【文章內(nèi)容簡介】 ，2，3，4，5，6，7，8，8，7，6，5，4，3，2，1的樣本順序進行測定。 以上實驗至少重復5天，即至少分析40個不同的臨床病人樣本。每天實驗必須進行校準和室內(nèi)質(zhì)控。只有在室內(nèi)質(zhì)控合格的情況下，當天的實驗室數(shù)據(jù)才有效。 記錄測定結(jié)果（Xii和Yjj）。 計算每個樣本測定的均值（和），樣本重復測定間差值的絕對值（DXi 和DYi）及兩種方法測定結(jié)果間的差值（）。 以對作散點圖。 以（）對做偏倚圖。 以（YjjXij）對做偏倚圖。 檢查批內(nèi)離群點：計算樣本重復測定間差值（DXi 和DYi）的平均數(shù)，實驗結(jié)果差值超出平均數(shù)4倍時，則判斷為離群點。 檢查批間離群點：計算兩種方法測定結(jié)果間均值差值()的平均數(shù)，超出該平均數(shù)4倍時，則判斷該樣本為離群點。 相關(guān)系數(shù)計算：利用所有樣本雙份測定值進行相關(guān)系數(shù)計算，如果≥(或2≥)，則認為X范圍適合，數(shù)據(jù)滿足要求。X的誤差可以由數(shù)據(jù)范圍給以適當補償，并且簡單的線性回歸可以用來評價斜率和截距。如果r2，那么必須通過分析另外一些樣品以擴大數(shù)據(jù)范圍，然后再檢查全部數(shù)據(jù)系列。如果沒有超出范圍，采用分步偏差程序代替線性回歸，評價平均偏差。：利所有樣本雙份測定的有效數(shù)據(jù)，計算兩個方法間的線性回歸方程：Y=a+bX. 偏差估計：在醫(yī)學決定水平，利用回歸方程計算預期偏差,預期偏差Bx=a+(b1)X,相對偏差=Bx/X 根據(jù)相關(guān)規(guī)定，判定預期偏差、相對偏差是否在規(guī)定范圍內(nèi)。附件7：體外診斷試劑分析性能評估指導原則——精密度（征求意見稿） 一、概述精密度是衡量體外診斷試劑批內(nèi)和批間變異的重要指標，通常包括批內(nèi)和批間不精密度。精密度評估資料是評價擬上市產(chǎn)品有效性的重要依據(jù)，也是產(chǎn)品注冊所需的重要申報資料之一。本指南基于國家食品藥品監(jiān)督管理局《體外診斷試劑注冊管理辦法（試行）》（以下簡稱《辦法》）的有關(guān)要求，參考CLSI有關(guān)標準，對定量檢測方法中精密度的評估和數(shù)據(jù)處理方法進行了要求。其目的是為生產(chǎn)企業(yè)進行定量檢測方法中精密度的評估提供原則性指導，也為注冊管理部門審核該部分分析性能評估資料提供技術(shù)參考。同時，本指南亦可指導臨床實驗室進行定量檢測方法的精密度評估。由于體外診斷試劑產(chǎn)品發(fā)展速度快、專業(yè)跨度大，國家食品藥品監(jiān)督管理局將根據(jù)體外診斷試劑發(fā)展的需要，適時對本指南進行修訂。二、定義是眾多種類精密度中最基本的一個，它是在嚴格的相似條件下，所得到的最佳的精密度。指在同一實驗室，由同一（組）操作員在同一儀器上，使用同一方法和同種、同一批號試劑，在一段時間內(nèi)(一般為一個月或20個工作日)對同一測試樣品（常用質(zhì)控品）測量結(jié)果的精密度。三、精密度評估的基本原則，了解并掌握儀器的操作步驟和各項注意事項，能在評估階段維持儀器的可靠和穩(wěn)定。(漿)庫；當實驗室收集的樣品不穩(wěn)定或不易得到時，也可考慮使用穩(wěn)定的、以蛋白質(zhì)為基質(zhì)的商品物質(zhì)，如校準品或質(zhì)控品。，應至少評估二個濃度水平樣本的精密度。當二個濃度的精密度有顯著差異時，建議增加為三個濃度。