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氨基酸紙層析ppt課件(編輯修改稿)

2025-05-28 04:16 本頁面
 

【文章內容簡介】 原點到溶劑前沿的距離 2022/5/29 11 影響 Rf值的主要因素: Rf決定于被分離物質在兩相間的分配系數(shù)以及 兩相間的體積比。由于在同一實驗條件下,兩相體 積比是一常數(shù),所以主要決定于分配系數(shù)。不同物 質分配系數(shù)不同, Rf也就不同。 ( 1)物質的結構和分子極性: 物質的結構不同極性不同,在兩相中的溶解度也 就不同,物質的極性決定了物質在水和有機溶劑之間 的分配系數(shù),極性大的易溶于水中即固定相中, Rf ??;反之 ,Rf則較大。 2022/5/29 12 ( 2) 層析溶劑: 首先,溶劑的純度要高。 其次 , 溶劑系統(tǒng)選擇應考慮被分離的物質在溶劑系統(tǒng)中的Rf在 ~ 。 再次 , 溶劑系統(tǒng)必須新鮮配制 , 如正丁醇 甲酸 水系統(tǒng)久放易引起酯化 。 ( 3) pH值: 溶劑、濾紙和樣品的 pH值都會影響物質的解離,從而影響物質的 極性和溶解度 ,使 Rf改變; 2022/5/29 13 ( 4)濾紙: 層析濾紙由高純度棉花制成, 要求濾紙要清潔 ,質地均一,厚薄一致,纖維松緊度適中,具有一定的機械強度,要被溶劑所飽和。不同型號的濾紙,其厚薄程度、纖維松緊度各不相同,因此,濾紙纖維結合水的量不一樣,兩相的體積比也就不同, Rf也不同; 另外,濾紙的雜質也會影響 Rf,必要時進行預處理(可用 ~ HCl處理除去金屬離子) . 2022/5/29 14 ( 5)室驗室的溫度和時間 : 溫度影響物質在兩相中的溶解度,即影響 分配系數(shù) ; 也影響濾紙纖維的水合作用從而影響 固定相的體積 ;也影響溶劑系統(tǒng)的含水量,即影響流動相的組分比例 。 層 析必須在恒溫條件下進行。 2022/5/29 15
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