薄層層析柱層析ppt課件(存儲(chǔ)版)
【正文】 上，形成薄薄的平面涂層。展開(kāi)劑的極性越大，對(duì)化合物的洗脫力也越大。 l0 l1 l2 ? ⑷ 顯色 分離的化合物若有顏色，很容易識(shí)別出來(lái)各個(gè)樣點(diǎn)。 三、基本操作 ? 正確裝柱、制板、點(diǎn)樣及分離操作 薄層板在不同的層析缸中展開(kāi)的方式 柱色譜裝置圖 裝柱 ?用鑷子取少許脫脂棉放于干凈的色譜柱底部，輕輕塞緊，關(guān)閉活塞，通過(guò)一干燥的玻璃漏斗向柱中慢慢加入色譜柱用中性氧化鋁 10g，并用橡皮塞輕輕敲打色譜柱下部，使填裝緊密，在上面加一片小圓濾紙或脫脂棉使表面水平。在燒杯中放入 2g硅膠，加入 5— 6ml蒸餾水，調(diào)成糊狀。點(diǎn)樣要輕，不可刺破薄層。 ? 柱層析時(shí)，柱子要致密緊實(shí)，無(wú)氣泡。 洗脫溶劑的解析能力的強(qiáng)弱順序是：醋酸、水、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、醚、氯仿、苯、四氯化碳和己烷等。帶陰離子基團(tuán)的，如 DEAE— （二乙基胺乙基）和QAE— （四級(jí)胺乙基）等為陰離子交換劑。控制交聯(lián)度以形成不同孔徑的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。 ?凝膠過(guò)濾層析 。 支持物是人工合成的交聯(lián)高聚物，在水中膨脹后成為凝膠。 ?分配層析 ?離子交換層析 支持物是人工交聯(lián)的帶有 能解離基團(tuán)的有機(jī)高分子 ，如離子交換樹(shù)脂、離子交換纖維素、離子交換凝膠等。 吸附劑在使用前須先用 加熱脫水 等方法活化。 四、實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵及注意事項(xiàng)： ? 薄層層析時(shí)，薄層板的制備要厚薄均勻，表面平整光潔。若因樣品溶液太稀，可重復(fù)點(diǎn)樣，但應(yīng)待前次點(diǎn)樣的溶劑揮發(fā)后方可重新點(diǎn)樣，以防樣點(diǎn)過(guò)大，造成拖尾、擴(kuò)散等現(xiàn)象，而影響分離效果。薄層應(yīng)盡量均勻且厚度要固定。此時(shí)常用盛有顯色劑溶液的噴霧器噴板顯色。 ? ⑶ 相對(duì)移動(dòng)值 從點(diǎn)樣原點(diǎn)開(kāi)始到展開(kāi)后的溶劑前沿，是溶劑的移動(dòng)距離，記為 l0，混合物中各組分的移動(dòng)距離分別記為 l1， l2， l3 … （移動(dòng)值示意圖）。商品吸附劑區(qū)分為色譜級(jí)（用于柱色譜）和薄層色譜級(jí)（用于薄層色譜）。 ? 薄層層析又叫薄板色譜，是快速分離和定性分析 少量物質(zhì) 的一種很重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，屬 固 液吸附色譜 ，它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點(diǎn)，一方面適用于少量樣品（幾到幾微克，甚至 ）的分離；另一方面在制作薄層板時(shí)，把吸附層加厚加大，又可用來(lái)精制樣品，此法特別適用于 揮發(fā)性較小或較高溫度易發(fā)生變化 而不能用氣相色譜分析的物質(zhì)。 ? 吸附劑的粒度越小，比表面越大，分離效果越明顯，但流動(dòng)相流過(guò)越慢，有時(shí)會(huì)產(chǎn)生分離帶的再重疊，適得其反。 表 1：各種吸附劑對(duì)于極性有機(jī)物的吸附作用強(qiáng)度 ?常用吸附劑有氧化鋁、硅膠、活性炭等（表 1）。吸附色譜分離可采用 柱色譜 和 薄層色譜 兩種方式。 這兩大類層析是以 流動(dòng)相不同 來(lái)劃分的。當(dāng)流動(dòng)相流經(jīng)固定相時(shí)，被分離物質(zhì)在兩相間的分配，由平衡狀態(tài)到失
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