鹽脅迫對(duì)露水草生理和有效成分含量的影響論文(編輯修改稿)
2025-07-22 01:02 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 理5盆，每隔1d澆一次處理液，每盆每次澆100ml，處理10d后測定露水草光合參數(shù)、光合色素、丙二醛、相對(duì)電導(dǎo)率和蛻皮激素含量。 各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)指標(biāo)的測定 光合參數(shù)的測定實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：選擇晴朗的天氣，測定時(shí)間為上午8:3011:30；實(shí)驗(yàn)前一天將儀器充滿電，檢查儀器的吸收管，調(diào)試好儀器；實(shí)驗(yàn)前一天用濕毛巾擦去苗上的灰塵；實(shí)驗(yàn)當(dāng)天將要測定的實(shí)驗(yàn)材料提前半小時(shí)放到光下進(jìn)行充分光適應(yīng)。實(shí)驗(yàn)步驟：①儀器安裝；②開機(jī)與校正；③參數(shù)設(shè)置及測定（飽和光強(qiáng)設(shè)為1000molm2s1，飽和二氧化碳設(shè)為500ppm），當(dāng)光合速率穩(wěn)定且胞間二氧化碳大于零時(shí)可以保存此次記錄，測定完一個(gè)數(shù)據(jù)時(shí)剪下測定部位的葉面積，并坐標(biāo)紙上畫上葉面積；④數(shù)據(jù)存取。 光合色素的測定光合色素提?。?N二甲基甲酰胺進(jìn)行迅速研磨，研磨后至于離心管中，勻漿以4000rmin1離心10min，其上清液即為光合色素提取液。光合色素測定：將光合色素提取液（對(duì)照組用N，N二甲基甲酰胺）于波長664nm、647nm、480nm下測定OD值。色素濃度按以下公式計(jì)算(位為mgL1):Chla=12A647 （1）Chlb=A667 （2）Chl=Chla+Chlb （3）Car=()/245 （4） 樣品色素含量（mgg1FW1）=色素濃度提取液體積247。樣品鮮重 （5） 相對(duì)電導(dǎo)率的測定先用蒸餾水清洗帶塞子的玻璃試管2次，再用去離子水浸泡過夜，最后倒置晾干。選取生長環(huán)境一致的材料，先用自來水沖洗干凈，再用去離子水沖洗3次，用吸水紙吸去多余的水分。然后用剪刀剪下（由于葉片太窄了不容易用打孔器打）葉面積大小差不多一致的葉片，放入干凈的玻璃試管中，加入10ml去離子水后將試管置于搖床上搖1h，測定電導(dǎo)率之前試管充分搖勻后用電導(dǎo)儀測定其初始電導(dǎo)值（S1）。測完各試管加塞，用保鮮膜封好試管口，置于沸水浴30min，徹底殺死植物組織，取出試管用自來水冷卻至室溫，并在室溫下平衡10min搖勻，測其終電導(dǎo)率（S2），實(shí)驗(yàn)過程用去離子水做空白對(duì)照。測定過程中避免口中呼出的CO2進(jìn)入試管，影響測定結(jié)果，此外，溫度對(duì)溶液的電導(dǎo)率影響較大，必須在相同溫度條件測定電導(dǎo)率。計(jì)算：相對(duì)電導(dǎo)率（%）=（S1S0）/（S2S0）100%。由于對(duì)照組也有少量電解質(zhì)外滲，可按照下式計(jì)算由于鹽脅迫而產(chǎn)生的外滲，稱為傷害度（或傷害性外滲）。傷害度（%）=（LtLck）/（1Lck）100式中，Lt為處理葉片的相對(duì)電導(dǎo)度；Lck為對(duì)照葉片的相對(duì)電導(dǎo)度。 丙二醛的測定丙二醛的提?。海尤?mL10%TCA研磨及少量石英砂，研磨至勻漿，再加4mL10%TCA進(jìn)一步研磨，勻漿置于離心管中，以4000rmin1離心10min，其上清液即為丙二醛提取液。丙二醛的測定：取2ml丙二醛提取液（對(duì)照組加2mL蒸餾水），%TBA，混合液在沸水浴中保溫15min后，立即置于冰浴中冷卻，然后離心10min，于波長532nm、450nm下測定OD值。按下列公式進(jìn)行計(jì)算：丙二醛含量（mmolL1）=106106A450 （1）丙二醛含量（mgg1FW1）=[（106106A450）提取液體積1000]247。樣品鮮重 （2）丙二醛含量（molg1FW1）=[（106106A450）提取液體積]247。樣品鮮重 （3） 蛻皮激素測定標(biāo)準(zhǔn)曲線測量：精密稱取β蛻皮激素對(duì)照品10mg，加10ml乙醇，配置為1mgml1母液。用母液配制成濃度為0、、ml1，各濃度體積都配成10ml。蛻皮激素提取：將露水草苗連根拔出洗干凈后在電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱105℃下殺青20分鐘，接著在65℃下烘干至恒定質(zhì)量后研磨成粉，加2mg活性炭，浸泡并用超聲波在50MHz下提取30min，10000rmin1離心15min，取上清液，上清液繼續(xù)離心，去上清液在242nm處測量吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程計(jì)算樣品液濃度。樣品蛻皮激素含量（mgg1DW1）=樣品液濃度（mgml1）樣品液體積（ml）247。樣品干重（g）。 用Q法對(duì)數(shù)據(jù)刪除，用origin軟件進(jìn)行作圖。 鹽脅迫對(duì)露水草光合參數(shù)的影響 由表1可知，鹽濃度為90molL1時(shí)其凈光合速率、蒸騰速率、氣孔導(dǎo)度與對(duì)照組相比較變化更大，鹽濃度為90molL1時(shí)，%，%，%，而對(duì)于胞間二氧化碳影響最大的鹽濃度是120 mmol%。表1鹽脅迫對(duì)露水草葉片光合參數(shù)的影響（1000umols1m2）(平均值177。SD，n=5)處理mmolL1凈光合速率蒸騰速率氣孔導(dǎo)度胞間二氧化碳PnTrGsCi/（μmolm2s1）/（mmolm2s1）/（mmolm2s1）/（μmolmol１）CK177。177。177。177。50177。177。177。177。
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