【文章內(nèi)容簡介】 )基本原理：抗原或抗體預(yù)先結(jié)合到某種固相載體表面；測定時，將受檢樣品(含待測抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按一定程序與結(jié)合在固相載體上的抗原或抗體起反應(yīng)形成抗原或抗體復(fù)合物；反應(yīng)終止時，固相載體上酶標(biāo)抗原或抗體被結(jié)合量(免疫復(fù)合物)即與標(biāo)本中待檢抗體或抗原的量成一定比例；經(jīng)洗滌去除反應(yīng)液中其他物質(zhì)，加入底物進(jìn)行顯色，最后通過定性或定量分析有色產(chǎn)物量即可確定樣品中待測物質(zhì)含量。(2)方法類型及應(yīng)用：①雙抗體夾心法：用于檢測抗原，適用于檢測兩個或兩個以上抗原決定基的多價抗原；②間接法：用于檢測抗體；③競爭法：用于抗原和半抗原的定量測定，也可對抗體進(jìn)行測定；④捕獲法：用于血清中某種抗體亞型成分(如IgM)的測定。簡述酶增強(qiáng)免疫測定技術(shù)的原理。DA具抗原及酶活性的AgE與Ab結(jié)合形成AgAb后，所標(biāo)的酶(E)因與Ab接觸緊密，空間位阻影響了酶的活性中心，酶活性受到抑制。加入未標(biāo)記抗原(標(biāo)準(zhǔn)或樣品中的Ag)后，Ag即與Ab叫競爭結(jié)合反應(yīng)系統(tǒng)中限量的Ab形成AgAb復(fù)合物，從而使反應(yīng)液中AgAb*(酶活性被抑制)的比例減少，具酶活性的游離AgE增多。最終測得的酶活性隨著反應(yīng)體系中未標(biāo)記抗原(Ag)濃度升高而增強(qiáng)。簡述免疫印跡法的原理。免疫印跡法由SDSPAGE、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印和酶免疫測定三項(xiàng)技術(shù)結(jié)合而成?？乖鹊鞍讟悠方?jīng)SDS處理后帶負(fù)電荷，SDSPAGE時從陰極向陽極泳動，分子量小者，泳動速度快；將凝膠中已經(jīng)分離的蛋白質(zhì)條帶在電場作用下轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜上；將印有蛋白質(zhì)條帶的硝酸纖維素膜依次與特異性抗體和酶標(biāo)第二抗體作用，加入能形成不溶性顯色物的酶反應(yīng)底物，使區(qū)帶染色；根據(jù)電泳時加入的分子量標(biāo)準(zhǔn)，可確定各組分的分子量。何謂金免疫測定技術(shù)?簡述其技術(shù)類型及原理。DA金免疫測定技術(shù)是指用膠體金顆粒作為標(biāo)記物進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)的一類免疫學(xué)測定技術(shù)，其主要技術(shù)類型有斑點(diǎn)金免疫滲濾試驗(yàn)和斑點(diǎn)金免疫層析試驗(yàn)。1)斑點(diǎn)金免疫滲濾試驗(yàn)：在以硝酸纖維素膜為載體并包被了抗原或抗體的滲濾裝置中，依次滴加標(biāo)本、免疫金及洗滌液，因微孔濾膜貼置于吸水材料上，故溶液流經(jīng)滲濾裝置時與膜上的抗原或抗體快速結(jié)合并起到濃縮作用，達(dá)到快速檢測目的，陽性反應(yīng)在膜上呈現(xiàn)紅色斑點(diǎn)。