【文章內(nèi)容簡介】 50 ℃和 60 ℃時的提取率次之。故選取 50，55，60 ℃為溫度的 3 個水平。、時間對提取率的影響： 時間對提取率的影響見圖4 從圖 4 可知，隨著浸提時間的增加，核桃蛋白提 取率也提高，當(dāng)時間為 70 min 時，略有下降，這可 能是提取時間增加后，少量蛋白質(zhì)被分解的原因。因此，選取 50，60，70min為 時間的3個時間水平段。、固液比對提去率的影響：固液比對提去率的影響見圖5 從圖 5 可知，隨著固液比的增加，核桃蛋白質(zhì)的 提取率逐漸增加，在(1∶90)~(1∶100)時，核桃蛋白 的增加有一個明顯的提高。故選擇 1∶90，1∶100， 1∶110 為固液比的 3 個水平。、核桃蛋白提取的正交實驗 正交實驗結(jié)果見表3 由表 3 可知，各因素的水平對試驗結(jié)果影響的主 次順序為：D （固液比），B （溫度），A （pH 值）， C（時 間）。其 最 優(yōu) 方 案 為 A2B2C3D1， 即 堿 液 pH 值 為 ，浸提溫度為 55 ℃，提取時間為 70 min，固 液比為 1∶90。 噴霧干燥蛋白質(zhì)粉末理化性質(zhì)見表 4。由表 4 可知，噴霧干燥出的核桃蛋白脂肪含量較高，這主要是由于實驗過程中去油不徹底引起的。同時也說明核桃蛋白質(zhì)具有很好的吸油性。在實際生產(chǎn)過程中，核桃殘渣中只含有少量的油脂，因此采 用此法生產(chǎn)核桃蛋白質(zhì)時，其油脂不會如此高，蛋白質(zhì)的含量會大大提高。核桃蛋白粉、核桃油的純化精制分析提取物中雜質(zhì)的成分，有針對性的選擇精制純化條件，采用溶劑提取、板框過濾、脫酸、脫色等工藝，對所得蛋白粗品、油脂提取物進(jìn)行純化，以獲得高純度核桃蛋白和核桃油。結(jié)論 采用堿溶酸沉方法提取核桃蛋白質(zhì)，其等電 點為 ，輔助浸提方式為超聲波；提取優(yōu)化參數(shù)為： pH 值 ，溫度 55 ℃，固液比 1∶90，時間 60 min， 在此條件下，得到的蛋白提取率可達(dá) %。采用 噴霧干燥制取干燥后的成品干粉，其顆粒度較均勻細(xì) 致，不會出現(xiàn)黏壁現(xiàn)象。6. 測定項目和方法（1）核桃中蛋白含量測定粉狀、固液體試樣：～5g試樣（使試樣中含氮30～40mg），放入凱氏燒瓶中（避免粘附在瓶壁上）。 1．1．2 液體試樣：取10～20177。（使試樣中含氮30～40mg），移入凱氏燒瓶中，蒸發(fā)至近干。 1．2 消化 向凱氏燒瓶中依次加入硫酸銅（）、硫酸鉀（）10g、硫酸（）20mL及數(shù)粒玻璃珠。將凱氏燒瓶斜放（45176。）在電爐上，緩慢加熱。待起泡停止，內(nèi)容物均勻后，升高溫度，保持液面微沸。當(dāng)溶液呈藍(lán)綠色透明時，～1h。取下凱氏燒瓶冷卻至約40℃，緩慢加入適量水，搖勻。冷卻至室溫。 1．3 蒸餾 采用下列方法之一蒸餾。 1．3．1 常量蒸餾 向接收瓶內(nèi)加入50mL4%硼酸溶液（）及4滴甲基紅次甲基藍(lán)混合指示液（）。將接收瓶置于蒸餾裝置的冷凝管下口，使冷凝管下口浸入硼酸溶液中。將盛有消化液的凱氏燒瓶連接在氮素球下，塑料管下端浸入消化液中。沿漏斗向凱氏燒瓶中緩慢加入70mL40%氫氧化鈉溶液（）（使漏斗底部始終留有少量堿液，封口）。加堿后燒瓶內(nèi)的液體應(yīng)為堿性（黑褐色）。通入蒸汽，蒸餾20min（始終保持液面沸騰）。至少收集80mL蒸餾液。降低接收瓶的位置，使冷凝管口離開液面，繼續(xù)蒸餾3min。用少量水沖洗冷凝管管口，洗液并入接收瓶內(nèi)，取下接收瓶。 1．3．2 微量蒸餾 將消化好并冷卻至室溫的消化溶液（）全部轉(zhuǎn)移到100mL容量瓶中，用蒸餾水定容至刻度，搖勻。 向接收瓶內(nèi)加入10mL4%硼酸溶液（）和1滴混合指示劑（）。將接收瓶置于蒸餾裝置的冷凝管下口，使下口浸入硼酸溶液中。取10177。，沿小玻璃杯移入反應(yīng)室，并用少量蒸餾水沖洗小玻璃杯，一并移入反應(yīng)室。塞緊棒狀玻璃塞，向小玻璃杯內(nèi)加入約10mL40%氫氧化鈉溶液（）。提起玻璃塞，使氫氧化鈉溶液緩慢流入反應(yīng)室，立即塞緊玻璃塞，并在小玻璃杯中加水，使之密封。通入蒸汽，蒸餾5min。降低接收瓶的位置，使冷凝管管 口離開液面，繼續(xù)蒸餾1min。用少量蒸餾水沖洗冷凝管管口，洗液并入接收瓶內(nèi)。取下接收瓶。7．4 滴定 。 同一試樣做兩次平行試驗，同時做空白試驗。 分析結(jié)果的表述 常量蒸餾按式（1）計算： 常量蒸餾按式（1）計算：X(%)=[(VV0)**C]*F*100/M微量蒸餾按式（2）計算：X(%)=[(VV0)**C]*F*100/M*10% 式中：X——食品中蛋白質(zhì)含量（質(zhì)量百分率），%（m/m）或%（m/V）； V——，mL； V0——，Ml。