【文章內容簡介】 otein(hsCRP)andCardiacCReactiveProtein(cCRP)Assays ，aboratory” 。ApprovedGuideline,SecondEdition2021,CLSI/NCCLSC28A2C 反應蛋白定量檢測試劑盒產品注冊技術審查指導原則編制說明一、編寫原則（一）本指導原則編寫的目的是用于指導和規(guī)范 C 反應蛋白定量檢測試 劑盒產品注冊申報過程中審查人員對注冊材料的技術審評。 （二）本指導原則旨在讓初次接觸該類產品的注冊審查人員對產品機理、結構、主要性能、預期用途等各個方面有所了解，同時讓技術審查人員在產品注冊技術審評時把握基本的尺度，對產品安全性、有效性作出系統(tǒng)評價。 二、編寫依據（一）《醫(yī)療器械監(jiān)督管理條例》（二）《體外診斷試劑注冊管理辦法（試行）》（國食藥監(jiān)械〔 2021〕 229 號）（三）《體外診斷試劑臨床研究技術指導原則》（國食藥監(jiān)械〔 2021〕 240 號）（四）《體外診斷試劑說明書編寫指導原則》（國食藥監(jiān) 械〔 2021〕 240 號）（五）《中國生物制品規(guī)程》（六）國家食品藥品監(jiān)督管理部門發(fā)布的其他規(guī)范性文件（七）現(xiàn)行的國家標準和行業(yè)標準三、指導原則中部分內容的編寫考慮（一）產品的主要技術指標制定主要參考相關國家標準、行業(yè)標準 GB/T261242021臨床化學體外診斷試劑（盒）、 YY/T11832021《酶聯(lián)免疫吸附法試劑（盒）》。 （二）為了提高本指導原則的通用性，編寫中明確本指導原則包含了免疫比濁法、化學發(fā)光法、時間分辨法、免疫熒光法等基于抗原抗體反應原理的免疫學方法。由于各種方法可能在國家標準、 行業(yè)標準的標準性能要求上不一致，如果擬申報試劑已有相應的專用國家 /行業(yè)標準或相應方法學的通用標準要求發(fā)布，則企業(yè)標準的要求不得低于上述標準要求。 （三）本指導原則參考了美國食品藥品管理局相關要求，但是對心臟 CRP 部分，考慮到國內已合并至超敏 CRP，故本指導原則未保留。同時國內某些公司申請的全程 CRP，在臨床上沒有相應的稱謂，也未保留。 四、編寫成員本指導原則的編寫成員由廣東省醫(yī)療器械注冊技術審評人員、行政審批人員、廣東省醫(yī)療器械質量監(jiān)督檢驗中心檢驗人員、臨床專家及相關企業(yè)技術人員共同組成，以 充分利用各方面的信息和資源，綜合考慮指導原則中各個方面的內容，盡量保證指導原則正確、全面、實用。 第二篇： C 反應蛋白定量檢測試劑盒產品注冊技術審查指導原則 附件 6C 反應蛋白定量檢測試劑盒產品注冊技術審查指導原則本指導原則旨在指導注冊申請人對 C 反應蛋白定量檢測試劑盒注冊申報資料的準備及撰寫，同時也為技術審評部門對注冊申報資料的技術審評提供參考。 本指導原則是對 C 反應蛋白定量檢測試劑盒的一般要求，申請人應依據產品的具體特性確定其中內容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應的科學依據，并 依據產品的具體特性對注冊申報資料的內容進行充實和細化。 本指導原則是對申請人和審查人員的指導性文件，但不包括注冊審批所涉及的行政事項，亦不作為法規(guī)強制執(zhí)行，如果有能夠滿足相關法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但需要提供詳細的研究資料和驗證資料，相關人員應在遵循相關法規(guī)的前提下使用本指導原則。 本指導原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標準體系以及當前認知水平下制定的，隨著法規(guī)和標準的不斷完善，以及科學技術的不斷發(fā)展，本指導原則相關內容也將適時進行調整。 一、范圍 C 反應蛋白定量檢測試劑盒是指利用免疫比濁法 、化學發(fā)光法、時間分辨法、免疫熒光法等基于抗原抗體反應原理的免疫學方法對人全血、血清、血漿或其他體液中的 C 反應蛋白進行體外定量測定的試劑。 二、注冊申報資料要求 （一）綜述資料 C反應蛋白（ Creactiveprotein， CRP）由肝細胞合成，在胎兒期產生，非母體胎盤傳遞。