【文章內(nèi)容簡介】 自由流出，傳遞到萃取溶劑里。另一方面，由于不同物質(zhì)的tan6值不同，對微波能的吸收程度也不同，微波可以對體系中不同組分進行選擇性加熱，從而使被萃取物質(zhì)從基體或體系中分離出來，進入到萃取溶劑中。微波萃取技術(shù)的原理就是利用不同組分吸收微波能力的差異，使基體物質(zhì)的某些區(qū)域或萃取體系中的某些組分被選擇性加熱，從而使得被萃取物質(zhì)從基體或體系中分離，進入到介電常數(shù)較小、微波吸收能力相對較差的萃取劑中，并達到較高的產(chǎn)率。孫萍，李艷等[45]利用微波從甘草中提取總黃酮，并測定其含量。%，%，其提取速度快，實驗結(jié)果令人滿意。超臨界流體萃取(supercritical fluid extraction,簡稱SCF)是用超臨界流體（簡稱SCF0作為萃取溶劑，利用其特殊的物理化學性質(zhì)對混合物進行萃取分離的一種新型技術(shù)[46]。超臨界流體萃取分離過程的原理是利用超臨界流體的溶解能力與其密度的關(guān)系，即利用壓力和溫度對超臨界流體溶解能力的影響而進行的。在超臨界狀態(tài)下，將超臨界流體與待分離的物質(zhì)接觸，使其有選擇性地把極性大小、沸點高低和分子量大小的成分依次萃取出來。當然，對應各壓力范圍所得到的萃取物不可能是單一的，但可以控制條件得到最佳比例的混合成分，然后借助減壓、升溫的方法使超臨界流體變成普通氣體，被萃取物質(zhì)則完全或基本析出，從而達到分離提純的目的，所以超臨界流體萃取過程是由萃取和分離組合而成的[47，48]〕。其優(yōu)點是：可以在接近室溫(35一40℃)及CO2氣體籠罩下進行提取，有效地防止了熱敏性物質(zhì)的氧化和逸散。由于全過程不用有機溶劑，因此萃取物絕無殘留溶媒，同時也防止了提取過程對人體的毒害和對環(huán)境的污染，是100%的純天然。萃取和分離合二為一，當飽含溶解物的CO2一SCF流經(jīng)分離器時，由于壓力下降使得CO2與萃取物迅速成為兩相(氣液分離)而立即分開，不僅萃取效率高而且能耗較少，節(jié)約成本:CO2是一種不活潑的氣體，萃取過程不發(fā)生化學反應，且屬于不燃性氣體，無味、無臭、無毒，故安全性好。CO2價格便宜，純度高，容易取得，且在生產(chǎn)過程中循環(huán)使用，從而降低成本。壓力和溫度都可以成為調(diào)節(jié)萃取過程的參數(shù)。通過改變溫度或壓力達到萃取目的。壓力固定，改變溫度可將物質(zhì)分離。反之溫度固定，降低壓力使萃取物分離，因此工藝簡單易掌握，而且萃取速度快。付玉杰，祖元剛等[49]利用超臨界CO2c02萃取法對甘草黃酮進行提取。為工業(yè)化SFE一CO2法生產(chǎn)粗甘草黃酮提供了有價值的工藝參數(shù)。研究表明，利用超臨界CO2方法，在萃取壓力30MPa、萃取溫度50℃、原料與夾帶劑(85%乙醇)比15g/mL、CO2流量為10k/h、分離溫度40℃的條件下，得到的甘草黃酮類物質(zhì)與其他方法相比較具有很明顯的優(yōu)勢。由于黃酮類物質(zhì)被細胞壁包圍不易提取，并且常有果膠粘結(jié)，因此加入一定量的纖維素酶、果膠酶可以破壞細胞壁結(jié)構(gòu)，使提取傳質(zhì)阻力減小，利于黃酮類物質(zhì)的釋放出[51]。高保英等[52]利用纖維素酶果膠酶處理甘草提取甘草黃酮，研究發(fā)現(xiàn)復合酶法提取的最佳條件:以纖維素酶、果膠酶組成的復合酶，40℃，%，與微波法提取率相當。酶法提取與微波法提取相比，提取成本低，耗能低，為提取甘草黃酮提供了一種新方法。響應面分析法(Response SurfaceMethodology,RSM)是由Box于1957提出的一種尋找多因素系統(tǒng)中最佳條件的數(shù)學統(tǒng)計方法[11],目前已在黃酮、半纖維素、多糖、蛋白質(zhì)、脂肪酸、生物堿等的提取工藝優(yōu)化上得到廣泛應用[1216]。在單因素試驗的基礎上,利用響應面分析法對甘草酸和黃酮聯(lián)合提取的主要工藝條件進行了優(yōu)化,實現(xiàn)了甘草酸和黃酮的同步提取,克服了分步提取甘草酸和黃酮工藝的缺點,可為甘草的進一步開發(fā)利用提供技術(shù)支持。響應面是指響應Y同一組輸入X1，X2,…,Xn之存在函數(shù)關(guān)系式Y(jié)=F(X1，X2,…,Xn)，則由Y=F(X1，X2,…,Xn)所表示的曲面叫做響應面。在應用響應面法時，我們假定：(1)這個存在且輸入變量是連結(jié)的；(2)函數(shù)F在較窄的范圍內(nèi)可以用一個低階的多項式逼近；(3)輸入量X1，X2,…,Xn在試驗過程中可以控制和度量。響應Y代表三維空間中的一張曲面，為有得于目測響應面的開頭，常畫出響應面的等高線。在等高線圖中，每一條等高線對應于響應面的一個特定的高度，它有助于研究導致響應面的形狀或高度改變時，輸入量X1，X2,…,Xn的水平。