所選樣本濃度應在測量范圍內(nèi)有醫(yī)學意義，即至少有一個濃度在醫(yī)學決定水平(medical decision levels)左右。不要為了得到較小的精密度，都選用較高值的樣品，甚至超出測量范圍。也不應選用靠近最低檢出限的樣品，此時所得的精密度往往偏大。相當多的檢驗項目低值常無實際臨床意義，但有少數(shù)檢驗項目，其低值也有臨床價值，此時就需要評估有判斷價值的低值精密度，適用時，可進行功能靈敏度的評估。如沒有醫(yī)學決定水平，可在參考區(qū)間上限左右選一個濃度。此外，再根據(jù)檢驗項目的性質(zhì)在線性區(qū)間內(nèi)選擇另一個值。如與廠商或文獻報導的精密度進行比較，所選濃度應與被比較精密度的濃度相接近。否則，有可能得出不恰當?shù)慕Y(jié)論。四、精密度評估的方法和數(shù)據(jù)處理 試劑和校準品：應使用同一種類、同一批號的試劑和校準物,如可能,只進行一次校準。使用不同批號試劑和多次校準都會增加檢驗結(jié)果的變異程度。 評估方法：在以上條件滿足的情況下，在一批內(nèi)對樣本進行重復測定，至少進行20次重復測定。 質(zhì)量控制：檢驗時應同時至少測一個質(zhì)控品。當質(zhì)控品結(jié)果超出規(guī)定的失控限，不論實驗結(jié)果是否滿意都應棄去不用，重新進行試驗以取得20個實驗數(shù)據(jù)。要保存所有的質(zhì)控數(shù)據(jù)和失控處理記錄。 數(shù)據(jù)收集：在進行數(shù)據(jù)分析前，檢查數(shù)據(jù)中有無由于偶然差錯引起的離群值(outliers)，可用下述離群值的標準；從已收集的20數(shù)據(jù)計算出總均值和標準差，任何結(jié)果和總均值的差值超過4個標準差時，可認為是離群值。為了能收集到至少20個有效數(shù)據(jù)。除補充由于質(zhì)控失控而增加的測試外，還應再增加由于離群值不用于精密度的計算所需增加的檢驗次數(shù)。在進行這種批內(nèi)精密度評估實驗時，一次只能有一個離群值，當離群值超過1個時，應懷疑是否為方法不穩(wěn)定或操作者不熟悉所致。此時，應不用此次試驗數(shù)據(jù)。檢查問題和解決問題后重新開始新的評估實驗。：將所收集到的數(shù)據(jù)記錄在表1：表1 批內(nèi)精密度實驗原始數(shù)據(jù)記錄序號測量值（均值測量值）212......1920均值 批內(nèi)精密度估計值的計算求出均值：=∑Xi/n使用下列公式計算出批內(nèi)標準差估計值的標準差 批內(nèi)精密度估計值的95%可信限，得出批內(nèi)精密度的95%可信區(qū)間為：（批內(nèi)精密度）（批內(nèi)精密度） 評估方法：每天做2個批次的測試，每批測試時，對同一樣品作雙份測量，共做20天。評估結(jié)束時共有40對，即80個測試結(jié)果。從40批次測量中雙份結(jié)果的差值求出批內(nèi)精密度。從所有80個數(shù)據(jù)計算出批間精密度。在實施此項評估工作時，必須由同一個或一組操作者在同一臺儀器上進行，應該使用相同的校準品、相同種類和批號的試劑。所用時間不得少于20個工作日，這樣所測到的精密度能更好地反映出該臨床實驗室定量測量方法在一段時間內(nèi)的理想或最適的穩(wěn)定性。 在每一批次測量中，必須同時測量質(zhì)控品，以保證結(jié)果是可靠的，數(shù)據(jù)能夠采用。注：①也可以一日進行一個批次測量，一個批次中對同一樣品重復測量4次，共測20個工作日，由80個數(shù)據(jù)求出批內(nèi)和批間精密度；②如果取得穩(wěn)定樣品有困難，也可改為測5日，每日2個批次，每個批次測一個樣本8次。