其產生機理是：當機體受感染或組織受損傷時巨噬細胞和其他白細胞等被激活，產生白細胞介素 6(IL6)、白細胞介素 1（ IL1）、腫瘤壞死因子 TNFa 等細胞因子及其他介導物，這些細胞因子和介導物到達肝臟，刺激肝細胞和上皮細胞 合成 CRP。在結構上， CRP 含 5 個多肽鏈亞單位，非共價地結合為盤形多聚體，分子量為 ～ 14萬，CRP 是一種典型的急性時相蛋白。 常規(guī) CRP 測定包括定性、半定量和定量分析，可用于評價感染，組織損傷和炎癥性疾病。對于常規(guī)的 CRP 測定，參考值通常被認為是臨床上含量高于 10 毫克 /升。在健康人群血液中 CRP 水平低于 5 毫克 /升，而在各種條件下，急性炎癥 4～ 8 小時內， CRP 值達到約 20 至 500毫克 /升。常規(guī) CRP 作為急性炎癥評估指標比紅細胞沉降率（ ESR）和白細胞計數更敏感、更可靠。 超敏 C 反應蛋 白線性范圍低端低于常規(guī) CRP，這種較低的范圍可擴大使用適應癥， C 反應蛋白是非特異性的，必須結合臨床癥狀綜合評估，不能作為特定的疾病或疾病的風險的確診依據。 圖 1 超敏 CRP 與常規(guī) CRP的區(qū)別超敏 C 反應蛋白常見的用途可作為心血管疾病風險識別的輔助手段。配合傳統(tǒng)的急性冠脈綜合征臨床診斷使用，可作為冠狀動脈疾病或急性冠脈綜合征復發(fā)的預警指示物。 圖 2超敏 CRP的臨床意義表 1各種 CRP的區(qū)別及性能要求常規(guī) CRP超敏 CRP 用途感染，組織損傷和炎癥性疾病的評價。提供炎癥性疾病的診斷，治療和監(jiān)控的信息是區(qū)分 低水平炎癥狀態(tài)的靈敏指標 ,血清hsCRP 水平與動脈粥樣硬化及急性腦梗死 (ACI)等心腦血管疾病的發(fā)生、嚴重程度及預后密切相關參考值范圍參考值范圍 :約 10mg/L 健康人群：≤ 5mg/L 急性范圍 :20500mg/L 參考值范圍 :1mg/L 推薦線性范圍≥ 5mg/L 到上限（二）產品說明書說明書承載了產品預期用途、標本采集及處理、實驗方法、檢測結果解釋以及注意事項等重要信息，是指導實驗室工作人員正確操作、臨床醫(yī)生針對檢驗結果給出合理醫(yī)學解釋的重要依據，因此，產品說明書是體外診斷試劑注冊申報最重要的文件之一。產品說明 書的格式應符合《體外診斷試劑說明書編寫指導原則》的要求，境外試劑的中文說明書除格式要求外，其內容應盡量保持與原文說明書的一致性，翻譯力求準確且符合中文表達習慣。產品說明書的所有內容均應與申請人提交的注冊申報資料中的相關研究結果保持一致，如某些內容引用自參考文獻，則應以規(guī)范格式對此內容進行標注，并單獨列明文獻的相關信息。 結合《體外診斷試劑說明書編寫指導原則》的要求，下面對 C 反應蛋白定量檢測試劑盒說明書的重點內容進行詳細說明，以指導注冊申報人員更合理地完成說明書編制。 1.【預期用途】 C 反應蛋 白定量檢測試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、全血和 /或其他體液中的 C 反應蛋白濃度，適用的樣本類型應結合實際的臨床研究情況進行確認。 注 1： CRP 值是非特異性的，不能作為特定的疾病或疾病的風險的檢測指標，不建議把 CRP的具體臨床診斷意義列入預期用途。 注 2： C反應蛋白包括常規(guī) C反應蛋白（ CRP）、超敏 CRP（ hsCRP），具體根據臨床試驗核定。 2.【主要組成成份】（ 1）說明試劑包含主要組分的名稱、數量、比例或濃度等信息。 （ 2）試劑中不包含但對該項檢測必須的組分，申請人應列出相關試劑 /耗材的名稱、貨號及其他相關信息。 （ 3）試劑盒中不包含質控品、校準品或其他耗材，應說明經驗證后推薦配合使用的商品化質控品、校準品或其他耗材的制造商、產品名稱以及產品貨號等詳細信息； 如包含校準品和 /或質控品，應說明其主要組成成分及其生物學來源，校準品應注明其定值及溯源性，質控品應有合適的檢測范圍。 3.【儲存條件及有效期】試劑的效期穩(wěn)定性、開封穩(wěn)定性、運輸穩(wěn)定性等信息作詳細介紹。并對開封后未使用產品允許暴露于空氣 中的溫度、濕度及效期等條件予以明確。 4.【樣本要求】 重點明確以下內容： （ 1）樣本采集：采集時間點是否受臨床癥狀、用藥情況等因素的影響，具體采集部位及類型，詳述具體的操作方法或列出相關操作指南文件以指導使用者（最好能夠給出具體圖示），盡量減少由于樣本采集或處理不當對實驗造成的影響。 （ 2）樣本處理及保存：樣本的保存條件及期限（短期、長期）、運輸條件等。