免疫組化染色常見問題及解釋(編輯修改稿)
2025-07-04 15:20 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 它有許多優(yōu)點(diǎn)，但也有許多不足之處：①可作為各種疾病檢測(cè)的常備抗體。在各單位的常規(guī)活檢診斷中，有常見的病例，也有罕見的病例，尤其是后者，有時(shí)很長(zhǎng)時(shí)間才遇到一例，這就給抗體的應(yīng)用和備用提出了更高的要求，如除了常用的抗體外，還需備用一些較為罕見病例的抗體。這樣才能解決臨床的診斷問題，如臨時(shí)購(gòu)買，則需較長(zhǎng)的時(shí)間，這樣就會(huì)延誤診斷。實(shí)踐證明：濃縮型抗體，可作為常備檢測(cè)抗體。當(dāng)購(gòu)買抗體后，根據(jù)檢測(cè)病例的數(shù)量，在無菌的條件下，將抗體分成小包裝，然后用蠟?zāi)し馄饋?，于?0℃的低溫冰箱中保存，臨用時(shí)取出一支，用指溫促其回升至室溫，然后用PBS稀釋即可使用，這種抗體可保存3年左右。②成本低，價(jià)格較便宜。它與即用型的抗體相比較，價(jià)格要便宜好多，如以某公司2002年2003年的CK為例，價(jià)格260元，該抗體可稀釋為5000ml，以每張切片所需抗體為50ul計(jì)，可標(biāo)記100例，，價(jià)格150元，可標(biāo)記30例，每例一抗體需5元。③需要稀釋抗體，手續(xù)較為復(fù)雜。 對(duì)于新購(gòu)入的濃縮型的抗體，使用時(shí)必須將稀釋為工作液，才能使用，對(duì)于從未用過的抗體，還必須實(shí)驗(yàn)其實(shí)際的稀釋度，因?yàn)楦鞣N抗體，廠家都做了相應(yīng)的稀釋度的實(shí)驗(yàn)，但這是大概的稀釋度，要使抗體真正適合于本單位的稀釋度，就必須對(duì)抗體的稀釋度進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，如1::::25等，如果結(jié)果在1：50上是最佳結(jié)果，這就是最佳的稀釋點(diǎn)，如果在這范圍內(nèi)找不出最佳稀釋點(diǎn)，則應(yīng)繼續(xù)實(shí)驗(yàn)直到找出最佳稀釋點(diǎn)為止。④需要配置各型號(hào)的微量加樣器，以利于量取精確的抗體量。⑤需要具備一定的英語(yǔ)水平，因?yàn)闈饪s型的抗體多為進(jìn)口試劑，其使用書都以英文為主，其中涉入抗體的來源，適應(yīng)讓稀釋對(duì)什么組織或細(xì)胞可起反應(yīng)等。近幾年來，免疫組化技術(shù)應(yīng)用的推廣，即用型抗體的應(yīng)用越來越受到人們的歡迎，根據(jù)幾年來的使用，認(rèn)為它有許多優(yōu)點(diǎn)和不足：①使用方便。對(duì)于初學(xué)者來說，它是一種最好的抗體，不管什么樣的病例和切片，只要有抗體，不需要自己摸索稀釋度，拿起試劑瓶一滴即可，極不方便。②對(duì)于不具備或基本不懂免疫組化技術(shù)的人，只要按照說明書的方法使用，也能獲得理想的結(jié)果。③不需要配置多種昂貴的微量加樣器。現(xiàn)今的微量加樣器，如為進(jìn)口貨，貴者多達(dá)兩千多元。而即用型抗體無需再行稀釋，即買即用，無需配備其余器械。④特別適合于基層單位。基層單位，無需多大的投資，就能開展免疫組化的工作，這對(duì)于提高診斷的準(zhǔn)確率，極有好處。⑤價(jià)格較濃縮型抗體貴。⑥即用型抗體不可作為常備貯存抗體。即用型抗體，一般有效期為一年。如果用量大的單位，對(duì)于3ml一個(gè)包裝的抗體，一年需要用幾支，這對(duì)抗體來說，不會(huì)造成浪費(fèi)。但如果為較小的單位，一年中標(biāo)記的病例較少，購(gòu)買抗體時(shí)也盡量選小包裝的抗體。如果碰上罕見的病例，有時(shí)一年也標(biāo)記不了幾例，這樣就應(yīng)采用濃縮的了。即用型的抗體，有效期為一年，但真正購(gòu)買到的抗體使用期就不可能為一年，因?yàn)榭贵w從生產(chǎn)商到銷售商的手里，需要一定的時(shí)間，如果運(yùn)氣好的話，你購(gòu)買到的抗體，是剛交到銷售商的手里，那么，使用的時(shí)間可能長(zhǎng)些，但如果在銷售商的手中滯留了一段時(shí)間，抗體的有效使用期就可能不會(huì)太長(zhǎng)，五個(gè)月、六個(gè)月或者三個(gè)月。如果在有效的時(shí)間內(nèi)不能使用完。稍為超過一些時(shí)間還可以，如果時(shí)間過長(zhǎng)，就應(yīng)當(dāng)丟棄，因?yàn)闀?huì)影響標(biāo)記的質(zhì)量。有人抱怨，剛買的抗體標(biāo)記很好，后來就漸漸不好了。這是因?yàn)殡S著時(shí)間的延長(zhǎng)，抗體的活性會(huì)逐漸失去生物活性，導(dǎo)致了標(biāo)記質(zhì)量的下降。（2） 抗體的適應(yīng)癥。在眾多的抗體中，按它們的實(shí)際使用范圍，把它們分為兩個(gè)類：，涂片，細(xì)胞培養(yǎng)片。，冰凍切片，涂片和細(xì)胞培養(yǎng)片。（3）選擇合適的單克隆或多克隆抗體?？贵w除了分為上述的兩個(gè)類外，從其克隆的高度講，也有單克隆和多克隆之分。，在目前臨床常用的抗體當(dāng)中，大部分都是單克隆抗體。這
教學(xué)教案相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1