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正文內(nèi)容

酶促反應動力學實驗(編輯修改稿)

2025-05-14 12:15 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 速度以初速度表示3) 4) 分析自己的實驗數(shù)據(jù)實驗(二)——溫度對酶活性的影響【實驗目的】 了解溫度對酶活性及酶促反應速度的影響,加深對酶特性的認識?!緦嶒炘怼? 每種酶都有其最適溫度,高于或低于此溫度酶的活性都降低。一般而言,若酶處于過高的溫度環(huán)境中,會使酶活性永久喪失;而若處于極低溫度的環(huán)境中只會使酶活性受到抑制,一旦溫度適宜,酶又會全部或部分的恢復其活性?!緝x器與試劑】儀器:1.冰箱 4.吸量管及吸量管架 7.燒杯試劑:1.:。2.%%氯化鈉溶液:,溶于100ml蒸餾水(需加熱)。3.0.03175g/L碘液4.1M HCl溶液 NaOH溶液 【實驗步驟】1.制管和預溫由于本實驗對恒溫反應要求較高,故每個溫度梯度使用兩支試管,分別標記為A管和B管,同時欲溫底物與酶。%淀粉液;B管使用移液槍加入稀釋100倍的唾液,相對應的兩支試管置于設定的溫度下預溫5min。取12支潔凈試管,參照下表加入試劑:管號1(0℃)2(室溫)3(37℃)4(50℃)5(70℃)6(室溫)A(ml)222222%淀粉液(ml)22222用2ml的蒸餾水代替B稀釋100倍的唾液(ml)111111*6號管為對照組(比色時作為0號管),置于室溫,且淀粉液用蒸餾水代替2.混合A、B管將1號A管試劑迅速加入溫度對應的B管中(為了最大限度保證酶的量),此時為計時的起點(使用秒表),搖勻后放回對應溫度繼續(xù)水浴。注意:轉(zhuǎn)移A管試劑前需將其搖勻。3.時間控制然后每隔1min或2min(時間自定)按上步操作依次把6號的A、B管混合 ,嚴格控制好時間。4.中止反應準確反應13min,向1號管加入2滴1M HCl溶液,立即混勻,中止反應,按上一步的順序和時間間隔依次對各管進行操作,并移至試管架。后再各用2滴1M NaOH溶液中和每管。5.顯色在每管中各加入2ml ,觀察現(xiàn)象。6.比色若不同溫度梯度間現(xiàn)象差別不明顯,則進行比色,通過光密度值來比較?!窘Y(jié)果處理】記錄現(xiàn)象(或比較吸光度值),做出合理分析?!咀⒁馐马棥繃栏褡⒁鈺r間的控制及各物質(zhì)的添加量?!舅伎碱}】如果某同學(沒有嚴格按照教案步驟)做出的實驗結(jié)果為唾液淀粉酶的最適溫度為70度,請分析他得出這樣的結(jié)果的可能原因。實驗(三)——PH對酶活性的影響【實驗目的】 了解PH對酶活性及酶促反應速度的影響,加深對酶特性的認識?!緦嶒炘怼? :PH影響酶活性中心的某些必須基團的解
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