age,sdspage電泳分離(編輯修改稿)
2025-05-23 08:49 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 容易徹底解離為亞基 ,所測亞基 Mr會偏高 ?膠束中蛋白 /SDS的比例并非都是 1: ※ 含輔酶的復(fù)合蛋白，多酶復(fù)合體等 :其亞基 Mr可能測不準(zhǔn) ?堿性組蛋白和酸性鐵氧還蛋白在 SDSPAGE所測亞基Mr偏高 ※ 組蛋白 亞基 Mr為 21kD， 但測定出為 35kD 組蛋白的正電荷抵消了 SDS部分負電荷 ?膠束中蛋白電荷量不能忽視 ※ 鐵氧還蛋白的亞基 Mr只有 8kD， 但 Rf= 鐵氧還蛋白不能和 SDS充分結(jié)合 ?強堿性的精蛋白在 SDSPAGE中會沉淀 可能是精蛋白的正電荷和 SDS的負電荷相差無幾 ?磷酸化前后的蛋白激酶 能以不同的比例和 SDS結(jié)合 ※ 其構(gòu)象會發(fā)生改變，妨礙了蛋白和 SDS的結(jié)合 ※ SDSPAGE中所測亞基 Mr會偏高 ?同一蛋白能以不同的比例和 SDS結(jié)合 ※ 經(jīng)磷酸化后，會使激酶的負電荷增加， ?同一鈣調(diào)蛋白可以不同比例和 SDS結(jié)合 不同 Ca2+濃度下的鈣調(diào)蛋白的電泳行為 SDSPAGE中的蛋白大小 無 Ca2+ 20kD Ca2+處于飽和狀態(tài) 12kD Ca2+處于亞飽和狀態(tài) 在 2012kD之間有多條帶 ? 不同 Ca2+濃度下的鈣調(diào)蛋白的疏水性質(zhì)不同 ? 疏水性質(zhì)不同導(dǎo)致和 SDS結(jié)合的比例不同 ? 導(dǎo)致鈣調(diào)蛋白有不同的大小 ?鐵氧還蛋白和鈣調(diào)蛋白是酸性蛋白，無論是否和SDS結(jié)合和結(jié)合程度如何，在堿性電泳系統(tǒng)的 SDSPAGE中均向負極泳動，只是遷移率不同而已 ?蛋白 SDS膠束可以帶正電荷 ?如果堿性蛋白和 SDS結(jié)合率很低， 達不到 1:,它就可能向負極泳動。 ?堿性蛋白能充分和 SDS結(jié)合，但其所帶正電荷比SDS負電荷還要多，使蛋白 SDS膠束帶正電，同樣會向負極泳動 ?植物綠葉粗蛋白中含大量負極泳動的蛋白 菜心綠葉粗蛋白經(jīng) SDS醋酸纖維素薄膜電泳 ,下方為正極 ,箭頭處為蛋白樣品點樣的位置 正極 負 極 ?植物綠葉粗蛋白中含有向負極泳動的蛋白 菜心 (A)和生菜 (B)綠葉粗蛋白經(jīng) SDS醋酸纖維素薄膜電泳 ,下方為正極 ,箭頭處為蛋白樣品點樣的位置 正極 負 極 A B ?植物綠葉粗蛋白中向負極泳動的蛋白的氨基酸組成 Table Amino acid contents of cathode buffer after crude protein from B. campestris ssp. chinensis var. utillis leaves was subjected to SDSPAGE Amino acid Content ( %) Amino acid Content ( %) Asp Thr Ser Glu Gly Ala Cys Val Met IIe
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