凱基tunel細(xì)胞凋亡原位檢測(cè)試劑盒(編輯修改稿)
2025-04-20 12:13 本頁面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 自身樣本的試驗(yàn)條件，從而做出客觀的試驗(yàn)結(jié)果。1． 細(xì)胞樣本的準(zhǔn)備 操作注意事項(xiàng)：1. 為防止樣本脫落，請(qǐng)使用硅烷（Silane）處理的載玻片或采用多聚賴氨酸鋪片。2. 使用PBS清洗細(xì)胞樣本時(shí)，不要直接加在細(xì)胞樣本上，以防止細(xì)胞樣本的脫落。3. 進(jìn)行PBS清洗時(shí)，以5分鐘清洗3次為標(biāo)準(zhǔn)。4. 固定液、PBS、封閉液、通透液、染色缸需用戶自備，請(qǐng)按上述方法配制。五、 標(biāo)記和顯色反應(yīng)操作注意事項(xiàng)：1. 進(jìn)行PBS清洗時(shí)，以5分鐘清洗3次為標(biāo)準(zhǔn)。2. PBS清洗后，為了各種反應(yīng)的有效進(jìn)行，請(qǐng)盡量除去PBS溶液后再進(jìn)行下一步反應(yīng)3. 在載玻片上的樣本上加上實(shí)驗(yàn)用反應(yīng)液后，請(qǐng)蓋上蓋玻片或保鮮膜，或在濕盒中進(jìn)行，這樣可以使反應(yīng)液均勻分布于樣本整體，又可以防止反應(yīng)液干燥造成實(shí)驗(yàn)失敗。4. TdT酶反應(yīng)液即用即配，短暫于冰上保存。不宜長(zhǎng)期保存，長(zhǎng)期保存會(huì)導(dǎo)酶活性的失活。5. 如果20DAB溶液顏色變深成為紫色，則不可使用，需重新配制。6. 蘇木素復(fù)染：將切片放入蘇木素染液，染色 30s10min（根據(jù)樣本做適當(dāng)調(diào)整），蒸餾水沖洗干凈后放入鹽酸甲醇溶液中5s，立即用蒸餾水沖洗干凈。分別用70%、85%、95%、無水乙醇浸泡 5分鐘。用二甲苯浸泡 10分鐘，更換二甲苯后再浸泡 10分鐘。晾干后在切片上加中性樹膠，加蓋玻片。六 常見問題的原因及推薦解決方案現(xiàn)象可能原因建議非特異性染色（例如：非凋亡細(xì)胞的強(qiáng)染色）BiotindUTP的非特異性結(jié)合勿使細(xì)胞干涸在TdT酶反應(yīng)之后，% Triton X100和1 mg/ml BSA 的PBS洗三次。TdT酶的濃度過高用TdT dilution buffer* 作1：2——1：10稀釋，內(nèi)源過氧化物酶未被封閉封閉液室溫（1525℃）封閉
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