仍有80個數(shù)據(jù)。從10個批次中每一樣品8次差異算出批內(nèi)精密度。從所有80個結(jié)果計算出批間精密度。要收集到足夠有效數(shù)據(jù)(至少為80個數(shù)據(jù))。除補充由于質(zhì)控失控而增加的測試外，應在進行數(shù)據(jù)分析前，檢查數(shù)據(jù)中有無由于偶然差錯引起的離群值(outlier)，可用下述剔除值的標準；從實施段已收集的40對均值的數(shù)據(jù)計算出總均值和標準差，出現(xiàn)下列任何一種情況都可認為是離群值：（1）任何一對均值和總均值的差超過4倍標準差（2）任何一對中二個結(jié)果的絕對差值超過4倍標準差離群值不用于精密度的計算。在剔除后應再增加檢驗次數(shù)，以保證至少有40批次，80個數(shù)據(jù)進行計算。注：%。當超過時，應懷疑是否為方法不穩(wěn)定或操作者不熟悉所致。此時應不用此次試驗數(shù)據(jù)，重新開始新的試驗。將所收集到的數(shù)據(jù)記錄在表2表2 精密度實驗原始數(shù)據(jù)記錄序號日期批次1批次2結(jié)果1結(jié)果2均值結(jié)果1結(jié)果2均值12…………1920按表3要求對數(shù)據(jù)進行進一步計算，將結(jié)果填入表3表3 精密度實驗原始數(shù)據(jù)計算日批次1批次2（結(jié)果1結(jié)果2）2（結(jié)果1結(jié)果2）212…………1920利用表4中的結(jié)果(3)、(4)可計算出批內(nèi)精密度Sr： ，其中I=檢驗日數(shù) 批間精密度估計值的計算將上述實驗結(jié)果記錄在表4中表4：批間精密度實驗原始數(shù)據(jù)記錄序號日期第一批第二批結(jié)果1（均值結(jié)果1）2結(jié)果2（均值結(jié)果2）2結(jié)果1（均值結(jié)果1）2結(jié)果2（均值結(jié)果2）212……1920合計(1)(5)(2)(6)（3）（7）（4）（8）求出均值，公式為：從上表得出：求出批間精密度，公式為：從上表得出式中n=檢驗總數(shù) 批間精密度估計值的置信區(qū)間由于檢驗次數(shù)不可能無限增加，當按規(guī)定方案，多次重復測量，就是在很好控制條件下，也很難得到相同的值，換言之，通過這樣實驗的數(shù)值只是精密度的估計值，圍繞“真值”而變動。變動的范圍大小和檢驗次數(shù)密切相關(guān)。人們往往在給出精密度值外，還給出其95%的置信區(qū)間。置信區(qū)間與所測次數(shù)相關(guān)，次數(shù)愈多，可信限愈小。，乘以標準差值就可得出95%可信限的上、下值。實際工作中，可查出95%可信限的上值的公差因數(shù)（tolerance factor），由此計算出95%可信限。實驗室在報告精密度同時，可給出95%置信區(qū)間。臨床實驗室在測定方法的精密度后，應評價得到的精密度是否滿意，最簡單辦法就是與生產(chǎn)企業(yè)（文獻）所提供的精密度進行比較，判斷是否存在差異。如果臨床實驗室所測的精密度小于生產(chǎn)企業(yè)（文獻）的精密度，說明臨床實驗室所得到的精密度是合適的。如果臨床實驗室測得的精密度大于生產(chǎn)企業(yè)（文獻）的值，可利用F檢驗法（Ftest），即方差比值檢驗（variance ratio test）對實驗室測得的結(jié)果和生產(chǎn)企業(yè)提供的結(jié)果進行比較計算。