醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)新版教學(xué)大綱(編輯修改稿)
2025-05-01 23:15 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 一、外源基因在原核細胞中的表達 熟悉外源基因表達常用的原核表達體系，了解原核表達系統(tǒng)的基本條件，原核表達載體的基本要求，熟悉主要的表達調(diào)控原件（啟動子和操縱子、SD序列、終止子等），熟悉融合蛋白、非融合蛋白、分泌型表達蛋白的形成及包含體的概念，了解真核基因在原核細胞中表達的問題及可能的解決措施。二、外源基因在真核細胞中的表達了解外源基因在真核細胞中表達常用的表達系統(tǒng)，哺乳動物細胞表達載體結(jié)構(gòu)組成及特點；常用的遺傳選擇標記（胸苷激酶基因選擇系統(tǒng)，新霉素抗性選擇系統(tǒng)）；外源基因?qū)氩溉閯游锛毎膸追N常用方法（磷酸鈣轉(zhuǎn)染法，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法、顯微注射法電穿孔轉(zhuǎn)染法）；了解外源基因在真核細胞中的表達方式及表達產(chǎn)物的檢測方法。第八章 核酸分子雜交 核酸分子雜交技術(shù)是現(xiàn)代分子生物學(xué)和基因工程中最基本和重要的技術(shù)之一。 要求熟悉其應(yīng)用范圍。 一、核酸分子雜交的基本原理 掌握核酸雜交基本原理，DNA變性、復(fù)性、Tm含義。熟悉變性過程及種類，GC含量與Tm關(guān)系。了解影響復(fù)性的因素。 二、核酸探針 掌握探針概念。熟悉探針的來源，選擇探針的基本原則，寡核苷酸探針的選擇要求，探針的同位素標記及非同位素標記的特點及種類。了解探針的放射性同位素標記及非同位素標記探針的雜交信號檢測方法。 三、核酸探針的標記 熟悉幾種放射性標記方法的基本原理（DNA的缺口平移標記法、隨機引物標記法、DNA的5’末端標記法、DNA的3’末端標記法）；了解兩種非同位素標記（生物素標記、半抗原地高辛配基標記） 四、基因組DNA的Southern雜交分析熟悉Southern雜交分析的用途，Southern轉(zhuǎn)印的基本原理（毛細管轉(zhuǎn)移），了解電轉(zhuǎn)移、真空轉(zhuǎn)移的一般特點。 五、Northern雜交和RNA斑點雜交及其它雜交技術(shù)熟悉核酸分子雜交種類， Northern B1ot，Dot B1ot過程，Southern B1ot與Northern B1ot的區(qū)別。了解影響雜交反應(yīng)的因素，各種雜交條件的選擇。熟悉細胞內(nèi)原位雜交基本原理及要點。第九章 PCR技術(shù)及其在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用 PCR技術(shù)是分子生物學(xué)研究中方法學(xué)上的一次革命。了解其創(chuàng)建及發(fā)展過程。一、PCR原理與特點 掌握PCR原理，PCR過程。熟悉PCR特點。 了解PCR擴增倍數(shù)，擴增效率，PCR產(chǎn)物長度的限定平臺效應(yīng)。二、PCR系統(tǒng)的組成及PCR最適條件 掌握PCR系統(tǒng)組成。熟悉Taq DNA聚合酶的功能及特點；PCR中引物，dNTP的常用濃度范圍，引物的設(shè)計原則；PCR緩沖系統(tǒng)的組成及各成分的作用，最適濃度。了解模板DNA來源，要求、用量及抽提處理方法；PCR循環(huán)次數(shù)的確定，PCR中易發(fā)生問題及解決方法。三、PCR技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用 熟悉PCR技術(shù)衍生出來的PCR相關(guān)技術(shù)種類。了解各種PCR衍生技術(shù)的原理、特點及適用范圍。四、PCR技術(shù)在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用 熟悉PCR技術(shù)在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用范圍。了解PCR在感染性疾病病原體的診斷及研究、遺傳相關(guān)基因的檢測，惡性腫瘤的診斷與研究，法醫(yī)學(xué)研究，人類遺傳多態(tài)性研究等有關(guān)方面的現(xiàn)狀及具體應(yīng)用實例。第十章 基因診斷與基因治療一、基因診斷 掌握基因診斷的概念及其應(yīng)用范圍。(一)單基因遺傳病的基因診斷。熟悉遺傳病的概念及其類型，熟悉單基因遺傳病的共同特點，熟悉限制性酶譜分析法、斑點印跡雜交法和PCR分析法用于遺傳病基因診斷的基本原理。了解這些方法用于遺傳病診斷的例子。（二）多基因疾病的基因定位。了解基因定位一般常用的遺傳學(xué)分析方法。（三）惡性腫瘤的基因分析。了解腫瘤基因分析的實際應(yīng)用范疇。惡性腫瘤基因分析常用的一般方法及其適用范圍。（四）疾病相關(guān)基因的研究策略和方法。了解疾病相關(guān)基因的研究策略，一般研究方法及其原理。二、基因治療 (一)基因治療的定義與類型。掌握基因治療及基因療法的概念。掌握基因治療措施的四大策略，掌握基因治療的兩大類型。熟悉生殖細胞基因治療的優(yōu)點及技術(shù)上的困難。了解體細胞基因治療。 (二)基因治療的程序：熟悉基因治療的基本程序
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