【文章內容簡介】 標 2 掌握 黃芩中黃酮 類化合物的提取、分離及鑒定技術。 熟悉 黃芩中黃酮類化合物的結構及性質。 了解 黃芩中黃酮 類化合物的存在及生物活性。 知識要求 3 能力要求 1 掌握黃芩中黃酮類化學成分的提取分離原理及操作技術。 熟練進行 黃芩中黃酮類 化合物的提取、分離及鑒定操作。 學會 黃芩中黃酮類 化合物的色譜鑒定技術 。 學習目的 任務導入： 黃芩為唇形科植物黃芩（ Scutellaria baicalensis Gei）的干燥根。從其中分離出的黃酮類化合物有黃芩苷、黃芩素、漢黃芩苷、漢黃芩素、木蝴蝶素Ａ等 20多種。其中黃芩苷（ %～ %）是主要有效成分，有抗菌消炎、降低轉氨酶等作用。黃芩苷元的磷酸酯鈉鹽可用于治療過敏、哮喘等疾病。 黃芩中黃芩苷的提取工藝流程： 黃芩苷分子中有羧基，酸性較強，在植物體內多與鎂離子成鹽，且黃芩苷的鎂鹽水溶 性較大，故可用水為溶劑提取。水提取液酸化后，該鎂鹽又轉化為有游離羧基的黃芩苷， 因其難溶于酸水而沉淀析出。黃芩苷的提取分離流程如下： 加適量水攪勻 ， 加 40%NaOH調至 pH7， 再加入等量乙醇 ， 過濾 沉淀 沉淀 上清液 黃芩粗粉 黃芩苷 水洗 ， 50%乙醇洗滌 ， 再用 95%乙醇洗滌或重結晶 加 HCL調 pH1～ 2， 充分攪拌 ， 加熱至 80℃ ， 保溫 30分鐘 ， 過濾 濾液 藥渣 濾液 分別加 10倍 、 8倍量水煎煮 2次 ， 每次 1小時 ， 過濾 藥渣 加 HCL調 pH1～ 2， 80℃ 保溫 30分鐘 ， 靜置 ， 離心沉淀 濾液 （二）黃芩中黃酮類成分的提取分離 （一）黃芩中黃酮類主要有效成分及結構 三 必備知識 黃芩苷（ baicalin） 黃芩素（ baicalein） 漢黃芩苷（ wogonoside） 漢黃芩素（ wogonin） （一）黃芩中黃酮類主要效成分及結構 OOH OH OOOO HO HO HC O O HOH OH OOH OOH OOOO HO HO HC O O HO C H 3OOH OH OO C H 3O 黃芩中黃芩苷為主要有效成分，黃芩苷為淡黃色針晶，熔點 223℃ ，幾乎不溶于水，難溶于甲醇、乙醇、丙酮，可溶于熱乙酸，易溶于堿性溶液。黃芩苷經水解能生成苷元黃芩素，黃芩素分子中具有鄰三酚羥基，易被氧化為醌類衍生物而顯綠色。這是黃芩在放置過程中或處理不當時易變綠的原因。 （二）黃芩中黃酮類化合物的提取分離 黃芩中黃酮類化合物的分離 方法一： 方法二 ： （二）黃芩中黃酮類化合物的提取分離 甘 肅 黃 芩 根 粉 末乙 烷 、 丙 酮 和 甲 醇 分 別加 熱 回 流 提 取 3 次 ， 過 濾減 壓 濃 縮丙 酮 部 位 甲 醇 部 位多 次 硅 膠 柱 層 析 ，氯 仿 甲 醇 乙 酸（ 1 0 0 ： 2 0 ： 0 . 5 ）梯 度 洗 脫濃 縮 析 晶 ， 重 結 晶黃 芩 苷木 蝴 蝶 素 漢 黃 芩 素 黃 芩 素 甘 黃 芩 苷 元 甘 黃 芩 素 四 知識鏈接及拓展 苷 檢識 結構 與分類 理化性質 苷（ glycosides）又稱糖苷、甙或配糖體，是糖及其衍生物的端基碳原子與另一非糖物質（稱為苷元或配基）連接而成的化合物。 苷糖與苷元連接的化學鍵稱為苷鍵，形成苷鍵的原子稱為苷鍵原子。 苷類在中藥中分布很廣泛，且具有多方面的生物活性，是一類重要的中藥化學成分。 