冷藏 /冷凍樣本檢測前是否須恢復室溫，凍融次數限制。 （ 3）樣本的最大可稀釋倍數。 5.【適用機型】所有適用的儀器型 號，并提供與儀器有關的重要信息以指導用戶操作。 6.【檢驗方法】 詳細說明實驗操作的各個步驟，包括： （ 1）實驗條件：實驗環(huán)境的溫度、濕度等注意事項，檢驗試劑及樣本復溫等要求。 （ 2）試劑使用方法（手工 /半自動 /全自動）、注意事項。 （ 3）詳述待測樣品的預處理方法、步驟及注意事項。 （ 4）明確樣本檢測加樣量及觀察時間。 7.【參考值（參考范圍）】應注明常用樣本類型的正常參考值（范圍），簡單介紹設定該參考值（范圍）所選健康人群的區(qū)域特征，建議注明以下字樣“由于 地理、人種、性別及年齡等差異，建議各實驗室建立自己的參考值（范圍）”。 8.【檢驗結果的解釋】結合質控品對所有可能出現(xiàn)的結果進行合理的解釋。本試劑的檢測結果僅供臨床參考，對患者的臨床診治應結合其癥狀 /體征、病史、其他實驗室檢查及治療反應等情況綜合考慮。如存在檢測灰區(qū)，應對灰區(qū)結果的處理方式一并詳述。明確有可能存在的數值升高因素及數值降低因素，明確說明對何種條件下需要進行重復檢測，以及在重復檢測時對待測樣本可能采取的優(yōu)化條件等進行詳述。 9.【檢驗方法局限性】（ 1）干擾物質及 HOOK 效應對檢測結果的影 響。 （ 2）操作時必須嚴格按照操作規(guī)程，精心操作才能得到正確結果，對操作程序作任何修改都可能影響結果。 （ 3）有關假陰性結果的可能性分析。 某些未知成分屏蔽了抗原決定簇使之無法與抗體結合； C 反應蛋白抗原隨著樣本放置時間的延長和外界溫度上升逐漸降解無法被抗體識別； 不合理的樣本采集、轉運及處理、樣本中被測物質濃度過低等均有可能導致假陰性結果。 10.【產品性能指標】詳述以下性能指標： 注 1：由于 C 反應蛋白目前尚無國家參考品，故選用國際約定、行業(yè)參考品或 企業(yè)內部參考品，以后國家參考品若建立，采用國家參考品。 注 2：對線性范圍、分析靈敏度等的最低要求見表 1。 （ 1）準確度： a)檢測線性范圍內幾個濃度點的 C 反應蛋白參考物質（國際約定、行業(yè)參考品或企業(yè)內部參考品），檢測濃度＜ 3mg/L 時，結果誤差在177。20%內； 檢測濃度＞ 3mg/L 時，結果誤差應在177。 15%（建議相對偏差）內。 注 1：最低不得低于國家衛(wèi)生計生部門質控允許范圍。 注 2：推薦檢測范圍內高、中、低濃度樣本各選一個樣本測試，其中低值樣本推薦 hsCRP1mg/L 左右， CRP10mg/L左右。 b)回收：將已知濃度的 C 反應蛋白加入到血液基質或其他體液成份中，其回收率在（ 85%～ 115%）范圍內。 c）比對：用已上市試劑盒或參考方法進行比對試驗，結果應滿足相應要求。 （ 2）線性范圍：確立線性范圍至少應取 5點（包括下限、中限及上限），每次應重復測定三次，計算出直線方程 y=a+bx，相關系數 r 值≥ 。 （ 3）分析靈敏度或檢測限（空白限 ）： a）分析靈敏度：說明試劑的分析靈敏度或不高于某濃度水平，簡單介紹確定方法，對功能靈敏度如何研究可一并注明。 b）檢出限：用零濃度校準品或樣本稀釋液作為樣本進行檢測，重復測定 20 次，得出 20 次測量結果，計算其平均值（ M）和標準差（ SD），得出 M+2SD，根據零濃度校準品和相鄰校準品之間的濃度結果進行兩點回歸擬合得出一次方程，將 M+2SD 的結果代入上述方程中，求出對應的濃度值，即為最低檢出限。 （ 4）重復性：同一批次的檢測試劑對檢測范圍內某個濃度的 C反應蛋白樣本進行重復檢測 10 次， 計算 10 次測量結果的平均值（ M）和標準差（ SD），根據公式 CV=SD/M 100%得出變異系數，變異系數 CV（ %）≤ 15%。 注：推薦檢測范圍內高、中、低濃度樣本各選一個樣本測試，其中低值樣本推薦 hsCRP1mg/L 左右， CRP10mg/L左右。 （ 5）批間差：三個批次的檢測試劑對檢測范圍內某個濃度的 C反應蛋白樣本各重復檢測 10 次，計算 30 次測量結果的平均值（ M）和標準差（ SD），根據公式 CV=SD/M 100%得出變異系數，變異系數 CV（ %）值應≤ 20%。 注：推薦檢測范圍內高、中 、低濃度樣本各選一個樣本測試，其中低值樣本推薦 hsCRP1mg/L 左右， CRP10mg/L左右。 （ 6）校準品溯源性申請人應根據 GB/T214152021 提供所用校準品的來源、賦值