【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】
菌發(fā)酵液的處理為對(duì)照。培養(yǎng)4d后測(cè)定菌株納他霉素產(chǎn)量。確定真菌發(fā)酵液最適添加時(shí)間。 真菌發(fā)酵時(shí)間對(duì)納他霉素產(chǎn)量的影響分別在產(chǎn)黃青霉、黑曲霉、釀酒酵母培養(yǎng)1d、2d、3d時(shí)取樣,制備無(wú)菌發(fā)酵液。將培養(yǎng)不同時(shí)間的真菌發(fā)酵液以5%接種量加入培養(yǎng)12h的納塔爾鏈霉菌N5菌株發(fā)酵培養(yǎng)液中,每個(gè)處理重復(fù)3次,并以不添加真菌發(fā)酵液的處理為對(duì)照。繼續(xù)培養(yǎng)84h后測(cè)定菌株納他霉素產(chǎn)量。確定3種真菌的最佳發(fā)酵時(shí)間。 真菌發(fā)酵液添加量對(duì)納他霉素產(chǎn)量的影響將產(chǎn)黃青霉、黑曲霉培養(yǎng)1d,釀酒酵母培養(yǎng)3d,制備無(wú)菌發(fā)酵液,并分別以1% 、2% 、5% 、8% 、10% 、15% 、20%的添加量加入到培養(yǎng)12h的納塔爾鏈霉菌N5菌株發(fā)酵培養(yǎng)液中,每個(gè)處理重復(fù)3次并以不添加真菌發(fā)酵液的處理為對(duì)照。培繼續(xù)培養(yǎng)84h后測(cè)定菌株納他霉素產(chǎn)量。確定3種真菌的最佳發(fā)酵時(shí)間。2.結(jié)果及分析 納他霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作以納他霉素濃度為橫坐標(biāo),OD303值為縱坐標(biāo)繪制納他霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線,見(jiàn)圖1。由圖1可看出納他霉素濃度與OD303值呈線性相關(guān),且R2=。因此可通過(guò)此標(biāo)準(zhǔn)曲線方程x=(y—)/。圖1 納他霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液曲線Fig1 The standard curve of natamyctn 發(fā)酵液加入時(shí)間對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響將產(chǎn)黃青霉發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行適當(dāng)處理后接種于培養(yǎng)不同時(shí)間的納塔爾鏈霉菌N5菌株發(fā)酵液中,繼續(xù)培養(yǎng),當(dāng)菌株培養(yǎng)4d時(shí)用紫外分光光度法測(cè)定納他霉素產(chǎn)量,結(jié)果如圖2所示。由圖2可看出產(chǎn)黃青霉發(fā)酵液對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量有明顯的促進(jìn)作用,當(dāng)在發(fā)酵培養(yǎng)12h時(shí)添加效果最佳,%。 圖2 產(chǎn)黃青霉發(fā)酵液添加時(shí)間對(duì)納他霉素產(chǎn)量的影響Fig 2 Effects of addition time of fermentation broth of Penicillium chrysogenum on the natamycin production of N5 strain將培養(yǎng)3d的黑曲霉發(fā)酵培養(yǎng)液適當(dāng)處理后于不同時(shí)間添加入N5菌株發(fā)酵培養(yǎng)液中,繼續(xù)培養(yǎng),當(dāng)菌株培養(yǎng)4d時(shí)測(cè)定納他霉素產(chǎn)量,結(jié)果見(jiàn)圖3。從圖3中可以看出黑曲霉發(fā)酵液對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的提高有顯著的促進(jìn)作用。當(dāng)在發(fā)酵培養(yǎng)12h時(shí)添加效果最佳,%。圖3黑曲霉發(fā)酵液添加時(shí)間對(duì)納他霉素產(chǎn)量的影響Fig 3 Effects of addition time of fermentation broth of Aspergillus Nigeron the natamycin production of N5 strain釀酒酵母發(fā)酵液加入時(shí)間對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響見(jiàn)圖4。由圖可見(jiàn),釀酒酵母發(fā)酵液也可明顯促進(jìn)N5菌株納他霉素的合成,最適接入時(shí)間也是菌株培養(yǎng)的12h。 圖4 釀酒酵母發(fā)酵液添加時(shí)間對(duì)納他霉素產(chǎn)量的影響Fig 4 Effects of addition time of fermentation broth of Saccharomyces cerevisiae on the natamycin production of N5 strain 真菌培養(yǎng)時(shí)間對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響 產(chǎn)黃青霉培養(yǎng)時(shí)間對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響將分別培養(yǎng)1d、2d、3d的產(chǎn)黃青霉發(fā)酵液進(jìn)行適當(dāng)處理,添加至培養(yǎng)12h的N5菌株發(fā)酵培養(yǎng)液中,繼續(xù)培養(yǎng)84h后測(cè)定菌株納他霉素產(chǎn)量,結(jié)果如圖5所示。由圖5可以看出培養(yǎng)1d的產(chǎn)黃青霉發(fā)酵液對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的促進(jìn)作用最顯著。隨著產(chǎn)黃青霉培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),發(fā)酵液對(duì)N5納他霉素產(chǎn)量的促進(jìn)作用呈下降趨勢(shì)。因此,產(chǎn)黃青霉的最佳培養(yǎng)時(shí)間為1d。圖5產(chǎn)黃青霉培養(yǎng)時(shí)間對(duì)納他霉素產(chǎn)量的影響Fig 5 Effects of culture time of Penicillium chrysogenum on the natamycin production of N5 strain 將培養(yǎng)不同時(shí)間的黑曲霉發(fā)酵液添加入N5菌株發(fā)酵液中,培養(yǎng)后測(cè)定納他霉素產(chǎn)量,結(jié)果見(jiàn)圖6。由圖6可以看出當(dāng)在N5菌株發(fā)酵液中添加培養(yǎng)1d的黑曲霉發(fā)酵液時(shí),納他霉素產(chǎn)量最高,因此,黑曲霉的最佳培養(yǎng)時(shí)間確定為1d。圖6黑曲霉培養(yǎng)時(shí)間對(duì)納他霉素產(chǎn)量的影響Fig 6 Effects of culture time of Aspergillus Niger on the natamycin production of N5 strain釀酒酵母培養(yǎng)時(shí)間對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響如圖7所示。由圖7可見(jiàn),當(dāng)在N5菌株發(fā)酵液中