【文章內容簡介】 18]。，剪碎（去掉中脈）放入研缽，加入5ml 96%乙醇，少量石英砂，CaCO3研磨成勻漿，再加入96%乙醇5ml，繼續(xù)研磨至組織變白，靜置35分鐘，倒入漏斗，過濾到25mi的棕色容量瓶中，用少量乙醇沖洗研缽，研棒數次，最后用乙醇定容到25mi，搖勻。以96%乙醇為空白，用分光光度計在波長665nm和649nm下測定其吸光度，按下列公式計算葉綠素含量： Ca= Cb=葉綠素含量(mg/g)=c V n /W式中：c為色素的濃度（mg/L）；V為提取液體積（L）；n為稀釋倍數，W為樣品鮮重（g）。 可溶性糖含量的測定采用蒽酮法測定[19]。，去掉中脈剪碎混勻，分別放入20ml的試管中，加入10ml的蒸餾水，并用塑料封口膜密封置后，至于沸水中保溫30分鐘。自然冷卻至室溫后過濾，提取液過濾入25ml的容量瓶中，用蒸餾水重復提取一次并過濾，最后用蒸餾水定容。，（），充分震蕩，立即將試管放入沸水中，逐管準確保溫一分鐘，取出后自然冷卻至室溫，以空白作對照，用分光光度計測定在630nm處的吸光值，按下列公式計算可溶性糖含量： 可溶性糖含量測定（mg/g）=c V n/a/W103式中：c為標準曲線上查得的值（181。g）；V為提取液總量（ml）；a為顯色體系中提取液的加入量；n為稀釋倍數；W為樣品鮮重（g）。 可溶性蛋白質含量的測定采用考馬斯亮藍法G250法進行測定。，用5ml蒸餾水研磨成勻漿后，轉移至離心管，沖洗研缽研棒數次，3000r/min離心10min，上清液轉移至25ml容量瓶中，用蒸餾水定容至刻度。吸取提取液1ml和5ml考馬斯亮藍G250溶液，搖勻，放置2min，以空白為對照，在595nm波長下測定吸光值，按下列公式計算蛋白質含量： 蛋白質含量（mg/g）=c VT/VS/W103式中：c 為標準曲線上查得的值（μg）；VT為提取液總量（ml），VS為顯色時的提取液加入量（ml），W為樣品鮮重（g）。 過氧化氫酶活性的測定 ，研磨成勻漿，轉移至25ml容量瓶中，再用緩沖液沖洗研缽，沖洗液轉移至容量瓶中，最后用緩沖液定容，4000r/min離心15分鐘，上清液即為過氧化氫酶的粗提液。， 10%H2SO4,。同時計時，于30176。C恒溫水浴中保溫10分鐘后，向測定組加入10%H2SO4 。，至出現粉紅色且30s內不退色為終點。按下列公式計算過氧化氫酶活性： CAT（H2O2mg/g/min）=(AB)/WVtt式中：A為對照滴定所用KMnO4量（ml）；B為酶反應后滴定所用KMnO4量（ml）；V為提取酶液總量（ml）；W為樣品鮮重（g）；Vt為反應體系加入的酶液量（ml）；t為反應時間（min）。 過氧化物酶活性的測定，研磨成勻漿，轉移至離心管中3000r/min離心10分鐘，上清液轉移至25ml容量瓶中，再用緩沖液沖洗研缽，沖洗液轉移至容量瓶中，最后用緩沖液定容，低溫下備用。 50mmol/L磷酸緩沖液，1ml 2%的H2O2，1ml 50mmol/，置于37℃水浴中保溫15分鐘，對照組置于沸水中5min，反應結束后立即測470nm波長的吸光度，測定35分鐘的吸光度變化。按下列公式計算過氧化物酶活性：過氧化物酶活性（181。/g/min）=△A470V/()其中：W為材料鮮重（g）；V為酶液提取量（ml）；Vt為反應體系加入的酶液量（ml）；t為反應時間（min）。 形態(tài)指標的測定用尺子測量黃瓜苗的株高（子葉節(jié)到生長點之間的距離），葉長，葉寬，用游標卡尺測量莖粗（子葉節(jié)下1cm處的粗度）。 數據處理對數據進行方差分析，用Microsft Excel 軟件作圖。