表5是為此工作設(shè)計的數(shù)據(jù)記錄和計算表格：表5 與生產(chǎn)企業(yè)（文獻）聲明批間標準差的比較表實驗濃度=聲明濃度=實驗標準差=sr或srr聲明標準差=σr或σrr方差=sr2或srr2方差=σr2或σrr2測量次數(shù)自由度=n1聲明測量次數(shù)自由度=n1注：標準差大小常與濃度有關(guān)，比較時，必須檢查二者濃度是否接近一致，如差異較大不應進行比較。如接近一致，按下列公式計算出F值，以批間精密度為例： F=Srr2/σrr2將計算出的F值和根據(jù)二組自由度從表6中查到的F值(p=)進行比較，如計算F值小于查表得出F值，雖然實驗室得到的標準差大于聲稱值，但在統(tǒng)計學上無差異。反之，說明實驗室得到的標準差沒有達到方法應達到的水平。此時，實驗室應該進一步改善條件，例如培訓操作人員，修改操作程序或者維修儀器等再次進行測定。仍然達不到時，應與生產(chǎn)企業(yè)討論和取得協(xié)助。表6 F分布臨界值表(p=)分母自由度分子自由度5 10 14 20 40 50 100 200 ∞05101520304060100120∞ 五、精密度的報告形式精密度的結(jié)果受眾多因素影響，在報告測量精密度時，應同時說明下列各點：l 批內(nèi)標準差及其95%置信區(qū)間；l 批內(nèi)變異系數(shù)。l 批間標準差及其95%置信區(qū)間。l 批間變異系數(shù)。l 實驗進行的工作日數(shù)。l 檢驗批次數(shù)。l 每個批次重復檢驗數(shù)和總檢驗數(shù)。l 試劑的種類和批號。l 校準品種類、批號和校準次數(shù)。l 如適用，使用儀器的種類和型號。附件8：體外診斷試劑分析性能評估指導原則——干擾實驗（征求意見稿） 一、概述干擾物質(zhì)是體外診斷試劑使用過程中造成測量誤差的一個主要原因，針對體外診斷試劑進行的干擾實驗是指通過實驗查找出對體外診斷試劑測量結(jié)果產(chǎn)生影響的物質(zhì)的過程。干擾實驗評估資料是評價擬上市產(chǎn)品有效性的重要依據(jù)，也是產(chǎn)品注冊所需的重要申報資料之一。本指南基于國家食品藥品監(jiān)督管理局《體外診斷試劑注冊管理辦法（試行）》（以下簡稱《辦法》）的有關(guān)要求，參考CLSI有關(guān)標準，對干擾實驗的評價方法、實驗所需材料、實驗過程及實驗結(jié)果處理進行了原則性要求。其目的是為生產(chǎn)企業(yè)進行干擾實驗評估及準備干擾實驗評估資料提供原則性指導，也為注冊管理部門審核該部分分析性能評估資料提供技術(shù)參考。由于體外診斷試劑產(chǎn)品發(fā)展速度快、專業(yè)跨度大，國家食品藥品監(jiān)督管理局將根據(jù)體外診斷試劑發(fā)展的需要，適時對本指南進行修訂。二、干擾實驗評估的基本原則（一）干擾物質(zhì)來源：干擾物質(zhì)可能來自內(nèi)源或外源物質(zhì)?？梢筛蓴_物質(zhì)的來源通常有：，例如溶血、黃疸及脂血；；；；（包括代謝物）；；，例如抗凝劑、防腐劑；，例如血清分離設(shè)備、導管、標本收集容器及塞子；，例如咖啡因，β 胡蘿卜素，罌粟籽。（二）在實施評價實驗前，必須決定臨床可接受的標準。（三）在實施評價實驗前，操作者必須熟悉儀器設(shè)備及測量程序并對精密度及準確度進行評價，在進行實驗設(shè)計時要避免遺留效應影響分析結(jié)果，確保分析系統(tǒng)保持穩(wěn)定。三、干擾實驗的評估及數(shù)據(jù)處理方法干擾物質(zhì)對實驗結(jié)果的影響，一般是通過測定對照或基礎(chǔ)樣本池中待測物的濃度計算得出的。在某些情況下，對照樣本池中可能含有一定量的內(nèi)源性干擾物質(zhì)，如膽紅素、血紅蛋白、蛋白質(zhì)