免疫組化染色常見問題及解釋(編輯修改稿)
2025-07-04 15:20 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 它有許多優(yōu)點，但也有許多不足之處：①可作為各種疾病檢測的常備抗體。在各單位的常規(guī)活檢診斷中，有常見的病例，也有罕見的病例，尤其是后者，有時很長時間才遇到一例，這就給抗體的應用和備用提出了更高的要求，如除了常用的抗體外，還需備用一些較為罕見病例的抗體。這樣才能解決臨床的診斷問題，如臨時購買，則需較長的時間，這樣就會延誤診斷。實踐證明：濃縮型抗體，可作為常備檢測抗體。當購買抗體后，根據(jù)檢測病例的數(shù)量，在無菌的條件下，將抗體分成小包裝，然后用蠟膜封起來，于－30℃的低溫冰箱中保存，臨用時取出一支，用指溫促其回升至室溫，然后用PBS稀釋即可使用，這種抗體可保存3年左右。②成本低，價格較便宜。它與即用型的抗體相比較，價格要便宜好多，如以某公司2002年2003年的CK為例，價格260元，該抗體可稀釋為5000ml，以每張切片所需抗體為50ul計，可標記100例，，價格150元，可標記30例，每例一抗體需5元。③需要稀釋抗體，手續(xù)較為復雜?！ τ谛沦徣氲臐饪s型的抗體，使用時必須將稀釋為工作液，才能使用，對于從未用過的抗體，還必須實驗其實際的稀釋度，因為各種抗體，廠家都做了相應的稀釋度的實驗，但這是大概的稀釋度，要使抗體真正適合于本單位的稀釋度，就必須對抗體的稀釋度進行實驗，如1::::25等，如果結(jié)果在1：50上是最佳結(jié)果，這就是最佳的稀釋點，如果在這范圍內(nèi)找不出最佳稀釋點，則應繼續(xù)實驗直到找出最佳稀釋點為止。④需要配置各型號的微量加樣器，以利于量取精確的抗體量。⑤需要具備一定的英語水平，因為濃縮型的抗體多為進口試劑，其使用書都以英文為主，其中涉入抗體的來源，適應讓稀釋對什么組織或細胞可起反應等。近幾年來，免疫組化技術(shù)應用的推廣，即用型抗體的應用越來越受到人們的歡迎，根據(jù)幾年來的使用，認為它有許多優(yōu)點和不足：①使用方便。對于初學者來說，它是一種最好的抗體，不管什么樣的病例和切片，只要有抗體，不需要自己摸索稀釋度，拿起試劑瓶一滴即可，極不方便。②對于不具備或基本不懂免疫組化技術(shù)的人，只要按照說明書的方法使用，也能獲得理想的結(jié)果。③不需要配置多種昂貴的微量加樣器?，F(xiàn)今的微量加樣器，如為進口貨，貴者多達兩千多元。而即用型抗體無需再行稀釋，即買即用，無需配備其余器械。④特別適合于基層單位。基層單位，無需多大的投資，就能開展免疫組化的工作，這對于提高診斷的準確率，極有好處。⑤價格較濃縮型抗體貴。⑥即用型抗體不可作為常備貯存抗體。即用型抗體，一般有效期為一年。如果用量大的單位，對于3ml一個包裝的抗體，一年需要用幾支，這對抗體來說，不會造成浪費。但如果為較小的單位，一年中標記的病例較少，購買抗體時也盡量選小包裝的抗體。如果碰上罕見的病例，有時一年也標記不了幾例，這樣就應采用濃縮的了。即用型的抗體，有效期為一年，但真正購買到的抗體使用期就不可能為一年，因為抗體從生產(chǎn)商到銷售商的手里，需要一定的時間，如果運氣好的話，你購買到的抗體，是剛交到銷售商的手里，那么，使用的時間可能長些，但如果在銷售商的手中滯留了一段時間，抗體的有效使用期就可能不會太長，五個月、六個月或者三個月。如果在有效的時間內(nèi)不能使用完。稍為超過一些時間還可以，如果時間過長，就應當丟棄，因為會影響標記的質(zhì)量。有人抱怨，剛買的抗體標記很好，后來就漸漸不好了。這是因為隨著時間的延長，抗體的活性會逐漸失去生物活性，導致了標記質(zhì)量的下降。（2） 抗體的適應癥。在眾多的抗體中，按它們的實際使用范圍，把它們分為兩個類：，涂片，細胞培養(yǎng)片。，冰凍切片，涂片和細胞培養(yǎng)片。（3）選擇合適的單克隆或多克隆抗體。抗體除了分為上述的兩個類外，從其克隆的高度講，也有單克隆和多克隆之分。，在目前臨床常用的抗體當中，大部分都是單克隆抗體。這
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