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正文內(nèi)容

薄層層析柱層析ppt課件(編輯修改稿)

2025-05-30 05:18 本頁(yè)面
 

【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 薄板色譜,是快速分離和定性分析 少量物質(zhì) 的一種很重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù),屬 固 液吸附色譜 ,它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點(diǎn),一方面適用于少量樣品(幾到幾微克,甚至 )的分離;另一方面在制作薄層板時(shí),把吸附層加厚加大,又可用來(lái)精制樣品,此法特別適用于 揮發(fā)性較小或較高溫度易發(fā)生變化 而不能用氣相色譜分析的物質(zhì)。此外,薄層色譜法還可用來(lái) 跟蹤有機(jī)反應(yīng) 及進(jìn)行 柱色譜之前的一種“預(yù)試”。 (二)薄層層析法 : 吸附劑被涂布在玻璃板上,形成薄薄的平面涂層。干燥后在涂層的一端點(diǎn)樣,放入一個(gè)盛有少量展開(kāi)劑的的有蓋容器中。展開(kāi)劑接觸到吸附劑涂層,借毛細(xì)作用向上移動(dòng)。經(jīng)過(guò)在吸附劑和展開(kāi)劑之間的多次吸附 溶解作用,將混合物中各組分分離成孤立的樣點(diǎn),實(shí)現(xiàn)混合物的分離。 ?⑴ 固定相選擇 柱色譜中提到的吸附劑都可以用作為薄層色譜的固定相,分離性能及使用選擇同柱色譜的選擇原則相同(各種吸附劑見(jiàn)柱色譜表 1)。 一般用于薄層色譜時(shí),要求吸附劑的粒度更小。商品吸附劑區(qū)分為色譜級(jí)(用于柱色譜)和薄層色譜級(jí)(用于薄層色譜)。 ?⑵ 展開(kāi)劑選擇 薄層色譜展開(kāi)劑的選擇和柱色譜一樣,主要根據(jù)樣品中各組分的極性、溶劑對(duì)于樣品中各組分溶解度等因素來(lái)考慮。展開(kāi)劑的極性越大,對(duì)化合物的洗脫力也越大。(各種溶劑極性見(jiàn)柱色譜表 2)。 ? 選擇展開(kāi)劑時(shí),除參照表列溶劑極性來(lái)選擇外,更多地采用試驗(yàn)的方法,在一塊薄層板上進(jìn)行試驗(yàn): ? ①若所選展開(kāi)劑使混合物中所有的組分點(diǎn)都移到了溶劑前沿,此溶劑的極性過(guò)強(qiáng); ? ②若所選展開(kāi)劑幾乎不能使混合物中的組分點(diǎn)移動(dòng),留在了原點(diǎn)上,此溶劑的極性過(guò)弱。 當(dāng)一種溶劑不能很好地展開(kāi)各組分時(shí),常選擇用混合溶劑作為展開(kāi)劑。先用一種極性較小的溶劑為基礎(chǔ)溶劑展開(kāi)混合物,若展開(kāi)不好,用極性較大的溶劑與前一溶劑混合,調(diào)整極性,再次試驗(yàn),直到選出合適的展開(kāi)劑組合。合適的混合展開(kāi)劑常需多次仔細(xì)選擇才能確定。 ? ⑶ 相對(duì)移動(dòng)值 從點(diǎn)樣原點(diǎn)開(kāi)始到展開(kāi)后的溶劑前沿,是溶劑的移動(dòng)距離,記為 l0,混合物中各組分的移動(dòng)距離分別記為 l1, l2, l3 … (移動(dòng)值示意圖)。 比移值示意圖 在不同的展開(kāi)條件下,各化合物的移動(dòng)距離不會(huì)相同,而在同一條件下,相對(duì)于展開(kāi)劑的移動(dòng)距離,各化合物有可比較的展開(kāi)數(shù)據(jù),稱(chēng)為 相對(duì)移動(dòng)值 ,或 比移值 : Rf=l1/l0 在相同條件下測(cè)得的比移值可以作為化合物的薄層色譜特征值進(jìn)行比較對(duì)照。 l0 l1 l2 ? ⑷ 顯色 分離的化合物若有顏色,很容易識(shí)別出來(lái)各個(gè)樣點(diǎn)。但多數(shù)情況下化合物沒(méi)有顏色,要識(shí)別樣點(diǎn),必須使樣點(diǎn)顯色。通用的顯色方法有碘蒸氣顯色和紫外線顯色。 ①碘蒸氣顯色:將展開(kāi)的薄層板揮發(fā)干展開(kāi)劑后,放在盛有碘晶體的封閉容器中,升華產(chǎn)生的碘蒸氣能與有機(jī)物分子形成有色的締合物,完成顯色。 ②紫外
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