C——鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的摩爾濃度，mol/L； ——1mL1mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液相當(dāng)于氮的質(zhì)量，g；M——試樣的質(zhì)量，g； F——氮換算為蛋白質(zhì)的系數(shù)。標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：、、加入三氯化鋁溶液2ml、乙酸鉀溶液3ml，用甲醇溶液定容至刻度，搖勻，室溫下放置30min。同時做空白。、./ml、。在波長420nm處測定吸光度。以吸光度值為橫坐標(biāo)，濃度值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。試料溶液的制備及測定：，置于150mL具塞三角瓶中，加入甲醇溶液30mL，蓋緊瓶塞，將三角瓶置于將三角瓶置于（65177。2）℃的恒溫水浴振蕩器中在（160177。10）r/min的振蕩頻率下振搖2h，趁熱過濾，濾液置于50mL容量瓶中，用甲醇溶液清洗濾紙和殘渣，合并濾液，冷卻至室溫，加甲醇溶液至刻度，為試料待測液。，分別加入三氯化鋁溶液2ml、乙酸鉀溶液3ml，用70%甲醇溶液定容至刻度，搖勻，室溫下放置30min。于波長420nm處測定吸光度值，將其帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計算出總黃酮的濃度。水分含量的測定：按照GB/T 5497規(guī)定執(zhí)行。結(jié)果計算：總黃酮含量（以干基結(jié)果表示）以蘆丁的質(zhì)量分?jǐn)?shù)w計，數(shù)值以102或%表示，按以下公式計算：式中：C——由標(biāo)準(zhǔn)曲線計算得出的待測試液的總黃酮濃度的數(shù)值，單位為毫克每毫升（mg/ml）；V——待測試液的體積，單位為毫升（ml）；D——試料的總稀釋倍數(shù)；m——試料的質(zhì)量，單位為克（g）；H——試樣水分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。取平行測定結(jié)果的算術(shù)平均值為測定結(jié)果。計算結(jié)果表示到小數(shù)點后兩位。（2）核桃蛋白粉、核桃油品質(zhì)分析① 核桃蛋白粉品質(zhì)分析理化指標(biāo)測定水分測定：參照GB/T —1985規(guī)定執(zhí)行蛋白測定：參照GB/T —1985規(guī)定執(zhí)行灰分測定：參照GB/T —1985規(guī)定執(zhí)行脂肪測定：參照GB/T —1985規(guī)定執(zhí)行純度測定總蛋白含量的測定：參照GB/T —1985規(guī)定執(zhí)行紅外光譜測定：供試品與KBr混合壓片法4000～400cm1紅外光譜儀掃描以確定黃酮純度，采用傅立葉紅外光譜儀Nicolet NEXUS 670 FTIR，該儀器由邁克遜干涉儀和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成，干涉儀將信號以干涉圖的形式送往計算機(jī)進(jìn)行Fourier變換，再經(jīng)繪圖儀、電傳打字機(jī)就送出了紅外光譜圖。采用KBr壓片法，將12mg的樣品和200300mg的溴化鉀粉末，在瑪瑙研缽中研磨混均，然后在壓片機(jī)上壓成透明的薄片進(jìn)行測量，在4000～400cm1紅外光譜儀掃描以確定黃酮純度。② 核桃油品質(zhì)分析理化指標(biāo)測定參照GB/，分別測定通過精制純化后的核桃油的折光率、酸價、皂化價、過氧化值、碘價和色澤。脂肪酸分析采用1515高效液相色譜儀（美國Waters公司），色譜條件：①色譜柱：Pake MCH5（5μm，150 mm），柱溫，30℃。②示差折光檢測器：波長360nm。③流動相：乙腈：H2O 梯度洗脫。④流速：1mL/min。⑤進(jìn)料量：10μL。精確移取各種脂肪酸的標(biāo)準(zhǔn)液配制成不同濃度的混標(biāo)液，用混標(biāo)液進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線、線性范圍，相關(guān)系數(shù)和檢出限的確定。根據(jù)保留時間和示差折光檢測器所得紫外吸收譜圖與標(biāo)準(zhǔn)譜圖對比，對各種脂肪酸極性定性分析，用峰面積按外標(biāo)法定量分析含量。（3）核桃油口服液的感官、理化及微生物等指標(biāo)的評價參照國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。9. 數(shù)據(jù)處理與分析。五. 取得的主要研究成果 （1）核酶解與離心工藝條件對清油提取率有重要影響, 酶解的最