應(yīng)用微生物法試劑盒檢測(cè)奶粉中維生素b6含量(編輯修改稿)
2025-05-01 23:21 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 然后加入12mlNaOH（1mol/L），mol/L，將溶液定量轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶中，用無(wú)菌水定容；實(shí)驗(yàn)用水均為滅菌超純水；樣品均為市售奶粉。 標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液準(zhǔn)確稱(chēng)取鹽酸吡哆醇（維生素B6）g，用枸櫞酸鹽緩沖液溶解并定容至100ml棕色容量瓶中，配成50mg/100ml溶液，置于冰箱中保存以備用。 標(biāo)準(zhǔn)工作液在測(cè)定時(shí)，將標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液按比例用枸櫞酸鹽緩沖液準(zhǔn)確稀釋成濃度為10mg/100ml、25mg/100ml。 樣品處理 準(zhǔn)確稱(chēng)取1g均質(zhì)后的樣品，將其加入50ml無(wú)菌離心管中，加入20ml枸櫞酸鹽緩沖液，振蕩混勻，加入10mg酸性馬鈴薯磷酸酶，振蕩混勻，37℃避光孵育1h，同時(shí)間歇性振蕩，用無(wú)菌水補(bǔ)至40ml。振蕩混勻后，在95℃水浴中提取30min，期間應(yīng)至少混合5次，然后快速冷卻至30℃以下，在8000g下離心5min。根據(jù)維生素B6的濃度范圍，ml無(wú)菌離心管中應(yīng)用無(wú)菌水對(duì)上清液進(jìn)一步稀釋成100倍或以上，使測(cè)定OD值在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)。 檢測(cè)步驟 取出所需數(shù)量的微孔板條并在板上固定，依次將150μl維生素B6檢測(cè)培養(yǎng)基、150μl標(biāo)準(zhǔn)品或樣品稀釋液加入微孔中，用黏合箔蓋住微孔條或微孔。在30℃培養(yǎng)箱中避光孵育44～48h。再次向下擠壓黏合
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