實(shí)驗(yàn)10雙縮脲法測定蛋白質(zhì)含量(編輯修改稿)
2025-05-26 05:38 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 022μg/ml； Micro BCA試劑測定范圍是 ?快速： 45分鐘內(nèi)完成測定 ， 比經(jīng)典的 Lowry法快 4倍而且更加方便 ?經(jīng)濟(jì)實(shí)用：除試管外 ， 測定可在微孔板中進(jìn)行 ， 大大節(jié)約樣品和試劑用量 ?不受樣品中離子型和非離子型去污劑影響 ?檢測不同蛋白質(zhì)分子的變異系數(shù)小于考馬斯亮藍(lán) 基本原理： 堿性條件下 ， 蛋白將 Cu2+還原為 Cu+， Cu+與 BCA試劑形成紫顏色的絡(luò)合物 ， 測定其在 562nm處的吸收值 ， 并與標(biāo)準(zhǔn)曲線對比 ， 即可計(jì)算待測蛋白的濃度 。 考馬斯亮藍(lán)染色法測定蛋白質(zhì)濃度 考馬斯亮藍(lán)在一定蛋白質(zhì)濃度范圍內(nèi) ， 蛋白質(zhì)和染料結(jié)合符合比爾定律 ， 因此可以通過測定染料在 595nm處光吸收的增加量得到與其結(jié)合的蛋白質(zhì)量 。 該法簡單 、 迅速 、 干擾物質(zhì)少 、 靈敏度高 （ 比 Lowry法靈敏 4倍 ） 。 Coomassie DyeBased 蛋白質(zhì)定量 PROTEIN + Amax = 595nm BLUE Acid Coomassie G250 Protein Dye Complex O CH 2 CH 3 NH C CH 3 CH 3 N CH 2 SO 3 CH 3 CH 2 N CH 2 CH 2 CH 3 SO 3 Na + 雙縮脲法測定蛋白質(zhì) * 雙縮脲反應(yīng)： 雙縮脲在堿性條件下與銅離子結(jié)合生成紫紅色化合物 ， 顏色深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比 。本法測定蛋白質(zhì)范圍 110mg H2NCONH2 + NH2CONH2 H2NCONHCONH2 ＋ NH3
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