實驗五離子交換柱層析法分離氨基酸(編輯修改稿)
2025-06-17 06:48 本頁面
【文章內容簡介】 作注意點 （ 一 ） 離子交換劑的選擇 原則： 根據(jù)被分離物質的性質選擇 — 同一性質離子交換劑中選用對被分離物質各組分之間結合力 差異大 的型號交換劑 ， 以保證通過離子交換層析后能得到比較滿意的結果 。 考慮因素： 大分子物質選用凝膠 ， 其次選用纖維素 根據(jù)分離過程的實驗條件 強酸強堿 — 應用廣泛 弱酸型 — 只能在堿性 pH范圍內使用 弱堿型 — 只能在酸性 pH范圍內使用 （ 二 ） 緩沖液的選擇 原則 ：不能發(fā)生化學反應 ， 所帶電荷應與樣品一致 。 避免使樣品變性 (三 )洗脫劑 原則 ：所用洗脫液比吸著物質具有更活潑的離子或基團 改變 pH或離子強度 ?增強洗脫液與離子交換劑的結合力 ?降低分離物與離子交換劑的結合力 洗脫方式：梯度洗脫 四、應用 分離多肽蛋白 、 氨基酸 、 核酸及其他帶電的生物分子 離子交換層析法分離氨基酸及測定 [原理 ] 所用樣品為天冬氨酸和賴氨酸的混合液 ，分別屬酸性氨基酸 ()、 堿性氨基酸()， 在緩沖溶液中分別帶正電荷和負電荷 ， 與 強酸型陽離子交換樹脂 Dowex50親和力有很大不同 ， 在一定的洗脫條件下洗脫 ，將它們分離 。 利用氨基酸可與茚三酮反應生成有色化合物進行氨基酸鑒定 。 紫色物質，用于 α－氨基酸的比色測定和紙層析顯色 與水含茚三酮的反應： R C HN H2C O O HOOO HO H
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