【正文】 前提，因此在鹽脅迫下研究種子的萌發(fā)具有重要的意義。低濃度鹽分對種子的萌發(fā)具有促進作用，隨著鹽分的升高，種子的發(fā)芽率，發(fā)芽指數(shù)和活力指數(shù)均降低，鹽濃度過高會抑制種子的萌發(fā)。隨著濃度的增加種子萌發(fā)受到不良影響，光照對植物種子的萌發(fā)有明顯的促進作用。 鹽對植物生長發(fā)育的影響當植物的根系受到鹽脅迫的效應(yīng)時，會產(chǎn)生相應(yīng)的生理反應(yīng)，繼而影響地上部分的生長，鹽脅迫常導致植物根系生長受到抑制[11]。鹽分脅迫明顯的抑制了擬南芥根系對大量元素的吸收，進而影響植株總體營養(yǎng)供應(yīng)。 過量鹽分對植物造成滲透脅迫和干擾營養(yǎng)離子平衡，鹽分通過抑制和誘導多種酶系統(tǒng)來影響植物的正常生長[13]。 鹽對植物光合作用的影響光合作用是植物生長發(fā)育的基礎(chǔ)，研究鹽脅迫如何影響制約光合作用具有重要的意義。植物光和作用產(chǎn)生的能量一部分用于植物的生長，另一部分用于鹽脅迫為了抵抗鹽脅迫，植物自身需要加強光合速率，但隨著鹽濃度及處理時間的延長，這種適應(yīng)能力下降。一般認為鹽脅迫引起植物水勢及氣孔導度降低，限制CO2到達光合機構(gòu)，從而抑制光合作用[14]。 利用鈣和微量元素鹽脅迫會降低植物對鈣和微量元素的吸收，試植物產(chǎn)生缺素癥。 抗鹽鍛煉植物的抗鹽性是在個體發(fā)育中形成的，因此植物幼齡期可塑性高，適應(yīng)能力強的特點，用一定濃度鹽溶液處理種子，可明顯提高抗鹽性。多胺是植物體代謝過程中產(chǎn)生的一類低分子量脂肪族含氮堿，在維持鹽脅迫下蛋白質(zhì)和核酸等大分子的構(gòu)想和清除活性氧方面具有重要作用[15]。由于設(shè)施栽培采用特殊的覆蓋結(jié)構(gòu)，改變了其內(nèi)部生態(tài)環(huán)境及自然狀態(tài)下的水熱平衡，大大地改變了土壤的理化性質(zhì)，隨著覆蓋年限的增加，土壤次生鹽漬化加重，導致黃瓜的經(jīng)濟價值降低，從而給黃瓜周年生產(chǎn)造成巨大損失[16]。已證明，NO在植物生長，發(fā)育，衰老，細胞程序性死亡，乙烯釋放，抗病和對環(huán)境脅迫等各種不同形式的響應(yīng)中有很大的作用。因此，本實驗擬采用NO供體SNP（0mg/g，2mg/g，4mg/g，6mg/g，8mg/g，10mg/g）處理NaCl脅迫下黃瓜幼苗，探討緩解NO對緩解NaC脅迫的效果，篩選出適合黃瓜生長的SNP濃度，為進一步闡述NaCl脅迫對植物的傷害以及為我國廣大鹽堿地區(qū)和設(shè)施植物栽培中防止鹽害提供理論依據(jù)。穴盤育苗，待幼苗長出三片真葉時進行移栽。每公斤添加4gNaCl，再分別添加0,2,4,6,8,10mg/kg的SNP，混合均勻后移栽，不添加任何化學藥品的為對照。 生理指標測定 葉綠素含量的測定使用乙醇提取法測定[18]。以96%乙醇為空白，用分光光度計在波長665nm和649nm下測定其吸光度，按下列公式計算葉綠素含量： Ca= Cb=葉綠素含量(mg/g)=c V n /W式中：c為色素的濃度（mg/L）；V為提取液體積（L）；n為稀釋倍數(shù)，W為樣品鮮重（g）。去掉中脈剪碎混勻，分別放入20ml的試管中，加入10ml的蒸餾水，并用塑料封口膜密封置后，至于沸水中保溫30分鐘。（），充分震蕩，立即將試管放入沸水中，逐管準確保溫一分鐘，取出后自然冷卻至室溫，以空白作對照，用分光光度計測定在630nm處的吸光值，按下列公式計算可溶性糖含量： 可溶性糖含量測定（mg/g）=c V n/a/W103式中：c為標準曲線上查得的值（181。 可溶性蛋白質(zhì)含量的測定采用考馬斯亮藍法G250法進行測定。