維生素的測(cè)定-wenkub
2022-08-29 13:46:41 本頁面
【正文】 生素 A的測(cè)定 維生素 A存在于動(dòng)物性脂肪中，主要來源于肝臟、魚干油、蛋類、乳類等動(dòng)物性食品中。 脂溶性維生素具有以下理化性質(zhì)： 1．溶解性：脂溶性維生素不溶于水，易溶于脂肪、乙醇、丙酮、氯仿、乙醚、苯等有機(jī)溶劑。其種類很多，目前已確認(rèn)的有 30余種，其中被認(rèn)為對(duì)維持人體健康和促進(jìn)發(fā)育至關(guān)重要的有 20余種。這些維生素結(jié)構(gòu)復(fù)雜，理化性質(zhì)及生理功能各異，有的屬于醇類，有的屬于胺類，有的屬于酯類，還有的屬于酚或醌類化臺(tái)物。 2．耐酸堿性：維生素 A、 D對(duì)酸不穩(wěn)定， 對(duì)堿穩(wěn)定，維生素 E對(duì)堿不穩(wěn)定，但在抗氧化劑存在下或惰性氣體保護(hù)下，也能經(jīng)受堿的煮沸。植物性食品中不含 VA，但在深色果蔬中含有胡蘿卜素，它在人體內(nèi)可轉(zhuǎn)變?yōu)?VA，故稱為 VA原。 分析步驟 皂化 → 提取 → 洗滌 → 萃取 → 濃縮 → 溶解 → 離心 → 測(cè)定 → 結(jié)果計(jì)算 樣品前處理 1） 皂化 稱取 1－ 10g樣品（含維生素 A約 3μ g)于皂化瓶中，加 30mL無水乙醇，進(jìn)行攪拌， 直到顆粒物分散均勻?yàn)橹?。皂化后立即于水中冷卻。 輕輕振搖分液漏斗 2min， 靜置分層，棄去水層。加入 ，充分混合，溶解提取物。標(biāo)準(zhǔn)濃度的標(biāo)定方法 取維生素 A和維生素E標(biāo)準(zhǔn)液若干微升，分別稀釋至 ，并分別按給定波長(zhǎng)測(cè)定各維生素的吸光值。 （ 2）在皂化過程中，應(yīng)每 5分鐘搖一下皂化瓶，使樣品皂化完全。 （ 6）在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)時(shí)乙醚溶液不應(yīng)蒸干，以免被測(cè)樣品含量損失。 胡蘿卜素是一種廣泛存在于有色蔬菜和水果中的天然色素，有多種異構(gòu)體和衍生物，總稱為類胡蘿卜素，其中在分子結(jié)構(gòu)中含有 β 一紫羅寧殘基的類胡蘿卜素，在人體內(nèi)可轉(zhuǎn)變?yōu)榫S生素 A，故稱為維生素 A原。因系脂镕性維生素，故可用有機(jī)溶劑從食物中提取。 ? 凈化用層析介質(zhì)采用氧化鎂、氧化鋁 ? 避光 洗脫液 樣品 填充物 分部收集 玻璃柱 四、維生素 D的測(cè)定 維生素 D為 固醇 類衍生物，具抗 佝僂病 作用，其中最重要的是 D2和 D3。 維生素 D2 藥片吃多了中毒。 ? 食品中維生素 D含量較低，其他維生素嚴(yán)重干擾其測(cè)定，因此測(cè)定前必須經(jīng)柱層析除去干擾成分。進(jìn)一步采用正相色譜分離，紫外檢測(cè)定量。但是由于它們本身的水溶性質(zhì)，除滿足人體生理、生化作用外，任何多余量都會(huì)從小便中排出。它們易受空氣、光、熱、酶、金屬離子等的影響； 維生素 B2對(duì)光，特別是紫外線敏感，易被光 線破壞；維生素 C對(duì)氧、銅離子敏感，易被氧化。進(jìn)一步水解則生成 2， 3 二酮古樂糖酸，失去生理作用。 還原型抗壞血酸還原染料后，本身被氧化成脫氫抗壞血酸。 計(jì)算： 抗壞血酸濃度（ mg/mL） =（ V1 ） /V2 V1 滴定時(shí)消耗 KIO3標(biāo)液的體積（ mL） V2 維生素 C重量（ g） 1mL KIO3標(biāo)液 ≈ 維生素 C的量（ mg/mL） 標(biāo)定二 吸 5mL已知濃度 V C標(biāo)液 → 加 5mL1%草酸 → 用染料 2，6二氯靛酚滴定至溶液呈粉紅色，在 15秒不褪色為終點(diǎn) 計(jì)算：每毫升 2， 6二氯靛酚相當(dāng)于維生素 C的毫克數(shù)等于滴定度（ T） T= （ C V1） / V2 C 維生素 C的濃度（ mg/mL） V1 維生素 C的體積（ mL） V2 消耗 2， 6二氯靛酚的體積（ mL） 樣品測(cè)定 提取：稱樣 50g→ 加 2%草酸 100mL→ 入搗碎機(jī)中處理 → 過濾 → 顏色若深可加白陶土 滴定：吸 5mL樣液 → 于三角瓶 → 用染料滴定至粉紅色 → 15秒內(nèi)不褪色 計(jì)算： VC（ mg/100g） =（ V T） / W 100 V 消耗染料體積（ mL） T 1mL染料所能氧化維生素 C的毫克數(shù) W 滴定時(shí)所有濾液中含有樣品的克數(shù) 注意事項(xiàng) ⑴ 所有試劑的配制最好都用重蒸餾水； ⑵ 滴定時(shí)，可同時(shí)吸二個(gè)樣品。此法是將樣品的還原型抗壞血酸氧化為脫氫型抗壞血酸，然后與 2， 4二硝基苯肼作用，生成紅色的脎。碘分子可以使含指示劑（淀粉）的溶液產(chǎn)生藍(lán)色，即為滴定終點(diǎn)。 一、維生素 Bl的測(cè)定 維生素 Bl又名硫胺素、抗神經(jīng)炎素，通常以游離態(tài)，或以焦磷酸酯形式存在于自然界。從而測(cè)定其含量。 4） 冷至室溫，定容至 100mL，然后 混勻過濾 ，即為提取液。如此 重復(fù)三次。 2) 在避光暗環(huán)境中將 3mL 15% 氫氧化鈉加入反應(yīng)瓶 A，振搖約 15s，然后加入 10mL正丁醇；將 3mL堿性鐵氰化鉀溶液加入反應(yīng)瓶 B, 振搖約 15s，然后加入 10mL正丁醇；將
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