2)斑點(diǎn)金免疫層析試驗(yàn)：是將膠體金標(biāo)記技術(shù)和蛋白質(zhì)層析技術(shù)相合的以硝酸纖維素膜為載體的固相膜免疫分析技術(shù)，滴加在膜一端的標(biāo)本溶液受載體膜的毛細(xì)管作用向另一端移動，猶如層析一般，在移動過程中被分析物與固定于載體膜上某一區(qū)域的抗體或抗原結(jié)合而被固相化，無關(guān)物則越過該區(qū)域而被分離，然后通過膠體金的呈色條帶來判讀實(shí)驗(yàn)結(jié)果。免疫溶血試驗(yàn)的原理和用途。DA原理是補(bǔ)體能使已被抗體致敏了的紅細(xì)胞發(fā)生溶血。免疫溶血試驗(yàn)所參與的成分有補(bǔ)體，抗原(SRBC)及抗體(溶血素)，這三種成分中如有兩種是已知的就可測知第三個成分，稀釋該成分可測定其效價或含量。如溶血素的滴定，溶血空斑試驗(yàn)，CH50試驗(yàn)，補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)，抗補(bǔ)體試驗(yàn)等。如何進(jìn)行補(bǔ)體單個成分的測定? DA補(bǔ)體單個成分可測其溶血活性或含量。測定溶血活性應(yīng)先制備缺乏該補(bǔ)體單個成分的“補(bǔ)體試劑。而后利用免疫溶血試驗(yàn)的原理，將致敏紅細(xì)胞與“補(bǔ)體試劑”混合，再加入待測血清，孵育后，溶血程度與待測血清中的該補(bǔ)體成分的溶血功能有關(guān)。測定含量可用已知抗體以單向瓊脂擴(kuò)散等方法進(jìn)行。血清免疫球蛋白測定方法有那些？答：單向免疫擴(kuò)散法：原理，優(yōu)點(diǎn)：簡單，條件要求低，但抗體需要高效價高特異性，靈敏度： mg/ml 免疫比濁法:原理，優(yōu)點(diǎn)：檢測結(jié)果準(zhǔn)確，精密度高，耗時短，靈敏度高ug/ml免疫球蛋白IgG、IgA、IgM測定有何意義？答：IgG、IgA、IgM均升高則慢性疾病， IgG升高則多為細(xì)菌感染導(dǎo)致，新生兒血清IgM升高則常為 宮內(nèi)感染。單一Ig顯著升高則多為免疫增殖病：多發(fā)性骨髓瘤，重鏈病、惡性淋巴瘤。Ig降低則體液免疫缺陷或聯(lián)合免疫缺陷。某患者臨床疑為細(xì)胞免疫功能缺陷，應(yīng)做哪些檢查以協(xié)助診斷？答：從以下幾個方面檢測1)皮膚試驗(yàn) ，顯示有遲發(fā)超敏反應(yīng)能力，表示受試驗(yàn)者細(xì)胞免疫功能完善2)T細(xì)胞及其亞群檢測，常采用熒光抗體檢測T細(xì)胞表面標(biāo)志分子CD3，CD4等3)T細(xì)胞功能檢測，利用PHA刺激淋巴細(xì)胞增殖，轉(zhuǎn)化來判斷T細(xì)胞的功能簡述原發(fā)性吞噬細(xì)胞缺陷病的發(fā)病機(jī)制主要包括哪幾種？主要包括：①吞噬細(xì)胞趨化和（或）粘附功能障礙。②吞噬和殺菌功能障礙。③單核吞噬細(xì)胞的特殊異常，如IgG Fc受體缺陷。簡述AIDS的主要免疫學(xué)特征？①免疫系統(tǒng)的CD4T淋巴細(xì)胞受HIV感染，使CD4T細(xì)胞受損而減少。②單核巨噬細(xì)胞、濾泡樹突狀細(xì)胞和朗格漢斯細(xì)胞亦可受HIV 感染而受損。③進(jìn)行性細(xì)胞免疫缺陷，繼而體液免疫缺陷。④B淋巴細(xì)胞可克隆激活伴免疫球蛋白增多。簡述體液免疫缺陷的檢測方法？有①血清Ig 的測定，常用免疫擴(kuò)散法和免疫比濁法。②分泌型IgA 的測定，用單向免疫擴(kuò)散或ELISA 等。③同種血細(xì)胞凝集素測定。④特異性抗體產(chǎn)生能力測定，疫苗接種后抗體產(chǎn)生的測定。⑤抗IgA抗體的測定，測自身抗體。⑥SmIg測定，檢測B細(xì)胞數(shù)量和其成熟程簡述細(xì)胞免疫缺陷的檢測方法？