基因工程技術(shù)(編輯修改稿)
2025-01-26 09:59 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 基因等。） 4）對受體細(xì)胞 無害、易分離 。 作為載體必須具備的條件： ? 常用的載體： 質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨立于細(xì)菌染色體之外，能夠進(jìn)行 自我復(fù)制 的雙鏈環(huán)狀 DNA分子。 最常用的質(zhì)粒 是 大腸桿菌的質(zhì)粒 ，其中常含有 抗藥基因 ，如抗四環(huán)素、氨芐青霉素等的標(biāo)記基因。質(zhì)粒的 存在與否對宿主細(xì)胞生存沒有決定性作用 ，但 復(fù)制只能在宿主細(xì)胞內(nèi)成 。 ——質(zhì)粒： ? 大腸桿菌的質(zhì)粒： ①說明質(zhì)粒能復(fù)制并能帶著插入的目的基因一起復(fù)制的是 ──“復(fù)制原點 ”。 ②說明質(zhì)粒有切割位點的是 ── “目的基因的插入位點 ” 。 ③說明有標(biāo)記基因的存在，將來可用含青霉素的培養(yǎng)基鑒別的是 ── “氨芐青霉素抗性基因” ④ 說明沒有危害 ── 此質(zhì)粒來自大腸桿菌。 其他載體： λ 噬菌體的衍生物 動植物病毒等 常用載體： 細(xì)菌質(zhì)粒 具備條件： ① 能自我復(fù)制； ② 有切割位點； ③ 有遺傳標(biāo)記基因 ④ 對受體細(xì)胞無害、易分離。 三、 “分子運(yùn)輸車” ——基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體： ? 如果把兩種來源不同的 DNA用同一種限制酶來切割，會怎樣呢？ 會產(chǎn)生 相同的黏性末端 ，然后讓兩者的黏性末端 黏合 起來，就似乎可以合成重組的DNA分子了。 模擬制作 綠色紙板 粉色紙板 剪刀 透明膠 材料用具： —— 目的基因 —— 載體 —— EcoRⅠ —— DNA連接酶 4種堿基序列（目的基因或載體上的堿基序列） 膠水（用來貼基因或載體上的堿基序列） 重組 DNA 分子的模擬制作 模擬制作 （ 1） 在藍(lán)色 、 橙色紙板上依次貼上有關(guān)的堿基序列 。 （ 注意：選對堿基序列 ） 方法步驟： （ 2）用剪刀進(jìn)行 DNA“切割”。 從兩塊硬紙板中找出 GAATT序列，找到GA切口，進(jìn)行切割。 （ 3）制成重組 DNA分子。 用透明膠將橙色紙板 DNA連接到藍(lán)色紙板上。（注意：堿基準(zhǔn)確配對才算成功） 模擬制作 思考與討論 不能。因為一般基因有上千個堿基對。 可能是剪切位點或連接位點選得不對（也可能是其他原因）。 DNA重組技術(shù)的基本工具
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