吸取提取液1ml和5ml考馬斯亮藍G250溶液，搖勻，放置2min，以空白為對照，在595nm波長下測定吸光值，按下列公式計算蛋白質(zhì)含量： 蛋白質(zhì)含量（mg/g）=c VT/VS/W103式中：c 為標準曲線上查得的值（μg）；VT為提取液總量（ml），VS為顯色時的提取液加入量（ml），W為樣品鮮重（g）。 10%H2SO4,。C恒溫水浴中保溫10分鐘后，向測定組加入10%H2SO4 。按下列公式計算過氧化氫酶活性： CAT（H2O2mg/g/min）=(AB)/WVtt式中：A為對照滴定所用KMnO4量（ml）；B為酶反應(yīng)后滴定所用KMnO4量（ml）；V為提取酶液總量（ml）；W為樣品鮮重（g）；Vt為反應(yīng)體系加入的酶液量（ml）；t為反應(yīng)時間（min）。 50mmol/L磷酸緩沖液，1ml 2%的H2O2，1ml 50mmol/，置于37℃水浴中保溫15分鐘，對照組置于沸水中5min，反應(yīng)結(jié)束后立即測470nm波長的吸光度，測定35分鐘的吸光度變化。/g/min）=△A470V/()其中：W為材料鮮重（g）；V為酶液提取量（ml）；Vt為反應(yīng)體系加入的酶液量（ml）；t為反應(yīng)時間（min）。 數(shù)據(jù)處理對數(shù)據(jù)進行方差分析，用Microsft Excel 軟件作圖。由圖可知，在NaCl脅迫作用下，葉綠素含量與對照（非NaCl脅迫）沒有明顯的差異。而8mg/Kg SNP和10mg/Kg SNP處理黃瓜葉片的葉綠素含量出現(xiàn)明顯的下降趨勢，而這種下降趨勢較為緩和，基本趨于0mg/Kg 的SNP處理。A:CK(正常生長的植株) B:0mg/Kg SNP+4mg/KgNaCl C:2 mg/Kg SNP+4mg/KgNaCl D:4 mg/Kg SNP+4mg/KgNaCl E:6 mg/Kg SNP+4mg/KgNaCl F: 8mg/Kg SNP+4mg/KgNaCl G:10 mg/Kg SNP+4mg/KgNaCl 下同 SNP對NaCl脅迫下黃瓜幼苗可溶性糖含量的影響SNP對NaCl脅迫下黃瓜幼苗可溶性糖含量的影響見圖2。SNP處理會降低NaCl脅迫對黃瓜苗的可溶性糖含量的促進作用，且隨著濃度的升高，這種促進作用顯著性增加。 SNP對NaCl脅迫下黃瓜幼苗可溶性蛋白質(zhì)含量的影響 SNP對NaCl脅迫下黃瓜脅迫下可溶性蛋白質(zhì)含量的影響見圖3。2mg/KgSNP，4mg/Kg SNP和6mg/Kg SNP處理明顯減低了鹽脅迫下的蛋白質(zhì)含量， 8mg/KgSNP處理與CK處理下的黃瓜幼苗的可溶性蛋白質(zhì)含量相比已經(jīng)沒有明顯的差異，而10mg/Kg SNP處理使得黃瓜葉片可溶性蛋白質(zhì)的含量明顯降低了，已經(jīng)與沒有SNP處理的葉片可溶性蛋白質(zhì)含量接近， 10mg/KgSNP處理明顯的抑制了鹽脅迫對蛋白質(zhì)含量的促進作用。，與對照相比4mg/Kg的NaCl處理顯著降低了黃瓜幼苗葉片中過氧化氫酶的活性，施加SNP后，各組CAT活性均增加。當濃度達到一定數(shù)值后，本實驗的處理水平是8mg/KgSNP處理和mg/Kg SNP處理，酶活性開始降低，但還是高于無SNP處理的鹽脅迫的黃瓜幼苗的過氧化氫的活性，6mg/Kg的SNP處理對CAT活性增加最顯著。觀察黃瓜幼苗得知，只在鹽脅迫下的黃瓜幼苗，長勢弱，植株矮小，由圖可知，在NaCl脅迫下，黃瓜幼苗的株高顯著降低。從數(shù)值上分析，低濃度的SNP可以增加黃瓜的株高，但隨著濃度的增加，幼苗的株高又出現(xiàn)降低趨勢，其中4mg/Kg SNP處理的提高最大，基本達到CK水平，而10mg/KgSNP處理對黃瓜幼苗的株高的促進作用已趨于無效，基本和不施用SNP黃瓜幼苗的株高一樣。4mg/Kg的NaCl處理顯著地降低了黃瓜幼苗的莖粗，而施用SNP處理后，各組處理后黃瓜幼苗的莖粗都有所增加。 SNP對NaCl脅迫下黃瓜幼苗葉片數(shù)的影響 SNP對NaCl脅迫下黃瓜幼苗葉片數(shù)的影響見表1。低濃度的S