臨床輸血檢測操作規(guī)程doc(編輯修改稿)
2024-08-13 15:07 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 受檢者為A型血而疑為有類B抗原時，可用下列方法進(jìn)行鑒別： 觀察細(xì)胞與抗—A及抗—B的凝集強(qiáng)度，與抗—A的反應(yīng)要比與抗 36—B的反應(yīng)強(qiáng)。這種區(qū)別用玻片法作試驗更為明顯。 用受檢者紅細(xì)胞與自身血清作試驗，血清中的抗—B不凝集自身紅細(xì)胞上的類B抗原。 檢查唾液中是否有A、B物質(zhì)，如果是分泌型，可檢出A物質(zhì)而無B物質(zhì)。 核對患者的診斷，類B抗原的形成與結(jié)腸癌、直腸癌、革蘭陰性桿菌感染有關(guān)。 如發(fā)現(xiàn)多凝集現(xiàn)象，應(yīng)考慮由遺傳產(chǎn)生的Cad抗原活性；被細(xì)菌酶激活的T或TK受體；或產(chǎn)生機(jī)制不太明了的Tn受體所引起。多凝集紅細(xì)胞具有以下特點(diǎn)： 能被人和許多家兔的血清凝集。 能與大多數(shù)成年人的血清凝集，不管有無相應(yīng)的同種抗體。 不被臍帶血清凝集。 通常不與自身的血清凝集。 臨床意義 用于檢驗人的ABO血型歸屬。 參考文獻(xiàn) 全國臨床檢驗操作規(guī)程（第3版） 編制人/修改人： 校核人： 審核人： 批準(zhǔn)人：批準(zhǔn)日期： 年 月 日 實施日期： 年 月 日文件類型：作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號：JCXRMYY JY0152009文件名稱：臨床輸血檢測操作規(guī)程 第01版第0次修改 第6頁共12頁 Rh（D）血型鑒定 實驗原理 紅細(xì)胞與抗D抗體發(fā)生凝集反應(yīng)表明該細(xì)胞有D抗原，反之，無凝集現(xiàn)象表明試驗的紅細(xì)胞缺少正常強(qiáng)度的D抗原。 標(biāo)本收集和制備 無菌操作收集血液標(biāo)本,收集后盡可能立即進(jìn)行實驗。如果不能立即實驗,應(yīng)將樣品貯存于 28C。收集在 ACD、CPD、CPD－2A 液中的血液標(biāo)本,不超過 21天仍可進(jìn)行實驗，但是加EDTA、肝素和凝集的血液標(biāo)本，實驗應(yīng)在2天內(nèi)進(jìn)行。 儀器、試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品、培養(yǎng)基、以及其他所需物品： Rh(IgM)血型定型試劑（單克隆抗體）：上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司，產(chǎn)品注冊號：國藥準(zhǔn)字 S20060018,包裝、規(guī)格：每盒內(nèi)裝有 1 支試劑，10ml/支，儲存要求：存放2—8℃，有效期內(nèi)使用。 操作步驟 玻片法： 干凈玻片上加1滴抗D。 再加入1滴40%50%的被檢紅細(xì)胞懸液。該紅細(xì)胞懸液可以是鹽水懸液， 37也可以是懸浮于自身血漿或血清中的紅細(xì)胞。 在圓形的玻片區(qū)域中混勻，前后緩慢搖晃玻片。2分鐘左右肉眼判讀結(jié)果。不要將試劑的干燥與凝集相混淆。 如果是陰性，需要試管法重做一遍實驗。 鹽水試管法 加一滴抗D試劑于預(yù)先標(biāo)記好的試管中 再加1滴約3%—5%紅細(xì)胞生理鹽水懸液于試管中?；靹?。 離心，速度和時間可選擇以下二種之一： 轉(zhuǎn)速1000rpm，時間一分鐘1分鐘或3400rpm，時間15秒。 檢查是否溶血（溶血可能是陽性結(jié)果，或者是細(xì)菌污染），然后輕輕搖晃，是細(xì)胞再懸浮起來。 觀察凝集狀況，并立即記錄結(jié)果。必要時可借助顯微鏡。 若是陰性結(jié)果，需在37℃孵育15分鐘30分鐘，然后再離心觀察結(jié)果。結(jié)果若呈陰性需進(jìn)一步確認(rèn)是否是弱D。 編制人/修改人： 校核人： 審核人： 批準(zhǔn)人：批準(zhǔn)日期： 年 月 日 實施日期： 年 月 日文件類型：作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號：JCXRMYY JY0152009文件名稱：臨床輸血檢測操作規(guī)程 第01版第0次修改 第7頁共12頁 微量板法（U型板） 加一滴抗D試劑于U型底的微孔中。 再在微孔中一滴約 35%的被檢紅細(xì)胞懸液，細(xì)胞懸液需事先制備于生理鹽水中。 用機(jī)械的方法將U型板混勻。 用板式離心機(jī)離心：2000rpm,時間 30 秒。不同的離心機(jī)，不同的微量板所需要的離心條件有所區(qū)別，正確實驗的結(jié)果需要適當(dāng)?shù)碾x心，使反應(yīng)板產(chǎn)生清晰的細(xì)胞扣及透亮的上清液。 檢測溶血情況（溶血可能是陽性結(jié)果，或者是細(xì)菌污染）。 結(jié)果判斷：用機(jī)械震蕩U型板，再懸浮細(xì)胞，根據(jù)懸浮情況來判斷凝集。陽性反應(yīng)，出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集，而陰性反應(yīng)在微孔中會出現(xiàn)均勻細(xì)胞懸液。 可用肉眼和自動化判讀結(jié)果。 如果呈陰性，需要試管法重做一遍實驗。 參考值范圍 陽性反應(yīng)：出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集，為RhD陽性。 陰性反應(yīng)：紅細(xì)胞不出現(xiàn)凝集，為RhD陰性。 產(chǎn)品性能指標(biāo) 抗D（IgM）效價大于等于1：64（ccDeeO型） 方法的局限性 VI本實驗不能凝集CategoryD 細(xì)胞，對于陰性和弱陽性結(jié)果，按有關(guān)安全輸血規(guī)范進(jìn)行確認(rèn)實驗，必要時送血型參比實驗室進(jìn)行確認(rèn)。 注意事項 %W/V疊氮鈉，如果攝入會中毒。 試劑如出現(xiàn)混濁則不能使用，若開瓶使用時間較長后，最好用已知RhD陰性、RhD 陽性紅細(xì)胞檢查結(jié)果是否符合，以防制品污染、變質(zhì)失效，而造成錯誤。及時貼上開封時間標(biāo)簽，在效期內(nèi)使用。 由于人紅細(xì)胞的D抗原往往表現(xiàn)較弱，故必要時進(jìn)行顯微鏡鏡檢，以免錯判結(jié)果，特別是陰性結(jié)果時。 Rh血型鑒定應(yīng)嚴(yán)格控制溫
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