【文章內(nèi)容簡介】 為46:46:8；激發(fā)波長 274mm；發(fā)射波長 440nm；柱溫 35℃ ；進樣量 100μl ；外標法定量，結(jié)果表明，色譜峰面積與含量之間有良好的線性關(guān)系，方法的檢出限為，加標回收率為 ％～ ％，對不同濃度的樣品相對標準偏差RSD 為 ％～ ％。 嘔吐毒素的免疫親和層析高效 液相色譜的檢測方法的建立。試樣經(jīng)聚乙二醇水溶液提取，提取液稀釋過濾后經(jīng)過含有嘔吐毒素特異性抗體的免疫親和柱層析凈化，洗脫液用 C18 色譜柱分離，熒光檢測器測定。流動相為甲醇 :水為 20:80；檢測波長 218nm；柱溫 35℃ ；進樣量 50μl ；外標法定量，結(jié)果表明，色譜峰面積與含量之間有良好的線性關(guān)系，方法的檢出限為 ，加標回收率為 ％～ ％，對不同濃度的樣品相對標準偏差 RSD 為 ％～％。 此外本實驗發(fā)現(xiàn)，紅發(fā)夫酵母對赭曲霉毒素 A的脫除效果最為理想，可以將赭曲霉毒素 A轉(zhuǎn)化為赭 曲霉毒素 a，另外對紅發(fā)夫酵母對赭曲霉毒素 A的脫毒條件進行了優(yōu)化，發(fā)現(xiàn)紅發(fā)夫酵母在 30攝氏度可以保持較高活性，脫毒 13天，溫度在 25－－ 35攝氏度時紅發(fā)夫酵母對赭曲霉毒素 A的降解率最高，可以達到 80％以上。 真菌毒素，是某些真菌產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物或二級代謝產(chǎn)物，通常存在于霉變的谷物中，一旦通過食物鏈進入人體后，將可能造成致畸，致突變和致癌等嚴重危害，因此在全球食品安全中備受關(guān)注。目前，真菌毒素的檢測方法較多，其中高效液相色譜法精密度最高。本論文按照真菌毒素研究學者普遍認同的菌屬產(chǎn)毒的分類方法，針對不同菌屬產(chǎn)生的真 菌毒素具有分子結(jié)構(gòu)式相似的特點，選出具有代表性的四種真菌毒素，同時針對不同的食品，系統(tǒng)的建立了這四種真菌毒素的免疫親和層析高效液相色譜的檢測方法，方法操作簡便、準確，回收率高、精密度良好、重現(xiàn)性好，最終并且初步研究了赭曲霉毒素 A 的微生物脫毒方法。 赭曲霉毒素 A 的免疫親和層析高效液相色譜的檢測方法的建立。經(jīng)甲醇－水或碳酸氫鈉－水溶液提取，提取液稀釋過濾后經(jīng)過含有赭曲霉毒 A特異性抗體的免疫親和柱層析凈化，洗脫液用 C18 色譜柱分離，熒光檢測器測定。流動相為乙腈 :水 :乙酸為 99:99:2；激發(fā)波長 333nm；發(fā) 射波長 477nm；柱溫 35℃ ；進樣量 100μl ；外標法定量，結(jié)果表明，色譜峰面積與含量之間有良好的線性關(guān)系，方法的檢出限為 ，加標回收率為 ％～ 106％，對不同濃度的樣品相對標準偏差 RSD 為 ％～ ％。 T－ 2毒素的免疫親和層析高效液相色譜的檢測方法的建立。經(jīng)甲醇－水溶液提取，提取液稀釋過濾后經(jīng)過含有 T－ 2 毒素特異性抗體的免疫親和柱層析凈化，洗脫液用 C18 色譜柱分離，用 1－葸腈 (1－ AN)來將其衍生，熒光檢測器測定。流動相為乙腈：水 =75:25；激發(fā)波長 381nm；發(fā)射 波長 470nm；柱溫 35℃ ；進樣量 20μl ；外標法定量，結(jié)果表明，色譜峰面積與含量之間有良好的線性關(guān)系，方法的檢出限為 5μg/kg ，加標回收率為％～ ％，對不同濃度的樣品相對標準偏差 RSD 為 ％～ ％。 玉米赤霉烯酮的免疫親和層析高效液相色譜的檢測方法的建立。試樣經(jīng)乙腈－水溶液提取，提取液稀釋過濾后經(jīng)過含有玉米赤霉烯酮特異性抗體的免疫親和柱層析凈化，洗脫液用 C18 色譜柱分離，熒光檢測器測定。流動相為乙腈 :水 :甲醇為46:46:8；激發(fā)波長 274mm；發(fā)射波長 440nm；柱溫 35℃ ；進樣量 100μl ；外標法定量，結(jié)果表明，色譜峰面積與含量之間有良好的線性關(guān)系，方法的檢出限為，加標回收率為 ％～ ％，對不同濃度的樣品相對標準偏差RSD 為 ％～ ％。 嘔吐毒素的免疫親和層析高效液相色譜的檢測方法的建立。試樣經(jīng)聚乙二醇水溶液提取，提取液稀釋過濾后經(jīng)過含有嘔吐毒素特異性抗體的免疫親和柱層析凈化，洗脫液用 C18 色譜柱分離，熒光檢測器測定。