4+），有的產生沉淀（如 Pb2+、 Sr2+） 色譜鑒別u 吸附劑：硅膠、聚酰胺；u 硅膠色譜分離弱極性化合物較好；u 聚酰胺色譜他離含游離酚羥游離羥基的黃酮及其苷為佳；u 纖維素薄層則適用于分離多糖苷混合物；u 顯色反應：采用在紫外光下觀察熒光和噴顯色劑相配合的方法。 四、黃酮類成分定量分析 中藥制劑中如含有黃酮類成分，可根據要求測定制劑中的總黃酮含量、黃酮類單體成分的含量或二者同時測定。u 直接測定 : 黃酮類化合物具有特定的紫外吸收峰 ,含黃酮類化合物的原料藥及部分制劑經一定的提取純化后 ,可直接于最大吸收波長處測定其吸收度 ,以蘆丁等為對照品計算其含量 .u 顯色測定 : 黃酮類化合物顯色以后顯色物與背景最大吸收波長差別較大 ,可消除背景 (即陰性空白 )的干擾 ,以提高本法的選擇性及靈敏度 .常用鋁鹽作顯色試劑 .五、黃酮類單體成分的含量測定薄層色譜法 樣品經有機溶劑或水提取后，可用硅膠、纖維素或聚酰胺進行層析，達到分離目的。 層析后可將含有待測組分的色斑刮下，再用適當的溶劑洗脫后，用紫外 可見分光光度法測定。 更常用的是薄層掃描儀（單波長或雙波長法）直接在薄層板上掃描測定。 高效液相色譜法 由于黃酮類化合物在紫外區(qū)有較強的吸收，使用HPLC法檢測靈敏度較高，故該法在黃酮類單體成分的定量分析中最常用。 黃酮類成分的 HPLC條件他為正相和反相色譜兩類，反相色譜應用較多。 反相色譜測定多有 C18鍵合相固定液，流動相常用甲醇 水 乙酸（或磷酸緩沖液）及乙腈 水。檢測器主要采用紫外檢測器或熒光檢測器。 應用示例雙黃連口服液中黃芩苷的含量測定處方組成：金銀花、黃芩、連翹色譜條件與系統適用性試驗：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇 水 冰醋酸（ 50： 50： 1）為流動相；檢測波長 274nm。理論塔板數按黃芩苷峰計算應不低于1500.對照品溶液的制備：精密稱取黃芩苷對照品 10mg，置100ml量瓶中，加 50%甲醇適量，置水浴中振搖使溶解，放置至室溫，稀釋至刻度，搖勻，即得（每 1ml中含黃芩苷 ）。供試品溶液的制備：精密量取本品 1ml，置 50ml量瓶中，加 50%甲醇適量，超聲處理 20min，放置至室溫，加 50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。測定：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各 5ul，注入液相色譜儀，測定，即得。 本品每支含黃芩以黃芩苷（ C21H18O11）計，不得少于80mg。第四節(jié) 皂苷類成分分析 一、概述 ? 三萜是由 30個碳原子組成的萜類化合物，大多數三萜化合物均可看作由 6個異戊二烯單位聯結而成。? 游離三萜類化合物通常多不溶于水，而與糖結合成苷后，則大多可溶于水，振搖后可生成膠體溶液，并有持久性似肥皂溶液的泡沫，故有三萜皂苷之稱。 二、理化性質溶解度u可溶于水，易溶于熱水、含水稀醇、熱甲醇和熱乙醇中，幾乎不溶于或難溶于乙醚、苯等極性小的有機溶劑。u在含水丁醇或戊醇中溶解度較好，且又能與水分成二相，可利用此性質從水溶液中用正丁醇或戊醇提取皂苷，借以與親水性的糖、蛋白質等分離。u三萜皂苷元能溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿等有機溶劑，而不溶于水。顯色反應u醋酐 濃硫酸反應（ LiebermannBurchard反應）；u五氯化銻反應 (Kahlenberg反應 )；u三氯醋酸反應 (RosenHeimer反應 )；u冰醋酸 乙酰氯反應 (Tschugaeff反應 )；u氯仿 濃硫酸反應 (Salkowski反應 )。 三、定性鑒別：理化鑒別泡沫反應：多用于檢驗含有皂苷的原料藥；u化學顯色反應：僅在組成藥物較少的中藥制劑中使用。