甘草是一味常用的中藥。隨著其化學成分研究的深入，發(fā)現(xiàn)了許多具有藥用值的生物活性化合物。隨著生物學技術(shù)的發(fā)展，甘草的研究也從宏觀走向微觀。既涉及復方應用，又涉及基因分析。有關(guān)甘草及其復方藥物的藥理作用研究已開展較為廣泛，但甘草化學成分的微量鑒定及其臨床作用機理和效果評價有待進一步研究。隨著先進的分離技術(shù)不斷應用到研究中來，相信還會有更新穎、藥用價值更高的先導化合物被陸續(xù)分離鑒定出來。將來的發(fā)展趨勢及研究工作的重點在于:(l)開發(fā)甘草的復方藥配制，并對其功效進行研究，繼續(xù)分離研究甘草的有效物質(zhì)成分，并且研究有效成分的綜合藥理價值，在臨床上試驗，然后產(chǎn)業(yè)化這些配方和有效成分，擴大甘草的資源利用價值。(2)合理開發(fā)已有甘草資源，甘草中的有效物質(zhì)眾多，那么合理利用這些有效物質(zhì)稱為當前的研究重點，甘草的研究重點應該放在人工種植甘草的上面，對野生甘草資源加以保護利用，建立循環(huán)利用的合理甘草資源市場。(3)提高甘草資源的深加工項目，消除甘草的初加工的浪費，例如主根部分可以供給切片市場，側(cè)根部分可以進行甘草有效物質(zhì)的深加工產(chǎn)品，向甘草有效成分提取的深加工發(fā)展。(4)生產(chǎn)工藝的開發(fā)，甘草中的有效物質(zhì)的多樣性，要求我們天然產(chǎn)物研究人員制定合理生產(chǎn)工藝，對甘草資源合理利用加上重點，改良舊的生產(chǎn)工藝，設計新的提取工藝，以降低生產(chǎn)成本，提高提取率，提高甘草中有效物質(zhì)的純度，增加產(chǎn)品的附加值。、意義和主要內(nèi)容近年來隨著甘草黃酮類物質(zhì)藥理作用研究的深入，尤其是具有較強的抗愛滋病活性，使甘草黃酮提取工藝研究越發(fā)重要。國內(nèi)有些生產(chǎn)廠家所用工藝落后，也不同程度地造成資源的浪費。對甘草的深度開發(fā)和綜合利用是一項值得重視的課題。甘草的植物化學成雜，其主要的有效成分是三萜類和黃酮類化合物，而以往人們只對甘草中化合物作了大量深入的研究，對其質(zhì)量評價也僅以甘草酸的含量作為質(zhì)量準，顯然難以全面地評價甘草的質(zhì)量。近年來，隨著對甘草藥理作用的深表明甘草黃酮類化合物具有多種藥理作用[43]，是一類非常有效的活性成分目前中藥甘草研究的熱點。臨床及藥理研究表明，甘草黃酮類成分中的甘和光甘草定具有抗氧化[23,6871]、抗腫瘤[7275]、抗菌[44,76]、免疫促進和雌激性[27,77,78]等多種活性，在食品、醫(yī)藥和化妝品工業(yè)中有廣泛的用途。因此草中總黃酮及重要黃酮單體的的分離和藥效研究，建立甘草總黃酮及重要的含量測定方法，制定其相應的質(zhì)量標準，開發(fā)其潛在的藥用價值，對有利用甘草資源具有十分重要的意義。由于人們對甘草無保護地洗劫性采挖，使野生甘草資源瀕臨枯竭，更重要的是使生態(tài)環(huán)境遭到破壞，導致草原沙化、氣候惡化、水土流失嚴重。國家為保護種植甘草中的黃酮提取純化工藝研究生態(tài)環(huán)境，立法并采取一系列措施，保護草原、山林及瀕危物種，野生甘草被列入保護物種，禁挖、禁運。為解決甘草供需矛盾，國家出臺政策在對野生甘草禁止采挖的同時大力推廣和研究甘草的種植技術(shù)，但是家種甘草產(chǎn)品能否替代野生甘草，黃酮含量是否達到藥典標準，還是當今關(guān)注的熱點。為實現(xiàn)甘草資源高附加值產(chǎn)品的加工生產(chǎn)奠定了產(chǎn)業(yè)化基礎。應用該工藝，將對種植甘草的后續(xù)開發(fā)具有重要的研究價值。本題目主要是對影響甘草中黃酮成分提取率的各個因素進行研究，篩選黃酮提取生產(chǎn)的最佳工藝條件。甄選提取方法，提取溶劑，并對提取過程中的溫度、時間、提取次數(shù)等各個因素及提取效果的影響進行全面的考察，采用響應面分析法篩選優(yōu)化的提取黃酮的生產(chǎn)工藝條件及參數(shù)。2甘草中黃酮成分的提取研究甘草的植物化學成分十分復雜，其藥用有效成分為甘草酸和黃酮類化合物以及水溶性浸出物、還原糖、淀粉、氨基酸、有機酸、生物堿和多種金屬元素等。近年來，隨著人們對甘草藥理作用的深入研究，結(jié)果表明甘草黃酮類物質(zhì)是非常有效的活性成分，己成為研究的熱點。而隨著甘草資源的過度開發(fā)，甘草資源已受到前所未有的破壞。如何有效地利用有限的甘草資源成了巫待解決的問題。本章采用分光光度計測定了甘草中總黃酮的含量，為合理開發(fā)利用甘草資源提供依據(jù)。甘草：南陽市張仲景大藥房亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉均為分析純，95