流動相為甲醇 :水為 20:80；檢測波長 218nm；柱溫 35℃ ；進樣量 50μl ；外標法定量，結(jié)果表明，色譜峰面積與含 量之間有良好的線性關(guān)系，方法的檢出限為 ，加標回收率為 ％～ ％，對不同濃度的樣品相對標準偏差 RSD 為 ％～％。 此外本實驗發(fā)現(xiàn)，紅發(fā)夫酵母對赭曲霉毒素 A的脫除效果最為理想，可以將赭曲霉毒素 A轉(zhuǎn)化為赭曲霉毒素 a，另外對紅發(fā)夫酵母對赭曲霉毒素 A的脫毒條件進行了優(yōu)化，發(fā)現(xiàn)紅發(fā)夫酵母在 30攝氏度可以保持較高活性，脫毒 13天，溫度在 25－－ 35攝氏度時紅發(fā)夫酵母對赭曲霉毒素 A的降解率最高，可以達到 80％以上。 真菌毒素，是某些真菌產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物或二級代謝產(chǎn)物，通常存在于霉變的 谷物中，一旦通過食物鏈進入人體后，將可能造成致畸，致突變和致癌等嚴重危害，因此在全球食品安全中備受關(guān)注。目前，真菌毒素的檢測方法較多，其中高效液相色譜法精密度最高。本論文按照真菌毒素研究學者普遍認同的菌屬產(chǎn)毒的分類方法，針對不同菌屬產(chǎn)生的真菌毒素具有分子結(jié)構(gòu)式相似的特點，選出具有代表性的四種真菌毒素，同時針對不同的食品，系統(tǒng)的建立了這四種真菌毒素的免疫親和層析高效液相色譜的檢測方法，方法操作簡便、準確，回收率高、精密度良好、重現(xiàn)性好，最終并且初步研究了赭曲霉毒素 A 的微生物脫毒方法。 赭曲霉毒素 A 的免疫親 和層析高效液相色譜的檢測方法的建立。經(jīng)甲醇－水或碳酸氫鈉－水溶液提取，提取液稀釋過濾后經(jīng)過含有赭曲霉毒 A特異性抗體的免疫親和柱層析凈化，洗脫液用 C18 色譜柱分離，熒光檢測器測定。流動相為乙腈 :水 :乙酸為 99:99:2；激發(fā)波長 333nm；發(fā)射波長 477nm；柱溫 35℃ ；進樣量 100μl ；外標法定量，結(jié)果表明，色譜峰面積與含量之間有良好的線性關(guān)系，方法的檢出限為 ，加標回收率為 ％～ 106％，對不同濃度的樣品相對標準偏差 RSD 為 ％～ ％。 T－ 2毒素的免疫親和層析高效液 相色譜的檢測方法的建立。經(jīng)甲醇－水溶液提取，提取液稀釋過濾后經(jīng)過含有 T－ 2 毒素特異性抗體的免疫親和柱層析凈化，洗脫液用 C18 色譜柱分離，用 1－葸腈 (1－ AN)來將其衍生，熒光檢測器測定。流動相為乙腈：水 =75:25；激發(fā)波長 381nm；發(fā)射波長 470nm；柱溫 35℃ ；進樣量 20μl ；外標法定量，結(jié)果表明，色譜峰面積與含量之間有良好的線性關(guān)系，方法的檢出限為 5μg/kg ，加標回收率為％～ ％，對不同濃度的樣品相對標準偏差 RSD 為 ％～ ％。 玉米赤霉烯酮的免疫親和層析高效液相色譜的 檢測方法的建立。試樣經(jīng)乙腈－水溶液提取，提取液稀釋過濾后經(jīng)過含有玉米赤霉烯酮特異性抗體的免疫親和柱層析凈化，洗脫液用 C18 色譜柱分離，熒光檢測器測定。流動相為乙腈 :水 :甲醇為46:46:8；激發(fā)波長 274mm；發(fā)射波長 440nm；柱溫 35℃ ；進樣量 100μl ；外標法定量，結(jié)果表明，色譜峰面積與含量之間有良好的線性關(guān)系，方法的檢出限為，加標回收率為 ％～ ％，對不同濃度的樣品相對標準偏差RSD 為 ％～ ％。 嘔吐毒素的免疫親和層析高效液相色譜的檢測方法的建立。試樣經(jīng) 聚乙二醇水溶液提取，提取液稀釋過濾后經(jīng)過含有嘔吐毒素特異性抗體的免疫親和柱層析凈化，洗脫液用 C18 色譜柱分離，熒光檢測器測定。流動相為甲醇 :水為 20:80；檢測波長 218nm；柱溫 35℃ ；進樣量 50μl ；外標法定量，結(jié)果表明，色譜峰面積與含量之間有良好的線性關(guān)系，方法的檢出限為 ，加標回收率為 ％～ ％，對不同濃度的樣品相對標準偏差 RSD 為 ％～％。 此外本實驗發(fā)現(xiàn)，紅發(fā)夫酵母對赭曲霉毒素 A的脫除效果最為理想，可以將赭曲霉毒素 A轉(zhuǎn)化為赭曲霉毒素 a，另外對紅發(fā)夫酵母對赭 曲霉毒素 A的脫毒條件進行了優(yōu)化，發(fā)現(xiàn)紅發(fā)夫酵母在 30攝氏度可以保持較高活性，脫毒 13天，溫度在 25－－ 35攝氏度時紅發(fā)夫酵母對赭曲霉毒素 A的降解率最高，可以達到 80％以上。 真