氮苷 按照苷鍵原子進行分類 氧苷 硫苷 碳苷 紅景天苷（醇苷） O O O HO glcCH2OHOOOC H 2C H 2 O HRO OO O C HC N 苦杏仁苷（氰苷） 山慈姑苷（酯苷） 天麻苷（酚苷） O S CN( C H 2 ) 2O S 3 HC H C H S O C H 3蘿卜苷 NNNN H 2H OOO H O HC H 2 O HO 巴豆苷 蟲草苷 蘆薈苷 NNNNNH2O 四 知識鏈接及拓展 結晶與重結晶 原理 溶劑選擇 操作技術 結晶與重結晶的基本原理 結晶與重結晶法是利用混合物中各成分在不同溫度溶劑中溶解度的不同來達到分離的方法。 結晶溶劑的選擇 合適的溶劑就是在冷時對所要的成分溶解度小，而熱時溶解度又較大的溶劑。 溶劑的沸點亦不易太高。一般常用甲醇、丙酮、氯仿、乙醇、乙酸乙酯等。結晶溶劑又常會用到混合溶劑。 結晶的操作技術 （一）結晶分離技術的一般操作過程 1．將需結晶物質置于錐形瓶中，加入較需要量略少的溶劑，于水浴上加熱至微沸； 2．將熱溶液趁熱抽濾，以除去不溶的雜質； 3．將濾液冷卻，使結晶析出； 4．濾出結晶，必要時用適宜的溶劑洗滌結晶。 （二）結晶條件的控制 1．趁熱過濾得到的濾液應長時間靜置，逐漸冷卻，避免溫度驟降使析晶過快帶出雜質。 2．若濾液久置無結晶析出，可采取的方法有：松動瓶塞；加入少量晶種；玻璃棒摩擦； 加有機可溶性鹽類鹽析。 五 課 堂 互 動 1．聚酰胺柱色譜用于分離黃酮類化合物（苷、苷元）的原理、方法及洗脫規(guī)律。 2．簡述黃酮類化合物的酸性規(guī)律及在黃酮苷元分離中的應用。 3．何謂交叉共軛體系，它與黃酮類化合物顏色的關系如何？ 任務二 葛根中黃酮類化合物的提取分離技術 學習目標 一 二 三 任務導入 必備知識 五 四 六 相關知識鏈接及拓展 課堂互動 目標測試 一 學習目標 2 掌握葛根大豆 苷元的提取、分離及鑒定技術。 熟悉葛根 中黃酮類化合物的結構及性質。氧化鋁柱色譜的原理及操作。 了解葛根 中黃酮 類化合物的存在及生物活性。 知識要求 3 能力要求 1 掌握葛根中黃酮類化學成分的提取分離原理及操作技術。 熟練進行葛根 中黃酮類 化合物的提取、分離及鑒定操作。 學會葛根 中黃酮類 化合物的色譜鑒定技術 。 學習目的 任務導入： 葛根為豆科植物野葛 (Pueraria lobata(Willd.)Ohwi )或甘葛藤 (Pueraria thomsonii Benth.)的干燥根，甘葛藤習稱“粉葛”。具有解肌退熱，生津，透疹，升陽止瀉的作用。用于治療外感發(fā)熱頭痛、高血壓頸項強痛、冠心病心絞痛、早期突發(fā)性耳聾、強直性脊柱炎、泄瀉等病癥。現代醫(yī)學研究表明：葛根中的異黃酮類化合物葛根素對高血壓、高血脂、高血糖和心腦血管疾病有一定療效。 葛根中大豆苷元、葛根素等的提取工藝流程： 葛 根 粗 粉7 0 % 乙 醇 加 熱 回 流 提 取藥 渣 醇 提 液減 壓 濃 縮 至 1 : 7濃 縮 液加 飽 和 醋 酸 鉛 水 溶 液 ，攪 拌 ， 靜 置 ， 過 濾沉 淀 濾 液（ 雜 質 ）加 飽 和 堿 式 醋 酸 鉛 水 溶 液 ，攪 拌 ， 靜 置 ， 過 濾沉 淀 濾 液懸 浮 于 7 0 % 乙 醇 中 ， 通過 硫 化 氫 氣 體 ， 過 濾乙 醇 液 硫 化 鉛減 壓 濃 縮葛 根 總 黃 酮 粗 粉溶 于 水 飽 和 的 正 丁 醇 ， 上 氧 化 鋁