3結果與分析 SNP對NaCl脅迫下黃瓜幼苗葉綠素含量的影響SNP對NaCl脅迫下黃瓜幼苗葉綠素含量的影響見圖1。由圖可知，在NaCl脅迫作用下，葉綠素含量與對照（非NaCl脅迫）沒有明顯的差異。而低濃度范圍內的SNP處理，本實驗體現在6mg/Kg 范圍內，可提高幼苗的葉綠素含量，其中6mg/KgSNP處理顯著緩解鹽脅迫對葉綠素的抑制，作用最大，超高了CK水平。而8mg/Kg SNP和10mg/Kg SNP處理黃瓜葉片的葉綠素含量出現明顯的下降趨勢，而這種下降趨勢較為緩和，基本趨于0mg/Kg 的SNP處理。這說明低濃度的SNP，釋放的NO能緩解鹽脅迫下黃瓜葉片中葉綠素的降解，而隨著濃度的升高，這種作用又呈現下降趨勢。A:CK(正常生長的植株) B:0mg/Kg SNP+4mg/KgNaCl C:2 mg/Kg SNP+4mg/KgNaCl D:4 mg/Kg SNP+4mg/KgNaCl E:6 mg/Kg SNP+4mg/KgNaCl F: 8mg/Kg SNP+4mg/KgNaCl G:10 mg/Kg SNP+4mg/KgNaCl 下同 SNP對NaCl脅迫下黃瓜幼苗可溶性糖含量的影響SNP對NaCl脅迫下黃瓜幼苗可溶性糖含量的影響見圖2。由圖可知，4 mg/kgNaCl的脅迫下，黃瓜幼苗的可溶性糖含量顯著增加，但和CK相比，沒有達到顯著水平。SNP處理會降低NaCl脅迫對黃瓜苗的可溶性糖含量的促進作用，且隨著濃度的升高，這種促進作用顯著性增加。從數值上考慮，隨著SNP濃度的升高黃瓜幼葉中可溶性糖含量呈下降趨勢，當濃度達到一定范圍后，這種促進作用有所降低，本實驗中，2mg/Kg SNP，4mg/Kg SNP，6mg/Kg SNP處理表現為下降趨勢較急促，而濃度8mg/Kg SNP，10mg/Kg SNP處理促進作用變化較小，基本不再變化。 SNP對NaCl脅迫下黃瓜幼苗可溶性蛋白質含量的影響 SNP對NaCl脅迫下黃瓜脅迫下可溶性蛋白質含量的影響見圖3。有圖可知，在4g/mgNaCl的作用下，黃瓜幼苗的可溶性蛋白質含量明顯升高，達到顯著水平，而低濃度的SNP處理減弱了鹽脅迫對可溶性蛋白質的促進作用。2mg/KgSNP，4mg/Kg SNP和6mg/Kg SNP處理明顯減低了鹽脅迫下的蛋白質含量， 8mg/KgSNP處理與CK處理下的黃瓜幼苗的可溶性蛋白質含量相比已經沒有明顯的差異，而10mg/Kg SNP處理使得黃瓜葉片可溶性蛋白質的含量明顯降低了，已經與沒有SNP處理的葉片可溶性蛋白質含量接近， 10mg/KgSNP處理明顯的抑制了鹽脅迫對蛋白質含量的促進作用。 SNP對NaCl脅迫下黃瓜幼苗過氧化物酶活性的影響SNP對NaCl脅迫下黃瓜幼苗過氧化物酶活性的影響見圖4，由圖可知，與CK相比，鹽脅迫顯著降低了黃瓜葉片中過氧化物酶活性，SNP處理后各組過氧化物酶活性都有所升高，低濃度的SNP處理，即2mg/Kg SNP，4mg/Kg SNP處理會使酶活性顯著增加，但隨著濃度的增加，達到6mg/Kg的SNP處理后，黃瓜幼苗葉片中的過氧化物酶的活性又有所降低，8mg/Kg SNP處理酶活性進一步降低，而到10mg/Kg SNP處理后，酶活性已經基本降低到沒有SNP處理的水平上了，其中4mg/Kg的SNP處理GPX活性增加較明顯，達到顯著水平。，與對照相比4mg/Kg的NaCl處理顯著降低了黃瓜幼苗葉片中過氧化氫酶的活性，施加SNP后，各組CAT活性均增加。從數據上分析，低濃度的SNP處理CAT活性持續(xù)增加，但這種促進作用始終低于CK水平。當濃度達