【文章內(nèi)容簡介】 )基本原理：抗原或抗體預(yù)先結(jié)合到某種固相載體表面；測定時，將受檢樣品(含待測抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按一定程序與結(jié)合在固相載體上的抗原或抗體起反應(yīng)形成抗原或抗體復(fù)合物；反應(yīng)終止時，固相載體上酶標(biāo)抗原或抗體被結(jié)合量(免疫復(fù)合物)即與標(biāo)本中待檢抗體或抗原的量成一定比例；經(jīng)洗滌去除反應(yīng)液中其他物質(zhì)，加入底物進行顯色，最后通過定性或定量分析有色產(chǎn)物量即可確定樣品中待測物質(zhì)含量。(2)方法類型及應(yīng)用：①雙抗體夾心法：用于檢測抗原，適用于檢測兩個或兩個以上抗原決定基的多價抗原；②間接法：用于檢測抗體；③競爭法：用于抗原和半抗原的定量測定，也可對抗體進行測定；④捕獲法：用于血清中某種抗體亞型成分(如IgM)的測定。簡述酶增強免疫測定技術(shù)的原理。DA具抗原及酶活性的AgE與Ab結(jié)合形成AgAb后，所標(biāo)的酶(E)因與Ab接觸緊密，空間位阻影響了酶的活性中心，酶活性受到抑制。加入未標(biāo)記抗原(標(biāo)準(zhǔn)或樣品中的Ag)后，Ag即與Ab叫競爭結(jié)合反應(yīng)系統(tǒng)中限量的Ab形成AgAb復(fù)合物，從而使反應(yīng)液中AgAb*(酶活性被抑制)的比例減少，具酶活性的游離AgE增多。最終測得的酶活性隨著反應(yīng)體系中未標(biāo)記抗原(Ag)濃度升高而增強。簡述免疫印跡法的原理。免疫印跡法由SDSPAGE、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印和酶免疫測定三項技術(shù)結(jié)合而成?？乖鹊鞍讟悠方?jīng)SDS處理后帶負電荷，SDSPAGE時從陰極向陽極泳動，分子量小者，泳動速度快；將凝膠中已經(jīng)分離的蛋白質(zhì)條帶在電場作用下轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜上；將印有蛋白質(zhì)條帶的硝酸纖維素膜依次與特異性抗體和酶標(biāo)第二抗體作用，加入能形成不溶性顯色物的酶反應(yīng)底物，使區(qū)帶染色；根據(jù)電泳時加入的分子量標(biāo)準(zhǔn)，可確定各組分的分子量。何謂金免疫測定技術(shù)?簡述其技術(shù)類型及原理。DA金免疫測定技術(shù)是指用膠體金顆粒作為標(biāo)記物進行抗原抗體反應(yīng)的一類免疫學(xué)測定技術(shù)，其主要技術(shù)類型有斑點金免疫滲濾試驗和斑點金免疫層析試驗。1)斑點金免疫滲濾試驗：在以硝酸纖維素膜為載體并包被了抗原或抗體的滲濾裝置中，依次滴加標(biāo)本、免疫金及洗滌液，因微孔濾膜貼置于吸水材料上，故溶液流經(jīng)滲濾裝置時與膜上的抗原或抗體快速結(jié)合并起到濃縮作用，達到快速檢測目的，陽性反應(yīng)在膜上呈現(xiàn)紅色斑點。2)斑點金免疫層析試驗：是將膠體金標(biāo)記技術(shù)和蛋白質(zhì)層析技術(shù)相合的以硝酸纖維素膜為載體的固相膜免疫分析技術(shù)，滴加在膜一端的標(biāo)本溶液受載體膜的毛細管作用向另一端移動，猶如層析一般，在移動過程中被分析物與固定于載體膜上某一區(qū)域的抗體或抗原結(jié)合而被固相化，無關(guān)物則越過該區(qū)域而被分離，然后通過膠體金的呈色條帶來判讀實驗結(jié)果。免疫溶血試驗的原理和用途。DA原理是補體能使已被抗體致敏了的紅細胞發(fā)生溶血。免疫溶血試驗所參與的成分有補體，抗原(SRBC)及抗體(溶血素)，這三種成分中如有兩種是已知的就可測知第三個成分，稀釋該成分可測定其效價或含量。如溶血素的滴定，溶血空斑試驗，CH50試驗，補體結(jié)合試驗，抗補體試驗等。如何進行補體單個成分的測定? DA補體單個成分可測其溶血活性或含量。測定溶血活性應(yīng)先制備缺乏該補體單個成分的“補體試劑。