wb免疫印跡實驗常見問題全匯總(編輯修改稿)
2025-04-20 05:08 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 是上槽放新鮮的緩沖液，下槽可以是重復(fù)使用過一兩次的緩沖液。WB 實驗中常會出現(xiàn)各種問題，也跟技術(shù)菌們一起分享下 WB 實驗中各種問題及應(yīng)用對策，希望給您的實驗帶來實實在在的幫助~WB問題匯總及解決建議問題原因解決方案條帶形狀不好看膠凝的不均勻，聚合不好灌膠前將溶液充分混勻某些樣品鹽濃度較高除鹽或?qū)悠符}濃度調(diào)成一致緩沖液陳舊，成分改變重配凝膠下面有氣泡電泳前先將氣泡趕走電泳時溫度過高降低電流或電壓樣品中含有不溶性顆粒樣品充分攪拌混勻電極不平衡或者加樣位置偏斜調(diào)整電極和加樣蛋白條帶信號弱樣品上樣量不足或目的蛋白濃度過低加大上樣量或濃縮樣品轉(zhuǎn)移不完全或過轉(zhuǎn)移可以用麗春紅染膜并結(jié)合染膠（考馬斯亮藍）后確定條帶是否轉(zhuǎn)至膜上或轉(zhuǎn)移過頭；適當調(diào)整轉(zhuǎn)膜的時間和電流抗體濃度低增加抗體濃度或延長孵育時間封閉過度減少封閉劑的量或縮短時間，換用不同封閉劑類型顯色劑失效更換顯色劑（吸取A、B液的槍頭不可混用）顯色或曝光時間不足延長顯色或曝光時間HRP 抑制劑所用溶液和容器內(nèi)避免含有疊氮化鈉轉(zhuǎn)膜效率低轉(zhuǎn)膜緩沖液pH值與目的蛋白等電點相近提高轉(zhuǎn)膜緩沖液pH值凝膠與膜之間存在氣泡轉(zhuǎn)膜前要排盡氣泡轉(zhuǎn)印膜種類選擇不當使用質(zhì)量可靠的PVDF膜或硝酸纖維素膜電壓或電流過小濕轉(zhuǎn)時2
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