核酸attachppt課件(編輯修改稿)
2025-05-28 01:09 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 NRN+NN H 2C H 3 NN+N H 2C H 3NNRNNN H 2N+NRC H 3N+NRC H 3H NNH 2 NON+NN H 2ORC H 34．環(huán)外氨基的反應(yīng) ? 環(huán)外氨基在適當(dāng)條件下，也可以發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。 ? 胞嘧啶核苷在亞硝酸作用下，可以形成重氮鹽，再轉(zhuǎn)變?yōu)槟蜞奏ず塑?。因此生物體內(nèi)亞硝酸的存在有可能改變 DNA的堿基組成。 ? 腺嘌呤核苷和鳥嘌呤核苷也能發(fā)生類似的反應(yīng)，分別形成次黃嘌呤核苷（ I）和黃嘌呤核苷（ X）。 ? 這種變化，將影響或改變堿基形成氫鍵的能力和方向，導(dǎo)致 DNA復(fù)制錯誤，是引起基因突變的重要原因之一。 NNN H 2ORH O N O NNN 2 +ORH 2 O NNO HORH NNORO5．光聚合反應(yīng) ? 胸腺嘧啶堿基在紫外光照射下，可以發(fā)生二聚加成反應(yīng)： ? ? 在 DNA分子中 ， 如果兩個胸腺嘧啶堿基相鄰 ， 在紫外光照射下 ， 可能發(fā)生上述聚合反應(yīng) ， 其結(jié)果是破壞了正常復(fù)制或轉(zhuǎn)錄 。 NC H 3H NOORN HNOORC H 3N HNOORC H 3NC H 3H NOORO H N HNORC H 3O HUVROOH NC H 3NH 2 O6．環(huán)外氧的烷基化反應(yīng) ? 由于含氧堿基存在酮式和烯醇式的互變異構(gòu)，烯醇式中的羥基可以被烷基化轉(zhuǎn)變?yōu)榉€(wěn)定的烯醇醚。 ? 鳥嘌呤核苷烷基化形成 6甲氧基鳥嘌呤核苷后，不再與 C配對，而與 T配對。 ? 這種情況將引起 DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄及信息表達(dá)出現(xiàn)錯誤。 二、核酸的性質(zhì) ? 1．核酸的兩性性質(zhì)及等電點(diǎn) ? 與蛋白質(zhì)相似，核酸分子中既含有酸性基團(tuán)（磷酸基）也含有堿性基團(tuán)（氨基），因而核酸也具有兩性性質(zhì)。 ? 由于核酸分子中的磷酸是一個中等強(qiáng)度的酸，而堿性（氨基）是一個弱堿，所以核酸的等電點(diǎn)比較低。如DNA的等電點(diǎn)為 4～ ， RNA的等電點(diǎn)為 2～ 。 ? RNA的等電點(diǎn)比 DNA低的原因，是 RNA分子中核糖基 2′ OH通過氫鍵促進(jìn)了磷酸基上質(zhì)子的解離。 DNA沒有這種作用。 2．核酸的水解 ? （ 1）酸或堿水解 ? 核酸分子中的磷酸二酯鍵可在酸或堿性條件下水解切斷。 ? DNA和 RNA對酸或堿的耐受程度有很大差別。例如，在 mol/L NaOH溶液中， RNA幾乎可以完全水解，生成2′ 或 3′ 磷酸核苷； DNA在同樣條件下則不受影響。這種水解性能上的差別，與 RNA核糖基上 2′ OH的鄰基參與作用有很大的關(guān)系。在 RNA水解時， 2′ OH首先進(jìn)攻磷酸基，在斷開磷酯鍵的同時形成環(huán)狀磷酸二酯，再在堿的作用形成水解產(chǎn)物。 （ 2）酶水解 ? 生物體內(nèi)存在多種核酸水解酶。這些酶可以催化水解多聚核苷酸鏈中的磷酸二酯鍵。 ? 以 DNA為底物的 DNA水解酶（ DNases）和以 RNA為底物的RNA水解酶（ RNases）。 ? 根據(jù)作用方式又分作兩類：核酸外切酶和核酸內(nèi)切酶。 ? 核酸外切酶的作用方式是從多聚核苷酸鏈的一端（ 3′ 端或 5′ 端）開始，逐個水解切除核苷酸；核酸內(nèi)切酶的作用方式剛好和外切酶相反，它從多聚核苷酸鏈中間開始，在某個位點(diǎn)切斷磷酸二酯鍵。 ? 在分子生物學(xué)研究中最有應(yīng)用價值的是限制性核酸內(nèi)切酶 。 這種酶可以特異性的水解核酸中某些特定堿基順序部位 。 (3)核酸的紫外吸收 ? 在核酸分子中，由于嘌呤堿和嘧啶堿具有共軛雙鍵體系，因而具有獨(dú)特的紫外線吸收光譜，一般在 260nm左右有最大吸收峰，可以作為核酸及其組份定性和定量測定的依據(jù)。 3．核酸的變性、復(fù)性與雜交 ? (1) 核酸的變性 ? 核酸的變性是指核酸雙螺旋區(qū)的多聚核苷酸鏈間的氫鍵斷裂，變成單鏈結(jié)構(gòu)的過程。變性核酸將失去其部分或全部的生物活性。核酸的變性并不涉及磷酸二酯鍵的斷裂，所以它的一級結(jié)構(gòu) (堿基順序 )保持不變。 ? 能夠引起核酸變性的因素很多 。 溫度升高 、 酸堿度改變 、 甲醛和尿素等的存在均可引起核酸的變性 。 ? 當(dāng) DNA的稀鹽溶液加熱到 80100℃ 時，雙螺旋結(jié)構(gòu)即發(fā)生解體，兩條鏈彼此分開，形成無規(guī)線團(tuán)。 ? DNA變性后，它的一系列性質(zhì)也隨之發(fā)生變化，如紫外吸收 (260 nm)值升高 , 粘度降低等。 ? RNA本身只有局部的雙螺旋區(qū)，所以變性行為所引起的性質(zhì)變化沒有 DNA那樣明顯。 ? 利用紫外吸收的變化，可以檢測核酸變性的情況。例如，天然狀態(tài)的 DNA在完全變性后，紫外吸收 (260 nm)值增加 25－ 40%，而 RNA變性后，約增加 %。這種現(xiàn)象稱為增色效應(yīng) 肽核酸 DNA變性的特征 ? DNA的變性過程是突變性的，它在很窄的溫度
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