【文章內(nèi)容簡介】 Ms）1，21天的慢性毒性試驗無異常，化合物穩(wěn)定，生物分布證明為肝攝取，5μM/kg對V2癌有選擇性增強，對鼠纖維肉瘤的增強可持續(xù)24h。葉酸（folic acid）與大分子的偶聯(lián)物有可能用來在體外迅速區(qū)分腫瘤與正常細胞，因為它能被這一維生素的受體介導(dǎo)而被腫瘤細胞內(nèi)吞[26]。葉酸大分子結(jié)合物可被細胞膜上“uncoated pits”攝取，利于將藥物運送到胞液內(nèi)[27]。Wiener等人以葉酸為修飾基團，合成了對腫瘤具有較好的靶向性的造影劑。如果在樹狀大分子—造影劑復(fù)合物中的樹狀大分子表面再接上葉酸，腫瘤表面的葉酸受體就能夠特異性地高親和結(jié)合樹狀大分子—葉酸復(fù)合物，這可以使得樹狀大分子—造影劑復(fù)合物對腫瘤細胞更具有靶向性。 金屬卟啉配合物的結(jié)構(gòu)式Fig The stuctures of metalloporphyrin plexes 本文研究的主要內(nèi)容 若藥物分子的親水性與親脂性達到一定平衡，特別是對含有苯環(huán)的兩親性化合物，能被肝臟大量攝取并分泌到膽汁中，具有肝膽選擇性[19]。人們利用這一思路，設(shè)計合成了兩親性的MRI造影劑。GdBOPTA（gadobenate dimeglumine）[17]和GdEOBDTPA（gadolinium ethoxybezyl triamine pentaacetic acid）[20]是這類化合物的典型代表，這兩種造影劑已經(jīng)成功地應(yīng)用于臨川診斷?？紤]到金剛烷及其衍生物的具有良好的親酯性、生物相容性和具備將攜帶藥物分子穿透細胞膜的能力，本論文設(shè)計了一個含金剛烷胺的釓配合物作為肝靶向性造影劑的目標分子，其合成路線見圖式 1 。圖式1. GdDTPA雙金剛烷胺的合成路線Scheme 1. Synthesis of plex(GdDTPAbiamantadine)2 實驗部分 主要實驗儀器儀器名稱型號生產(chǎn)單位傅立葉變換紅外分光度計Nicolet380美國Thermo公司電子分析天平BS210S德國 Sartorius公司數(shù)控超聲清洗器KQ100DA昆山市超聲儀器有限公司循環(huán)水式多用真空泵SHBⅢ鄭州長城科工貿(mào)有限公司真空干燥箱DZF6020上海一恒科技有限公司磁力攪拌器851上海梅穎浦儀器儀表有限公司旋蒸儀RE52AA上海亞榮儀器公司顯微熔點儀X5北京泰克儀器有限公司 主要實驗藥品試劑名稱試劑純度生產(chǎn)廠家二氯甲烷AR天津市凱通化學試劑有限公司氯仿AR上海市晶純試劑有限公司甲醇AR天津市永大化學試劑開發(fā)中心無水乙醇AR天津市凱通化學試劑有限公司乙腈AR中國天津市巴斯夫化工有限公司三乙胺AR天津市永大化學試劑開發(fā)中心四氫呋喃AR天津市凱通化學試劑有限公司DMFAR中國天津市巴斯夫化工有限公司乙醚AR中國天津市巴斯夫化工有限公司吡啶ARAladdin Chemistry DTPAARAladdin Chemistry 濃鹽酸（36%38%）AR煙臺市雙雙化工有限公司五氧化二磷AR上海展云化學品有限公司濃硫酸（98％）AR天津市永大化學試劑開發(fā)中心無水硫酸鈉AR上海市晶純試劑有限公司無水氯化鈣AR天津市巴斯夫化工有限公司無水碳酸鉀AR天津市凱通化學試劑有限公司普通的氯仿含有1%的乙醇，這是為了防止氯仿分解為有毒的光氣而作為穩(wěn)定劑加入的。除去其中的乙醇，可以將氯仿用一半體積的水振蕩數(shù)次，用無水CaCl2(顆粒狀)干燥24h后蒸餾，收集5960℃的餾分，儲存在加4A分子篩的棕色瓶中。制備無水酒精時，%酒精中加入生石灰(CaO)加熱回流，使酒精中的水跟氧化鈣反應(yīng)，生成不揮發(fā)的氫氧化鈣來除去水分，然后再蒸餾，%的無水酒精。如果還要去掉這殘留的少量的水，可以加入金屬鎂來處理，可得100%乙醇，叫做絕對酒精。 