有①遲發(fā)性皮膚過敏反應(yīng)試驗(yàn)，常為初篩試驗(yàn)。②T細(xì)胞及其亞群的檢測，為主要的試驗(yàn)測定CDCDCD8 分化抗原進(jìn)行分類鑒定。③E 玫瑰花結(jié)試驗(yàn)，現(xiàn)常用CD2 測定所代替。④淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)試驗(yàn)，為體外免疫功能試驗(yàn)，方法有形態(tài)法和同位素法。⑤T細(xì)胞分泌產(chǎn)物功能測定，測定激活的T細(xì)胞和單個核細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子。簡述IDD的共同臨床特點(diǎn)？.①對病原體的易感性強(qiáng)、常發(fā)生反復(fù)感染、嚴(yán)重感染，難以治愈。T細(xì)胞缺陷易發(fā)生病毒真菌和寄生蟲感染。余缺陷病易發(fā)生細(xì)菌感染，尤以化膿感染為主。②易發(fā)生惡性腫瘤和并發(fā)自身免疫病。③臨床表現(xiàn)和病理損傷有明顯的多樣性，癥狀各異，復(fù)雜多樣，主要是累及多系統(tǒng)和多器官所致。簡述IDD的常見發(fā)病原因？①遺傳基因異常，常表現(xiàn)為X 連鎖隱性遺傳和常染色體隱性遺傳，顯性遺傳亦有，少見。②中樞免疫器官發(fā)育障礙，由遺傳或其他原因所致。③免疫細(xì)胞內(nèi)在酶的缺陷，如ADA、PNP、G6PD 缺乏所致。④免疫細(xì)胞間調(diào)控機(jī)制異常，輔助不足或抑制過剩均可導(dǎo)致免疫缺陷。簡述原發(fā)性B細(xì)胞缺陷病的主要免疫學(xué)和臨床特征？.本組疾病有三種主要免疫學(xué)和臨床特征：①全部Ig 缺失或極度降低，如Bruton 綜合征。②部分Ig缺失，如選擇性Ig缺陷。③Ig量正常，但在抗原刺激后無免疫應(yīng)答，功能缺陷。敘述AIDS三大標(biāo)志的主要免疫學(xué)檢測？AIDS 檢測主要是病毒標(biāo)志、免疫標(biāo)志和相關(guān)標(biāo)志三大類。病毒標(biāo)志主要是直接分離培養(yǎng)檢測病毒或檢出HIV 組分，P2gp120 和gp160 的免疫印跡檢測；免疫標(biāo)志主要是檢測HIV的抗原或抗體及T細(xì)胞，HIV抗體用ELISA測定為初篩試驗(yàn)，確認(rèn)試驗(yàn)用免疫印跡法，亦可用PCR法。我國判定標(biāo)準(zhǔn)為：①HIV抗體陽性：至少有兩條膜（gp41/gp120/gp160）或至少有一條膜帶與P24 帶同時測定；②HIV 抗體陰性：無HIV 抗體特異性條帶出現(xiàn)；③HIV 抗體可疑：出現(xiàn)特異性抗體帶，但帶型不足以確認(rèn)陽性者，T 細(xì)胞檢測減少，常＜109/L。CD4+T細(xì)胞絕對值下降至（2~4）109/L，CD4/CD8比值＜1，還有Ig、免疫復(fù)合物等測定；④相關(guān)標(biāo)志是指與HIV感染、AIDS病情有關(guān)的檢測，如有關(guān)微生物檢測、白細(xì)胞、ESR等。敘述AIDS的主要發(fā)病機(jī)制？AIDS 的主要發(fā)病機(jī)制：HIV 感染后，主要是損傷CD4+T 細(xì)胞減少和功能缺陷而導(dǎo)致機(jī)體細(xì)胞免疫功能繼而體液免疫功能全面障礙為其主要的發(fā)病機(jī)制。同時還損傷巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、B細(xì)胞和腦組織小膠質(zhì)細(xì)胞，導(dǎo)致相應(yīng)的功能障礙。