薄層層析柱層析ppt課件(編輯修改稿)
2025-05-30 05:18 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 薄板色譜，是快速分離和定性分析 少量物質(zhì) 的一種很重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，屬 固 液吸附色譜 ，它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點(diǎn)，一方面適用于少量樣品（幾到幾微克，甚至 ）的分離；另一方面在制作薄層板時(shí)，把吸附層加厚加大，又可用來(lái)精制樣品，此法特別適用于 揮發(fā)性較小或較高溫度易發(fā)生變化 而不能用氣相色譜分析的物質(zhì)。此外，薄層色譜法還可用來(lái) 跟蹤有機(jī)反應(yīng) 及進(jìn)行 柱色譜之前的一種“預(yù)試”。 （二）薄層層析法 ： 吸附劑被涂布在玻璃板上，形成薄薄的平面涂層。干燥后在涂層的一端點(diǎn)樣，放入一個(gè)盛有少量展開(kāi)劑的的有蓋容器中。展開(kāi)劑接觸到吸附劑涂層，借毛細(xì)作用向上移動(dòng)。經(jīng)過(guò)在吸附劑和展開(kāi)劑之間的多次吸附 溶解作用，將混合物中各組分分離成孤立的樣點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)混合物的分離。 ?⑴ 固定相選擇 柱色譜中提到的吸附劑都可以用作為薄層色譜的固定相，分離性能及使用選擇同柱色譜的選擇原則相同（各種吸附劑見(jiàn)柱色譜表 1）。 一般用于薄層色譜時(shí)，要求吸附劑的粒度更小。商品吸附劑區(qū)分為色譜級(jí)（用于柱色譜）和薄層色譜級(jí)（用于薄層色譜）。 ?⑵ 展開(kāi)劑選擇 薄層色譜展開(kāi)劑的選擇和柱色譜一樣，主要根據(jù)樣品中各組分的極性、溶劑對(duì)于樣品中各組分溶解度等因素來(lái)考慮。展開(kāi)劑的極性越大，對(duì)化合物的洗脫力也越大。（各種溶劑極性見(jiàn)柱色譜表 2）。 ? 選擇展開(kāi)劑時(shí)，除參照表列溶劑極性來(lái)選擇外，更多地采用試驗(yàn)的方法，在一塊薄層板上進(jìn)行試驗(yàn)： ? ①若所選展開(kāi)劑使混合物中所有的組分點(diǎn)都移到了溶劑前沿，此溶劑的極性過(guò)強(qiáng)； ? ②若所選展開(kāi)劑幾乎不能使混合物中的組分點(diǎn)移動(dòng)，留在了原點(diǎn)上，此溶劑的極性過(guò)弱。 當(dāng)一種溶劑不能很好地展開(kāi)各組分時(shí)，常選擇用混合溶劑作為展開(kāi)劑。先用一種極性較小的溶劑為基礎(chǔ)溶劑展開(kāi)混合物，若展開(kāi)不好，用極性較大的溶劑與前一溶劑混合，調(diào)整極性，再次試驗(yàn)，直到選出合適的展開(kāi)劑組合。合適的混合展開(kāi)劑常需多次仔細(xì)選擇才能確定。 ? ⑶ 相對(duì)移動(dòng)值 從點(diǎn)樣原點(diǎn)開(kāi)始到展開(kāi)后的溶劑前沿，是溶劑的移動(dòng)距離，記為 l0，混合物中各組分的移動(dòng)距離分別記為 l1， l2， l3 … （移動(dòng)值示意圖）。 比移值示意圖 在不同的展開(kāi)條件下，各化合物的移動(dòng)距離不會(huì)相同，而在同一條件下，相對(duì)于展開(kāi)劑的移動(dòng)距離，各化合物有可比較的展開(kāi)數(shù)據(jù)，稱為 相對(duì)移動(dòng)值 ，或 比移值 ： Rf=l1/l0 在相同條件下測(cè)得的比移值可以作為化合物的薄層色譜特征值進(jìn)行比較對(duì)照。 l0 l1 l2 ? ⑷ 顯色 分離的化合物若有顏色，很容易識(shí)別出來(lái)各個(gè)樣點(diǎn)。但多數(shù)情況下化合物沒(méi)有顏色，要識(shí)別樣點(diǎn)，必須使樣點(diǎn)顯色。通用的顯色方法有碘蒸氣顯色和紫外線顯色。 ①碘蒸氣顯色：將展開(kāi)的薄層板揮發(fā)干展開(kāi)劑后，放在盛有碘晶體的封閉容器中，升華產(chǎn)生的碘蒸氣能與有機(jī)物分子形成有色的締合物，完成顯色。 ②紫外
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