將乙腈用無水碳酸鉀干燥，過濾，再與五氧化二磷加熱回流（20/L），直至無色，用分餾柱分餾。乙腈可存放于分子篩（）的棕色瓶中。乙腈有毒，常含有游離的氫氰酸。先加入對甲苯磺酰氯，加熱回流得到大量棕色物，分餾收集8486176。C餾分。再加入對甲苯磺酰氯，若無棕色物生成則無一級，二級胺。蒸餾加入氫氧化鉀，加熱回流45h。收集86176。C餾分，保存在4A分子篩的試劑瓶中。二氯甲烷為無色揮發(fā)性液體。蒸汽不燃燒，與空氣混合也不發(fā)生爆炸，微溶于水，能與醇，醚混合?？梢蕴娲炎鲚腿┯谩６燃淄榧兓?可用濃硫酸震蕩數(shù)次至酸層無色為止。水洗后，用5%的碳酸鈉洗滌，然后在水洗。以無水氯化鈣干燥，蒸餾，176。C餾分。二氯甲烷不能用金屬鈉干燥，因會發(fā)生爆炸。同時注意不要再空氣中久置，以免氧化。應(yīng)貯存于棕色瓶中。 實驗部分 二乙三胺五乙酸二環(huán)酸酐（DTPAA）的合成 將30克二乙三胺五乙酸（DTPA）懸浮于 72mL 乙酸酐和 22mL 吡啶的混合物中，通干燥氮氣，升溫至 55 ℃，超聲波振蕩反應(yīng) 6h，抽濾，用乙酸酐洗 5 次，少許冷 DMF 洗 3 次，無水乙醚洗3次，并用 DMF乙醚重結(jié)晶，收集晶體， 真空干燥，得到白色粉末 ，產(chǎn)率 90 %，mp 179~181℃。, N二（N金剛烷基乙酰胺）N,N′,N 三乙酸（DTPAbiamantadine）的合成將DTPA二環(huán)酸酐( g, mmol) 和金剛胺鹽酸鹽( g, mmol) 溶解于 20ml 干燥重新蒸餾的吡啶中，通入干燥 N2，升溫至 60 176。C，攪拌反應(yīng) 4h后，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑得到固體，用冰水洗滌，真空干燥得到粗品，然后用甲醇水( v:v=3:1 ) 重結(jié)晶，得到微黃色固體粉末 (80 %)，m p 138140 ℃。 GdDTPA biamantadine 的合成二亞乙基三胺N, N二（N金剛烷基乙酰胺）N,N′,N 三乙酸（DTPAbiamantadine）（ mmol）和 GdCl36H2O ( mmol )的混合物溶解在甲醇（15ml）中，升溫至 50℃，攪拌反應(yīng) 24 h后，冷卻至室溫，蒸發(fā)濃縮至 5ml，將干燥的乙醚滴加至反應(yīng)液中，得到大量白色沉淀，抽慮，乙醚洗滌，真空干燥后得到微黃色粉狀晶體 ( 85 % )。 配合物弛豫時間（T1）的測定稱取配合物GdDTPA，將其置于25 mL的容量瓶中，用二次蒸餾水配成一定濃度(1~2mmol/L)的溶液，在Bruker BIOSPEC 47/30 MRI儀上用反轉(zhuǎn)恢復(fù)法分別測定純水的弛豫時間T1(d)和在樣品溶液中的弛豫時間T1(obsd)，脈沖系列為： (180176。τ90176。AtD)n, At+D≥5T1。3 實驗結(jié)果與討論 DTPAA的合成DTPA雙環(huán)酸酐是合成造影劑的主要原料之一，它們是通過DTPA與乙酸酐在吡啶的存在下反應(yīng)，乙酸酐起到脫水劑的作用，而吡啶一方面作為分散劑，另一方面與生成的乙酸成鹽，使反應(yīng)能夠進行完全。以往，DTPA二環(huán)酸酐(DTPAA)是在大量吡啶作溶劑和催化劑的情況下, 將 DTPA 用乙酸酐作脫水劑進行脫水來制備。 由于 DTPA 及其環(huán)酸酐在這些溶劑中難溶，反應(yīng)體系呈固液兩相，因而反應(yīng)速度緩慢、反應(yīng)溫度較高， 最終產(chǎn)物純度難以保證，吡啶有毒且相對昂貴。通用醫(yī)療電氣有限公司探索了 DTPA/乙酸酐/吡啶的摩爾比、反應(yīng)溫度等條件對 DTPA二環(huán)酸酐(DTPABMA) 生成的影響，將實驗條件優(yōu)化為： DTPA/乙酸酐/吡啶的摩爾比=1:3:5，80℃ 進行攪拌反應(yīng)