而后利用免疫溶血試驗的原理，將致敏紅細胞與“補體試劑”混合，再加入待測血清，孵育后，溶血程度與待測血清中的該補體成分的溶血功能有關(guān)。測定含量可用已知抗體以單向瓊脂擴散等方法進行。血清免疫球蛋白測定方法有那些？答：單向免疫擴散法：原理，優(yōu)點：簡單，條件要求低，但抗體需要高效價高特異性，靈敏度： mg/ml 免疫比濁法:原理，優(yōu)點：檢測結(jié)果準(zhǔn)確，精密度高，耗時短，靈敏度高ug/ml免疫球蛋白IgG、IgA、IgM測定有何意義？答：IgG、IgA、IgM均升高則慢性疾病， IgG升高則多為細菌感染導(dǎo)致，新生兒血清IgM升高則常為 宮內(nèi)感染。單一Ig顯著升高則多為免疫增殖病：多發(fā)性骨髓瘤，重鏈病、惡性淋巴瘤。Ig降低則體液免疫缺陷或聯(lián)合免疫缺陷。某患者臨床疑為細胞免疫功能缺陷，應(yīng)做哪些檢查以協(xié)助診斷？答：從以下幾個方面檢測1)皮膚試驗 ，顯示有遲發(fā)超敏反應(yīng)能力，表示受試驗者細胞免疫功能完善2)T細胞及其亞群檢測，常采用熒光抗體檢測T細胞表面標(biāo)志分子CD3，CD4等3)T細胞功能檢測，利用PHA刺激淋巴細胞增殖，轉(zhuǎn)化來判斷T細胞的功能簡述原發(fā)性吞噬細胞缺陷病的發(fā)病機制主要包括哪幾種？主要包括：①吞噬細胞趨化和（或）粘附功能障礙。②吞噬和殺菌功能障礙。③單核吞噬細胞的特殊異常，如IgG Fc受體缺陷。簡述AIDS的主要免疫學(xué)特征？①免疫系統(tǒng)的CD4T淋巴細胞受HIV感染，使CD4T細胞受損而減少。②單核巨噬細胞、濾泡樹突狀細胞和朗格漢斯細胞亦可受HIV 感染而受損。③進行性細胞免疫缺陷，繼而體液免疫缺陷。④B淋巴細胞可克隆激活伴免疫球蛋白增多。簡述體液免疫缺陷的檢測方法？有①血清Ig 的測定，常用免疫擴散法和免疫比濁法。②分泌型IgA 的測定，用單向免疫擴散或ELISA 等。③同種血細胞凝集素測定。④特異性抗體產(chǎn)生能力測定，疫苗接種后抗體產(chǎn)生的測定。⑤抗IgA抗體的測定，測自身抗體。⑥SmIg測定，檢測B細胞數(shù)量和其成熟程簡述細胞免疫缺陷的檢測方法？有①遲發(fā)性皮膚過敏反應(yīng)試驗，常為初篩試驗。②T細胞及其亞群的檢測，為主要的試驗測定CDCDCD8 分化抗原進行分類鑒定。③E 玫瑰花結(jié)試驗，現(xiàn)常用CD2 測定所代替。④淋巴細胞增殖反應(yīng)試驗，為體外免疫功能試驗，方法有形態(tài)法和同位素法。⑤T細胞分泌產(chǎn)物功能測定，測定激活的T細胞和單個核細胞分泌的細胞因子。簡述IDD的共同臨床特點？.①對病原體的易感性強、常發(fā)生反復(fù)感染、嚴重感染，難以治愈。T細胞缺陷易發(fā)生病毒真菌和寄生蟲感染。余缺陷病易發(fā)生細菌感染，尤以化膿感染為主。②易發(fā)生惡性腫瘤和并發(fā)自身免疫病。③臨床表現(xiàn)和病理損傷有明顯的多樣性，癥狀各異，復(fù)雜多樣，主要是累及多系統(tǒng)和多器官所致。簡述IDD的常見發(fā)病原因？①遺傳基因異常，常表現(xiàn)為X 連鎖隱性遺傳和常染色體隱性遺傳，顯性遺傳亦有，少見。②中樞免疫器官發(fā)育障礙，由遺傳或其他原因所致。③免疫細胞內(nèi)在酶的缺陷，如ADA、PNP、G6PD 缺乏所致。④免疫細胞間調(diào)控機制異常，輔助不足或抑制過剩均可導(dǎo)致免疫缺陷。簡述原發(fā)性B細胞缺陷病的主要免疫學(xué)和臨床特征？.本組疾病有三種主要免疫學(xué)和臨床特征：①全部Ig 缺失或極度降低，如Bruton 綜合征。②部分Ig缺失，如選擇性Ig缺陷。③Ig量正常，但在抗原刺激后無免疫應(yīng)答，功能缺陷。敘述AIDS三大標(biāo)志的主要免疫學(xué)檢測？AIDS 檢測主要是病毒標(biāo)志、免疫標(biāo)志和相關(guān)標(biāo)志三大類。病毒標(biāo)志主要是直接分離培養(yǎng)檢測病毒或檢出HIV 組分，P2gp120 和gp160 的免疫印跡檢測；免疫標(biāo)志主要是檢測HIV的抗原或抗體及T細胞，HIV抗體用ELISA測定為初篩試驗，確認試驗用免疫印跡法，亦可用PCR法。