臨床輸血檢測操作規(guī)程doc-在線瀏覽
2024-08-27 15:07本頁面
【正文】 抗B和抗A十B，分別用滴管滴加抗A、抗B和抗A十B分型血清 l滴于標明的方格內(nèi)，再各加受檢者2％紅細胞懸液1滴，混和。 將玻片(或白瓷板)不斷輕輕轉(zhuǎn)動，使血清與細胞充分混勻，連續(xù)約 15 min，先以肉眼觀察有無凝集(或溶血)反應(yīng)；再在低倍鏡下觀察結(jié)果。 編制人/修改人： 校核人： 審核人： 批準人：批準日期： 年 月 日 實施日期： 年 月 日文件類型：作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號：JCXRMYY JY0152009文件名稱：臨床輸血檢測操作規(guī)程 第01版第0次修改 第3頁共12頁 注意事項： 分型血清必須為批批檢試劑，且在有效期內(nèi)使用；質(zhì)量性能符合要求。試劑開封后有效期為一周。或使用合格的商品診斷紅細胞。試劑開封后必須貼上開封日期、開封人標簽，用畢后應(yīng)放置冰箱保存，以免細菌污染。 生理鹽水啟用后，有效期為二周。 試管、滴管和玻片必須清潔干燥，防止溶血。 按理 IgM 抗A 和抗B 與相應(yīng)紅細胞的反應(yīng)溫度以 4℃為最強，但為了防止冷凝集現(xiàn)象的干擾，一般仍在室溫(20—24℃)內(nèi)進行試驗，37℃可使反應(yīng)減弱。 觀察時應(yīng)注意紅細胞呈特異性凝集、繼發(fā)性凝固以及緡錢狀排列的區(qū)別。 對于可能存在不完全抗原的時候，應(yīng)在各反應(yīng)方加入凝聚胺試劑，以檢驗不完全抗原的存在。 5%紅細胞懸液的配制：用生理鹽水洗滌紅細胞3次。如抗—A血清效價不高，可將A亞型誤定為O型，AB型誤定為B型。 受檢者紅細胞上抗原位點過少(如亞型)或抗原性減弱(見于白血病或惡性腫瘤：以及類B或cisAB等。 受檢者血清中缺乏應(yīng)有的抗A 及或抗—B 抗體，如丙種球蛋白缺乏癥。部分溶血時，可溶性血型物質(zhì)中和了相應(yīng)的抗體. 由細菌污染或遺傳因素引起多凝集或全凝集往往是正反定型不符的原因。 老年人血清中抗體水平大幅度下降正反定型結(jié)果不一致的解決辦法如發(fā)現(xiàn)ABO正反定型結(jié)果不一致，先要重復(fù)作試驗1次。 檢查步驟： 另從受檢者采取 l 份新鮮血液標本這樣可以糾正因污染或搞錯樣本造成的不符合。 對受檢紅細胞作直接抗球蛋白試驗，如結(jié)果呈陽性，表示紅細胞已被抗體致敏。如果懷疑是抗—I，用O型(或ABO相合的)臍血紅細胞檢查。 如疑為 A 抗原或 B 抗原減弱，則可將受檢紅細胞與抗—A 或抗—B 血清作吸收及放散試驗以及受檢者唾液作 A、B、H 血型物質(zhì)測定。 如試驗結(jié)果紅細胞呈絹錢狀排列，加等滲鹽水l滴，混和，往往可使絹錢現(xiàn)象消失。 如受檢者為A型血而疑為有類B抗原時，可用下列方法進行鑒別： 觀察細胞與抗—A及抗—B的凝集強度，與抗—A的反應(yīng)要比與抗 36—B的反應(yīng)強。 用受檢者紅細胞與自身血清作試驗，血清中的抗—B不凝集自身紅細胞上的類B抗原。 核對患者的診斷，類B抗原的形成與結(jié)腸癌、直腸癌、革蘭陰性桿菌感染有關(guān)。多凝集紅細胞具有以下特點： 能被人和許多家兔的血清凝集。 不被臍帶血清凝集。 臨床意義 用于檢驗人的ABO血型歸屬。 標本收集和制備 無菌操作收集血液標本,收集后盡可能立即進行實驗。收集在 ACD、CPD、CPD－2A 液中的血液標本,不超過 21天仍可進行實驗，但是加EDTA、肝素和凝集的血液標本，實驗應(yīng)在2天內(nèi)進行。 操作步驟 玻片法： 干凈玻片上加1滴抗D。該紅細胞懸液可以是鹽水懸液， 37也可以是懸浮于自身血漿或血清中的紅細胞。2分鐘左右肉眼判讀結(jié)果。 如果是陰性，需要試管法重做一遍實驗?；靹?。 檢查是否溶血（溶血可能是陽性結(jié)果，或者是細菌污染），然后輕輕搖晃，是細胞再懸浮起來。必要時可借助顯微鏡。結(jié)果若呈陰性需進一步確認是否是弱D。 再在微孔中一滴約 35%的被檢紅細胞懸液，細胞懸液需事先制備于生理鹽水中。 用板式離心機離心：2000rpm,時間 30 秒。 檢測溶血情況（溶血可能是陽性結(jié)果，或者是細菌污染）。陽性反應(yīng)，出現(xiàn)紅細胞凝集，而陰性反應(yīng)在微孔中會出現(xiàn)均勻細胞懸液。 如果呈陰性，需要試管法重做一遍實驗。 陰性反應(yīng)：紅細胞不出現(xiàn)凝集，為RhD陰性。 注意事項 %W/V疊氮鈉，如果攝入會中毒。及時貼上開封時間標簽，在效期內(nèi)使用。 Rh血型鑒定應(yīng)嚴格控制溫度與時間，因Rh抗原、抗體集反應(yīng)凝塊比較脆弱，觀察反應(yīng)結(jié)果時，應(yīng)輕輕側(cè)動試管，不可用力振搖。編制人/修改人： 校核人： 審核人： 批準人：批準日期： 年 月 日 實施日期： 年 月 日文件類型：作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號：JCXRMYY JY0152009文件名稱：臨床輸血檢測操作規(guī)程
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