酶促反應(yīng)動力學(xué)實(shí)驗(yàn)(編輯修改稿)
2025-05-14 12:15 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 速度以初速度表示3） 4） 分析自己的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)實(shí)驗(yàn)（二）——溫度對酶活性的影響【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹? 了解溫度對酶活性及酶促反應(yīng)速度的影響，加深對酶特性的認(rèn)識?！緦?shí)驗(yàn)原理】 每種酶都有其最適溫度，高于或低于此溫度酶的活性都降低。一般而言，若酶處于過高的溫度環(huán)境中，會使酶活性永久喪失；而若處于極低溫度的環(huán)境中只會使酶活性受到抑制，一旦溫度適宜，酶又會全部或部分的恢復(fù)其活性。【儀器與試劑】儀器：1．冰箱 4．吸量管及吸量管架 7．燒杯試劑：1．：。2．%%氯化鈉溶液：，溶于100ml蒸餾水（需加熱）。3．0．03175g/L碘液4．1M HCl溶液 NaOH溶液 【實(shí)驗(yàn)步驟】1．制管和預(yù)溫由于本實(shí)驗(yàn)對恒溫反應(yīng)要求較高，故每個溫度梯度使用兩支試管，分別標(biāo)記為A管和B管，同時欲溫底物與酶。%淀粉液；B管使用移液槍加入稀釋100倍的唾液，相對應(yīng)的兩支試管置于設(shè)定的溫度下預(yù)溫5min。取12支潔凈試管，參照下表加入試劑：管號1（0℃）2（室溫）3（37℃）4（50℃）5（70℃）6（室溫）A（ml）222222%淀粉液（ml）22222用2ml的蒸餾水代替B稀釋100倍的唾液（ml）111111*6號管為對照組（比色時作為0號管），置于室溫，且淀粉液用蒸餾水代替2．混合A、B管將1號A管試劑迅速加入溫度對應(yīng)的B管中(為了最大限度保證酶的量)，此時為計(jì)時的起點(diǎn)（使用秒表），搖勻后放回對應(yīng)溫度繼續(xù)水浴。注意：轉(zhuǎn)移A管試劑前需將其搖勻。3．時間控制然后每隔1min或2min（時間自定）按上步操作依次把6號的A、B管混合 ，嚴(yán)格控制好時間。4．中止反應(yīng)準(zhǔn)確反應(yīng)13min，向1號管加入2滴1M HCl溶液，立即混勻，中止反應(yīng)，按上一步的順序和時間間隔依次對各管進(jìn)行操作，并移至試管架。后再各用2滴1M NaOH溶液中和每管。5．顯色在每管中各加入2ml ，觀察現(xiàn)象。6．比色若不同溫度梯度間現(xiàn)象差別不明顯，則進(jìn)行比色，通過光密度值來比較?！窘Y(jié)果處理】記錄現(xiàn)象（或比較吸光度值），做出合理分析?！咀⒁馐马?xiàng)】嚴(yán)格注意時間的控制及各物質(zhì)的添加量?！舅伎碱}】如果某同學(xué)（沒有嚴(yán)格按照教案步驟）做出的實(shí)驗(yàn)結(jié)果為唾液淀粉酶的最適溫度為70度，請分析他得出這樣的結(jié)果的可能原因。實(shí)驗(yàn)（三）——PH對酶活性的影響【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹? 了解PH對酶活性及酶促反應(yīng)速度的影響，加深對酶特性的認(rèn)識?！緦?shí)驗(yàn)原理】 ：PH影響酶活性中心的某些必須基團(tuán)的解
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