HIV損傷T細(xì)胞是通過HIV外膜蛋白gp120 和gp41 與T細(xì)胞發(fā)生拈附、溶解、使病毒核心進(jìn)入靶細(xì)胞，在靶細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行復(fù)制，繁殖，最后以芽生方式破壞細(xì)胞膜而移出，進(jìn)行感染擴(kuò)散，從而破壞CD4+T細(xì)胞，導(dǎo)致免疫缺陷。論述流式細(xì)胞術(shù)在免疫學(xué)中的應(yīng)用。何謂重鏈?。恐劓湶∈怯捎跐{細(xì)胞發(fā)生突變和異常增生，致使血清和尿中出現(xiàn)大量游離的無免疫功能的免疫球蛋白重鏈所導(dǎo)致的疾病。何謂輕鏈??？輕鏈病是突變的單克隆漿細(xì)胞產(chǎn)生的大量輕鏈，血漿中輕鏈含量異常增加，增加的輕鏈從腎臟排泄，血和尿中可查及大量的輕鏈蛋白。何謂免疫球蛋白異常增生性疾病？免疫球蛋白異常增生性疾病是指由于漿細(xì)胞的異常增殖而導(dǎo)致的免疫球蛋白異常增生造成機(jī)體病理損傷的一組疾病。何謂漿細(xì)胞異常增殖？漿細(xì)胞異常增殖通常是指單克隆漿細(xì)胞異常增生并伴有單克隆免疫球蛋白或其多肽鏈亞單位合成異常。何謂ANA，簡述熒光免疫組化法(間接法)檢測血清總ANA的原理。ANA即抗核抗體 ，指各種成分的抗體，是一種廣泛存在的自身抗體，可與不同的細(xì)胞核反應(yīng)，無器官特異性和種屬特異性 間接法檢測ANA原理：用小鼠肝切片或印片或HEP2細(xì)胞作為細(xì)胞核基質(zhì)抗原，加待測血清，若含有ANA，則與細(xì)胞核基質(zhì)抗原反應(yīng)，再加熒光素標(biāo)記的抗抗體(二抗)，結(jié)合一抗，在熒光顯微鏡下見到細(xì)胞核有熒光著色為陽性反應(yīng)。 ANA有哪些種類，它們在SLE診斷中的價值如何？答：抗核抗體是一種廣泛存在的自身抗體，主要包括，抗DNP抗體，抗DNA抗體， 抗ENA抗體，抗組蛋白抗體。約99%（86%～100%）的活動期SLE病人ANA陽性，ANA陰性幾乎可除外SLE的診斷。你知道哪些自身抗體，臨床應(yīng)用價值如何？答：1）ANA：在未經(jīng)治療的SLE患者中陽性率可達(dá)90%以上，其他自身免疫病也可陽性?？勺鳛樽陨砻庖卟。绕涫荢LE的篩選指標(biāo)。2）抗Sm抗體：SLE的特征性標(biāo)志抗體，是SLE重要診斷指標(biāo)。3）抗dsDNA抗體： SLE的特征性標(biāo)志抗體，是SLE重要診斷指試述自身免疫病的防治原則。答：自身免疫病的防治原則大致為：（1）預(yù)防和控制病原體的感染，避免因自身組織細(xì)胞的抗原性發(fā)生改變和交叉抗原誘發(fā)的免疫應(yīng)答，同時也避免感染引起的抗原提呈細(xì)胞和T細(xì)胞的激活。（2）使用免疫抑制劑如環(huán)孢霉素A、FK50皮質(zhì)激素、中藥雷公藤治療主要以抗體引起的自身免疫病，用Th2因子治療主要以T細(xì)胞引起的身身免疫病。（3）特異性抗體治療，如用抗CD3單抗，抗炎癥性細(xì)胞因子單抗等。（4）疫苗激發(fā)免疫耐受。如口服II型膠原等自身預(yù)防和治療類風(fēng)溫關(guān)節(jié)炎等試述系統(tǒng)性紅斑狼瘡，自身抗體的檢測。答：疾病診斷相關(guān)的主要自身抗體:1．抗核抗體2．抗DNA抗體3．抗磷脂抗體和抗血小板抗體4．抗紅細(xì)胞抗體5．RF 6．抗細(xì)胞質(zhì)抗體自身免疫病的共同特征。；；，并隨年齡增加發(fā)病率有所增加；；；，多遷延為慢性；，漿