維生素的測定(編輯修改稿)
2024-08-28 13:46 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 苯，先采用反相 C18柱分取維生素 D，除去大部分雜質(zhì)。進(jìn)一步采用正相色譜分離，紫外檢測定量。 ? 反相色譜條件 色譜柱： Nucleosil C18,*300mm 流動(dòng)相：乙腈＋甲醇（ 1＋ 1） 流速： mL/min 紫外檢測波長： 254nm ? 正相色譜條件 色譜柱：正相柱 Zorbax SIL,*250mm 流動(dòng)相： %異丙酮的己烷溶液 流速： mL/min 紫外檢測波長： 254nm 注意事項(xiàng) ? VD2 與 VD3分不開 ? 皂化時(shí)加入焦性沒食子酸作為抗氧化劑 ? 標(biāo)樣與試樣在同樣條件下皂化，消除了 VD的熱 異化性損失。 ? 也可用硅藻土及皂土柱層析，除去甾醇、 VA、胡蘿卜素的干擾。 第三節(jié) 水溶性維生素的測定 水溶性維生素 B B2和 C，廣泛存在于動(dòng)植物組織中，飲食來源充足。但是由于它們本身的水溶性質(zhì)，除滿足人體生理、生化作用外，任何多余量都會從小便中排出。為避免耗盡，需要經(jīng)常由飲食來提供。 水溶性維生素都易溶于水，而不溶于苯、乙醚、氯仿等大多數(shù)有機(jī)溶劑。在酸性介質(zhì)中很穩(wěn)定，既使加熱也不破壞；但在堿性介質(zhì)中不穩(wěn)定，易于分解，特別在堿性條件下加熱，可大部分或全部破壞。它們易受空氣、光、熱、酶、金屬離子等的影響； 維生素 B2對光，特別是紫外線敏感，易被光 線破壞；維生素 C對氧、銅離子敏感，易被氧化。 三、維生素 C的測定 維生素 C是一種己糖醛基酸，有抗壞血病的作用，所以又稱作抗壞血酸。維生素 C廣泛存在于植物組織中，新鮮的水果、蔬菜，特別是棗、辣椒、苦瓜、柿子葉、獼猴桃、柑桔等食品中含量尤豐富。 維生素 C具有較強(qiáng)的還原性，對光敏感，氧化后的產(chǎn)物稱為脫氫抗壞血酸，仍然具有生理活性。進(jìn)一步水解則生成 2， 3 二酮古樂糖酸，失去生理作用。 根據(jù)它具有的還原性質(zhì)可以測定維生素 C的含量。常用的測定方法有 （ 1） 2， 6二氯靛酚法 （還原型 VC） （ 2） 2， 4二硝基苯肼法 （總 VC） （ 3）碘酸法 （ 4）碘量法 （ 5）熒光分光光度法 (一 ) 2， 6— 二氯靛酚滴定法 1．原理 還原型抗壞血酸可以還原染料 2， 6二氯靛酚。該染料在酸性溶液中呈粉紅色 (在中性或堿性溶液中呈藍(lán)色 )，被還原后顏色消失。 還原型抗壞血酸還原染料后，本身被氧化成脫氫抗壞血酸。在沒有雜質(zhì)干擾時(shí)，一定量的樣品提取液還原標(biāo)準(zhǔn)染料液的量，與樣品中抗壞血酸含量成正比。 試劑 ⑴ 1%草酸溶液：稱取 10g草酸，加水至 1000mL； ⑵ 2%草酸溶液：稱 20g草酸，加水至 1000mL； ⑶ 維生素 C標(biāo)準(zhǔn)液：準(zhǔn)確稱 20mgVC溶于 1%草酸中，并稀釋至 100mL，吸 5mL于 50mL容量瓶中，加入 1%草酸至刻度，此溶液每毫升含有 ； ⑷ % 2， 6二氯靛酚溶液：稱取 2， 6二氯靛酚50mg，溶于 200mL含有 52mg碳酸氫鈉的熱水中，冷卻后，稀釋至 250mL，過濾于棕色瓶中，貯存于冰箱內(nèi)，應(yīng)用過程中每星期標(biāo)定一次。 標(biāo)定一 吸標(biāo)液（ VC） 5mL于三角瓶 → 加 6%KI溶液 → 加 1% 淀粉 3滴 → 用 KIO3標(biāo)液滴定到淡蘭色。 計(jì)算： 抗壞血酸濃度（ mg/mL） =（ V1 ） /V2 V1 滴定時(shí)消耗 KIO3標(biāo)液的體積（ mL） V2 維生素 C重量（ g） 1mL KIO3標(biāo)液 ≈ 維生素 C的量（ mg/mL） 標(biāo)定二 吸 5mL已知濃度 V C標(biāo)液 → 加 5mL1%草酸 → 用染料 2，6二氯靛酚滴定至溶液呈粉紅色，在 15秒不褪色為終點(diǎn) 計(jì)算：每毫升 2， 6二氯靛酚相當(dāng)于維生素 C的毫克數(shù)等于滴定度（ T） T= （ C V1） / V2 C 維生素 C的濃度（ mg/mL） V1 維生素 C的體積（ mL） V2 消耗 2， 6二氯靛酚的體積（ mL） 樣品測定 提取：稱樣 50g→ 加 2%草酸 100mL→ 入搗碎機(jī)中處理 → 過濾 → 顏色若深可加白陶土 滴定：吸 5mL樣液 → 于三角瓶 → 用染料滴定至粉紅色 → 15秒內(nèi)不褪色 計(jì)算： VC（ mg/100g） =（ V T） / W 100 V 消耗染料體積（ mL） T 1mL染料所能氧化維生素 C的毫克數(shù) W 滴定時(shí)所有濾液中含有樣品的克數(shù) 注意事項(xiàng) ⑴ 所有試劑的配制最好都用重蒸餾水； ⑵ 滴定時(shí)，可同時(shí)吸二個(gè)樣品。一個(gè)滴定，另一個(gè)作為觀察顏色變化的參考； ⑶ 樣品進(jìn)
范文總結(jié)相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1