我國判定標(biāo)準(zhǔn)為：①HIV抗體陽性：至少有兩條膜（gp41/gp120/gp160）或至少有一條膜帶與P24 帶同時測定；②HIV 抗體陰性：無HIV 抗體特異性條帶出現(xiàn)；③HIV 抗體可疑：出現(xiàn)特異性抗體帶，但帶型不足以確認陽性者，T 細胞檢測減少，常＜109/L。CD4+T細胞絕對值下降至（2~4）109/L，CD4/CD8比值＜1，還有Ig、免疫復(fù)合物等測定；④相關(guān)標(biāo)志是指與HIV感染、AIDS病情有關(guān)的檢測，如有關(guān)微生物檢測、白細胞、ESR等。敘述AIDS的主要發(fā)病機制？AIDS 的主要發(fā)病機制：HIV 感染后，主要是損傷CD4+T 細胞減少和功能缺陷而導(dǎo)致機體細胞免疫功能繼而體液免疫功能全面障礙為其主要的發(fā)病機制。同時還損傷巨噬細胞、樹突狀細胞、B細胞和腦組織小膠質(zhì)細胞，導(dǎo)致相應(yīng)的功能障礙。HIV損傷T細胞是通過HIV外膜蛋白gp120 和gp41 與T細胞發(fā)生拈附、溶解、使病毒核心進入靶細胞，在靶細胞內(nèi)進行復(fù)制，繁殖，最后以芽生方式破壞細胞膜而移出，進行感染擴散，從而破壞CD4+T細胞，導(dǎo)致免疫缺陷。論述流式細胞術(shù)在免疫學(xué)中的應(yīng)用。何謂重鏈?。恐劓湶∈怯捎跐{細胞發(fā)生突變和異常增生，致使血清和尿中出現(xiàn)大量游離的無免疫功能的免疫球蛋白重鏈所導(dǎo)致的疾病。何謂輕鏈??？輕鏈病是突變的單克隆漿細胞產(chǎn)生的大量輕鏈，血漿中輕鏈含量異常增加，增加的輕鏈從腎臟排泄，血和尿中可查及大量的輕鏈蛋白。何謂免疫球蛋白異常增生性疾??？免疫球蛋白異常增生性疾病是指由于漿細胞的異常增殖而導(dǎo)致的免疫球蛋白異常增生造成機體病理損傷的一組疾病。何謂漿細胞異常增殖？漿細胞異常增殖通常是指單克隆漿細胞異常增生并伴有單克隆免疫球蛋白或其多肽鏈亞單位合成異常。何謂ANA，簡述熒光免疫組化法(間接法)檢測血清總ANA的原理。ANA即抗核抗體 ，指各種成分的抗體，是一種廣泛存在的自身抗體，可與不同的細胞核反應(yīng)，無器官特異性和種屬特異性 間接法檢測ANA原理：用小鼠肝切片或印片或HEP2細胞作為細胞核基質(zhì)抗原，加待測血清，若含有ANA，則與細胞核基質(zhì)抗原反應(yīng)，再加熒光素標(biāo)記的抗抗體(二抗)，結(jié)合一抗，在熒光顯微鏡下見到細胞核有熒光著色為陽性反應(yīng)。 ANA有哪些種類，它們在SLE診斷中的價值如何？答：抗核抗體是一種廣泛存在的自身抗體，主要包括，抗DNP抗體，抗DNA抗體， 抗ENA抗體，抗組蛋白抗體。約99%（86%～100%）的活動期SLE病人ANA陽性，ANA陰性幾乎可除外SLE的診斷。你知道哪些自身抗體，臨床應(yīng)用價值如何？答：1）ANA：在未經(jīng)治療的SLE患者中陽性率可達90%以上，其他自身免疫病也可陽性?？勺鳛樽陨砻庖卟。绕涫荢LE的篩選指標(biāo)。2）抗Sm抗體：SLE的特征性標(biāo)志抗體，是SLE重要診斷指標(biāo)。3）抗dsDNA抗體： SLE的特征性標(biāo)志抗體，是SLE重要診斷指試述自身免疫病的防治原則。答：自身免疫病的防治原則大致為：（1）預(yù)防和控制病原體的感染，避免因自身組織細胞的抗原性發(fā)生改變和交叉抗原誘發(fā)的免疫應(yīng)答，同時也避免感染引起的抗原提呈細胞和T細胞的激活。（2）使用免疫抑制劑如環(huán)孢霉素A、FK50皮質(zhì)激素、中藥雷公藤治療主要以抗體引起的自身免疫病，用Th2因子治療主要以T細胞引起的身身免疫病。（3）特異性抗體治療，如用抗CD3單抗，抗炎癥性細胞因子單抗等。（4）疫苗激發(fā)免疫耐受。如口服II型膠原等自身預(yù)防和治療類風(fēng)溫關(guān)節(jié)炎等試述系統(tǒng)性紅斑狼瘡，自身抗體的檢測。答：疾病診斷相關(guān)的主要自身抗體:1．抗核抗體2．抗DNA抗體3．抗磷脂抗體和抗血小板抗體4．抗紅細胞抗體5．RF 6．抗細胞質(zhì)抗體自身免疫病的共同特征。；；，并隨年齡增加發(fā)病率有所增加；；；，多遷延為慢性；，漿