freepeople性欧美熟妇, 色戒完整版无删减158分钟hd, 无码精品国产vα在线观看DVD, 丰满少妇伦精品无码专区在线观看,艾栗栗与纹身男宾馆3p50分钟,国产AV片在线观看,黑人与美女高潮,18岁女RAPPERDISSSUBS,国产手机在机看影片

正文內容

核酸分子雜交ppt課件(2)(編輯修改稿)

2025-06-08 04:01 本頁面
 

【文章內容簡介】 ? 核酸的保護( 內源 RNA酶 ) – 低溫、苯酚、氯仿、 SDS可以部分抑制 RNA酶的活性,保護 RNA不被酶解。 ? 探針 – 探針序列需與感興趣的基因互補 – 探針需要有熒光或同位素標記以利于檢測 – 長度一般為 252022bp的 DNA或 RNA 實驗原理- 探針制備 gene X PCR probe U 堿性磷酸酶 OPO3 HPO4 O O 目標 mRNA Spacer Digoxigenin探針 AntiDigoxigenin Antibody Digoxigenin Hapten Alkaline phosphatase CDPStar 不穩(wěn)定中間產物分解發(fā)光 Northern雜交使用了生物素標記。生物素標記檢測是以 DIGdUTP為底物,用隨機摻入法進行 DNA標記, PCR合成標記有地高辛的探針,然后加入抗地高辛( DIG) 堿性磷酸酶 復合物 AntiDIGAP的抗體,利用堿性磷酸酶和化學底物作用檢測到雜交的靶 DNA。 實驗原理-信號檢測 ? 核酸分子雜交又可分為 – 核酸在體外與探針雜交(膜上印跡雜交) – 在細胞內進行雜交(細胞原位雜交) ? 分子雜交可以在液相及固相中進行,目前實驗室中廣泛采用的是在固相膜上進行的固-液雜交。 ? 膜上印跡雜交 – 將待測的 DNA或 RNA分子經瓊脂糖凝膠電泳分離后原位轉移到固相支持物(硝酸纖維素膜或尼龍膜)上 – 雜交液(液相)中的探針與印跡到固相膜上的特異片段發(fā)生雜交 實驗原理 ? 分子雜交的實驗涉及到的三項技術 – 核酸凝膠電泳技術 – 印跡技術 – 分子雜交技術 ? 分子雜交的實驗涉及到的三大內容 – 制備被檢的核酸或蛋白質樣品 (或標本 ) – 制備雜交探針 – 印跡及雜交 實驗原理 實驗設備 ? 常規(guī)設備 – 移液器, tip頭,離心機 ? RNA電泳 – 金屬浴,水 平凝膠電泳儀,微波爐, 紫外凝膠成像系統(tǒng) ? 紫外分光光度計 ? 轉膜過程 – 3M濾紙,普通濾紙,尼龍膜,托盤,玻璃板,封口膜, 1000克重物,吸水紙,保鮮膜,手術刀片,刀柄 ? 預雜交、雜交 – 水浴搖床,雜交袋,封口器 ? 洗膜、信號檢測 – 搖床,雜交袋, X光片,暗室,暗盒 實驗試劑 ? RNA提取液( TSE) ? 100 mmol/L TrisCl ? 20 mmol/L EDTA ? 200 mmol/L NaCl ? 1%SDS ? PVPP 、 β巰基乙醇、苯酚、氯仿、異戊醇、異丙醇、乙醇 ? 瓊脂糖、 MOPS、 EB ? 20 SSC: 3 mol/L NaCl, mol/L 檸檬酸鈉( PH ) ? 鮭精 DNA ? 雜交液: 7% SDS, 50mmol/L Na3PO4( pH ), 2% blocking stock solution, 5 SSC, 50%甲酰胺, %Sodium Nlauroyl Sarcoine ? Buffer I: mol/L maleic acid, mol/L NaCl( pH ) ? Buffer II: 10% blocking stock solution (Antidig) ? Buffer III: mol/L Tris,
點擊復制文檔內容
教學課件相關推薦
文庫吧 www.dybbs8.com
備案圖片鄂ICP備17016276號-1